针对实体瘤微环境的双模块纳米无细胞CAR-T细胞技术平台

《Journal of Hematology & Oncology》：Dual-modular-nanobody CAR-T cell technical platform against the solid tumor microenvironment

　　

摘要

背景

CAR-T疗法在血液系统癌症中效果显著，但在实体瘤中却面临挑战，这是因为肿瘤抗原的异质性以及具有免疫抑制作用的肿瘤微环境。全身性的CTLA-4阻断虽能增强免疫力，但往往会导致严重的不良反应。为克服这些限制，我们开发了一种双模块纳米抗体基CAR-T平台，该平台能够靶向癌相关成纤维细胞表面的成纤维细胞活化蛋白，并在肿瘤基质内局部释放抗CTLA-4纳米抗体。

方法

我们制备了FAP/CTLA-4双模块CAR-T细胞，并在体外检测其抗原特异性细胞毒性、细胞因子释放情况以及细胞耗竭程度。随后在异种移植模型中评估其抗肿瘤效果，观察肿瘤生长情况、动物存活时间以及T细胞浸润情况（伦理审批编号：202001011）。有一名难治性胶质母细胞瘤患者接受了鞘内输注治疗，我们监测了其临床反应、脑脊液中的细胞因子水平（伦理审批编号2022-0553-01）以及治疗安全性。同时通过转录组测序和多重免疫荧光染色技术分析肿瘤及免疫微环境的变化。

结果

在体外实验中，经过工程改造的CAR-T细胞表现出较强的细胞毒性、较高的细胞因子产生能力，且细胞耗竭程度较低。在体内实验中，这类细胞能够促使肿瘤消退、延长动物存活时间，并增加T细胞在肿瘤组织中的浸润。在那位胶质母细胞瘤患者身上，鞘内给药使疾病得到控制，脑脊液中的细胞因子水平上升，且治疗安全性良好。转录组测序和多重免疫荧光染色结果表明，肿瘤微环境正在向免疫活性状态转变。

结论

FAP/CTLA-4 DMN CAR-T疗法通过局部免疫调节作用，突破了具有免疫抑制作用的实体瘤微环境的限制，在临床前模型以及一名难治性胶质母细胞瘤患者身上都展现了良好的治疗效果。