利多卡因椎旁神经阻滞(Proximal Paravertebral Nerve Block, PPNB)中添加右美托咪定(Domitor?/detomidine)对接受开腹术奶牛细胞因子(Cytokines)与趋化因子(Chemokines)的影响

《The Veterinary Journal》：Influence of adding detomidine to a lidocaine paravertebral anaesthesia on cytokines and chemokines in cows undergoing laparotomy

　　

摘要：本研究探讨牛行左/右方瓣胃变位(Left/Right Abomasal Displacement, LAD/RAD)开腹矫正术时，椎旁神经周围(Perineural)给予右美托咪定(Detomidine, α2-肾上腺素受体激动剂)联合利多卡因(Lidocaine)对血浆炎性介质——细胞因子与趋化因子——的影响，并分析其与疼痛评分的关联。39头母牛随机分为利多卡因组(LIDO, n=20)与利多卡因-右美托咪定组(LIDO-DETO, n=19)，接受近端椎旁神经阻滞(Proximal Paravertebral Block, PPNB)。于术前(T0)及术后2 h(T2)、12 h(T12)、24 h(T24)采集枸橼酸抗凝血，采用基于Luminex技术的多重微球流式免疫荧光法检测IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-10、IL-17A、TNF-α、IFN-γ、CXCL10、CCL2、CCL3，酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA)检测IL-6、IL-8。术后同一时间点采用苏黎世复合疼痛量表(Zürich Composite Measure Pain Scale, ZCMPS)评估疼痛。经对数转换后，使用线性混合效应模型(Linear Mixed-Effects Model)分析时间点、分组、手术时长、术者经验及LAD/RAD对细胞因子/趋化因子的影响；采用Spearman秩相关系数(Spearman's rho)分析疼痛评分与各炎性介质的相关性(p＜0.05)。结果显示：炎性介质呈显著的时间依赖性变化；LIDO-DETO组IL-6、IFN-γ、CXCL10及CCL2水平较高；RAD/LAD与手术时长亦影响部分介质；术者经验影响极小；除IL-1α与疼痛评分呈弱负相关外，细胞因子浓度与术后疼痛评分无相关性。炎性介质表现术后时间依赖性改变，部分受椎旁给予右美托咪定调控；值得注意的是LIDO-DETO组尽管术后疼痛评分降低，IL-6与IFN-γ却升高，提示全身炎症标志物与临床疼痛相分离，凸显术后免疫应答的多因素性质。

论文解读：本研究由Simone Katja Ringer、Olivia Bühlmann、Gilles Foucras、Amanda Hartnack及Olivia d'Anselme完成，发表于《The Veterinary Journal》。目前关于α₂-肾上腺素受体激动剂（如右美托咪定detomidine、右美托咪定dexmedetomidine）加入外周神经阻滞以延长麻醉及镇痛时效的作用机制尚未明确，其在围手术期是否具有系统性抗炎作用及其与术后疼痛感知的关系亦存争议，且反刍动物中血浆细胞因子与疼痛评分关联的研究尚属空白。为此，研究人员假设椎旁给予detomidine可降低早期术后促炎细胞因子/趋化因子并使其与疼痛评分相关，进而设计临床对照试验探究LIDO与LIDO-DETO两种椎旁阻滞方案对奶牛开腹矫正方瓣胃变位术后血浆炎性介质谱及疼痛评分的影响，最终发现detomidine虽提升部分促炎介质却同时降低疼痛评分，二者无正相关，提示其镇痛效益非经由全身抗炎介导，为反刍动物区域麻醉免疫—疼痛解离现象提供了首次实证。

