NRP1通过调控Src/Rab7介导的TβRI溶酶体降解来促进肝纤维化

《Cell Death Discovery》：NRP1 promotes hepatic fibrosis by regulating Src/Rab7-mediated lysosomal degradation of TβRI

　　

摘要

背景与目的

肝星状细胞（HSCs）的活化以及随后TGF-β1信号通路的紊乱是肝纤维化进展的关键因素。神经纤毛蛋白1（NRP1）已被确认为参与多种信号通路的共受体，但其在调节HSCs中TGF-β受体稳定性方面的作用尚未完全阐明。本研究探讨了NRP1/Src/Rab7轴在HSCs活化过程中对TβRI溶酶体降解的调控作用。

方法

通过腹腔注射CCl₄的方式，在雄性C57BL/6小鼠体内诱导肝纤维化，持续四周。利用AAV8-pLrat-shNrp1载体实现Nrp1在HSCs中的特异性敲低。通过环己亚胺（CHX）追踪实验和氯喹处理来评估TβRI的稳定性及溶酶体降解情况。同时，在体外和体内环境中检测该过程对TGF-β1/Smad信号通路的影响。

结果

在原代HSCs中沉默Nrp1可降低TβRI蛋白水平，并减弱p-Smad2/3信号通路活性，而不会影响其mRNA水平。同样地，NRP1缺陷会加速TβRI的溶酶体降解，同时增加TβRI与LAMP1的共定位现象，以及TβRI向Rab7阳性的晚期内体转运的频率。从机制上看，NRP1的缺失会降低Src激酶的活性，进而减少Rab7的酪氨酸磷酸化程度，导致Rab7-GTP水平上升，从而使TβRI更易被送入晚期内体。Rab7的敲低或Src的重新激活可部分恢复TβRI的稳定性并恢复其下游信号传导功能。在体内实验中，HSCs特异性的Nrp1敲低可减轻CCl₄诱发的纤维化程度并降低TβRI水平，而Rab7的抑制则可部分逆转这些效应。

结论

这些数据表明，NRP1/Src/Rab7轴通过调控TβRI的溶酶体降解途径来维持其稳定性。针对这一轴系进行干预可能为阻止肝纤维化的进展提供新的策略。