人类SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞系中reelin表达下调、拓扑异构酶IIβ改变与阿尔茨海默病相关蛋白之间的分子联系

《Experimental Brain Research》：Molecular links between reelin downregulation, topoisomerase IIβ alterations, and proteins involved in Alzheimer pathology in human SH-SY5Y neuroblastoma cell line

　　

摘要

Reelin信号在神经退行性疾病中调控多种途径，包括神经元迁移、突触可塑性、tau蛋白磷酸化以及淀粉样前体蛋白（APP）的淀粉样变性过程。本研究旨在探讨Reelin表达下调对拓扑异构酶IIβ（topo IIβ）表达的影响，因为该蛋白在神经元分化中起着关键作用，且与阿尔茨海默病（AD）等神经退行性疾病存在关联。此外，我们还想弄清Reelin表达下调与AD病理机制中相关蛋白之间的潜在关系。首先，使用Lipofectamine RNAiMAX试剂将针对reelin的小干扰RNA（siRNA）的最适浓度转染到SH-SY5Y细胞中。通过实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）确认了mRNA水平上reelin的表达下调。随后通过qRT-PCR和Western blotting分析了reelin在mRNA和蛋白质水平上的分子变化。MTT试验结果显示，Reelin表达下调会导致存活细胞数量减少。与reelin基因表达下调一致，topo IIβ、Psen1和BACE1的表达也有所下降，而tau和APP的表达则上升。尽管siRNA处理有效降低了reelin的mRNA水平及其蛋白的降解片段，但全长Reelin蛋白的水平并未出现显著变化，这表明可能存在转录后调控机制。此外，在reelin被沉默的细胞中，pTAU和APP蛋白的表达增加，而Nurr1蛋白的表达则减少。这些发现表明，reelin基因表达的下调可能通过影响topo IIβ和nurr1的表达，以及与AD病理相关的蛋白变化，从而促进神经退行性变。