主要关键技术方法：研究人员纳入瑞士苏黎世大学农场动物医院行左方瓣胃变位(LAD)或右方瓣胃变位(RAD)开腹矫正术的39头成年母牛，排除妊娠晚期、严重全身性疾病、不能站立及α₂激动剂禁忌症个体；所有牛术前静注氟尼辛葡胺(Flunixin Meglumine, NSAID)后经在线随机分组为LIDO组（2%利多卡因行T13、L1、L2近端椎旁神经阻滞PPNB，n=20）与LIDO-DETO组（同法PPNB但局麻药中混入总剂量5 μg/kg detomidine，n=19），均由同一研究者盲法操作；于术前(T0)及术后2 h(T2)、12 h(T12)、24 h(T24)经颈静脉留置管采集枸橼酸钠抗凝血并分离血浆冻存于?80℃；采用Luminex多重液相芯片技术检测IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-10、IL-17A、TNF-α、IFN-γ、CXCL10、CCL2、CCL3，超出定量范围的IL-6与IL-8另行 bovine 特异性ELISA测定；术后同期由单盲观察员使用已验证的苏黎世复合疼痛量表(ZCMPS)评分，达到截点者予 rescue analgesia 并剔除后续分析；统计学上对右偏分布细胞因子取对数转换，以牛只个体为随机效应的线性混合模型分析时间、分组、干预类型(R-/LAD)、术者资历、手术时长及其与时间的交互作用，对含强影响值的指标拟合稳健混合模型作敏感性分析，疼痛评分与各介质相关性用Spearman's rho检验。

研究结果

血浆细胞因子与趋化因子浓度(Plasma cytokine and chemokine concentrations)：除CCL2与CXCL10在常规对数转换模型与稳健模型中略有差异外其余结果均稳健。LIDO-DETO组术后早期(T2)IL-6与IFN-γ显著高于LIDO组，IL-6在T12、T24呈升高趋势；CXCL10与CCL2在稳健模型中LIDO-DETO组整体偏高。其余介质(IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-8、IL-10、IL-17A、TNF-α、CCL3)未见分组主效应，但表现时间依赖变化或部分受RAD/LAD、手术时长影响（如IL-1β与IL-17A在RAD组偏高，长手术致T24时IL-1α、IL-10、IL-17A、TNF-α、CCL3下降）。结论：椎旁给予detomidine选择性上调早期术后血浆IL-6、IFN-γ及趋化因子CXCL10、CCL2，不改变其他细胞因子时间模式。

细胞因子/趋化因子与ZCMPS评分的相关性(Correlation cytokine and chemokines with the ZCMPS)：仅IL-1α与ZCMPS呈弱负相关(rho=-0.21, p=0.037)，提示较高IL-1α对应略低疼痛；CCL3呈边缘负相关但不显著(p=0.089)；其余所有检测的细胞因子与趋化因子(IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-17A、TNF-α、IFN-γ、CXCL10、CCL2)与疼痛评分均无显著相关性。结论：在该临床背景下，血浆炎性介质浓度总体上无法反映术后疼痛强度。

讨论与结论总结：添加椎旁detomidine致部分促炎细胞因子(IL-6、IFN-γ)与趋化因子(CXCL10、CCL2)早期升高，这与人类静脉用dexmedetomidine表现的系统抗炎效应不同，可能源于给药途径（单次椎旁局部混悬vs持续静脉输注）、剂量及吸收后全身暴露差异，α₂激动剂亦可抑制内源性抗炎性儿茶酚胺/皮质醇从而潜在偏移至促炎表型。尽管LIDO-DETO组炎性标记物升高，其ZCMPS疼痛评分却较LIDO组更低（前期已发表结果），且疼痛与细胞因子无相关（除IL-1α弱负相关），说明术后疼痛感知与全身炎症介质可相互解离，细胞因子不宜单独作为反刍动物疼痛强度的可靠生物标志物。研究局限性含依托原试验样本量致细胞因子分析检验效能偏低(post hoc power≈0.33)、缺术中采样、临床异质性（术者、手术时长、术前NSAID）、个体基线炎症状态差异及未做多元降维分析。结论原文译为：在接受方瓣胃变位手术的奶牛中，椎旁利多卡因阻滞添加右美托咪定(detomidine)与术后早期部分促炎细胞因子(IL-6、IFN-γ)及趋化因子(CXCL10、CCL2)升高相关，同时伴更低术后疼痛评分；除IL-1α呈意外负相关外，炎性介质与疼痛评分无一致关联，表明该情境下仅凭细胞因子浓度未必可靠反映疼痛感知。上述改变应视为对早期术后免疫应答的短暂调节而非临床有害的促炎状态，其临床意义尚待阐明。椎旁detomidine（及其他α₂肾上腺素受体激动剂）已证实的镇痛获益不大可能主要通过全身抗炎效应介导；尚需进一步研究阐明这些免疫改变的临床意义及其与牛围手术期炎症的关系。