基于网络药理学研究：七氟醚通过HSP90AA1促进老年术后认知功能障碍患者的海马神经元线粒体自噬作用

《Experimental Brain Research》：Exploring Sevoflurane promotes hippocampal neuron mitophagy in elderly postoperative cognitive dysfunction by HSP90AA1 based on network pharmacology

　　

摘要

作为一种常用的麻醉剂，七氟醚可能与老年人术后认知功能障碍（POCD）的发生有关。本研究旨在通过网络药理学方法，探究七氟醚是否通过HSP90AA1调控老年人POCD患者海马神经元中的线粒体自噬作用。研究利用多个数据库筛选出七氟醚、线粒体自噬及老年人POCD的共同靶点，并进行了GO和KEGG通路富集分析。通过STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用网络，再通过分子对接和动力学模拟验证七氟醚与核心靶点HSP90AA1的结合特性。在细胞实验中，用七氟醚处理小鼠海马神经元细胞（HT22），并通过敲低HSP90AA1（sh-HSP90AA1）进行干预实验。利用CCK8检测、LDH释放检测、ROS检测、JC-1染色、Western blot以及流式细胞术等方法，评估细胞的存活率、氧化应激水平、线粒体膜电位、线粒体自噬标志物的表达情况以及细胞凋亡程度。最终共筛选出42个七氟醚、线粒体自噬及老年人POCD的共同靶点，其中HSP90AA1被确定为关键的枢纽靶点之一。分子对接实验表明，七氟醚与HSP90AA1具有稳定的结合能力。细胞实验结果显示，七氟醚处理会显著抑制HT22细胞的存活率及p63蛋白的表达，同时增加LDH释放量、ROS水平、线粒体膜电位下降、LC3-II/LC3-I比例升高、PINK1、Parkin及HSP90AA1蛋白的表达，还会促进细胞凋亡。而敲低HSP90AA1则可以逆转七氟醚引发的上述细胞损伤效应。因此，七氟醚可能通过上调HSP90AA1来促进海马神经元的氧化应激、线粒体自噬及细胞凋亡，进而加重老年人的POCD病情。这些结果表明，HSP90AA1是七氟醚介导的神经元损伤的潜在关键靶点。

图解摘要