基于人单域抗体的CAR-T细胞，通过靶向BAFF-R，在B细胞恶性肿瘤中展现出良好的临床前疗效

《BMC Cancer》：Human single domain antibody-based CAR-T cells targeting BAFF-R demonstrate promising preclinical activity in B-cell malignancies

　　

摘要

背景

以单链抗体为基础的、针对BAFF-R的CAR-T细胞已被证明对人类B细胞恶性肿瘤具有抗肿瘤作用，且能够克服CD19抗原丢失的问题。不过，基于抗原特异性单链抗体可变片段的CAR可能存在一些局限，比如CAR结合域尺寸较大。为提升BAFF-R CAR-T细胞的功能，我们设计了仅包含完全人源化重链可变域的CAR。

方法

我们利用全人源抗体噬菌体展示文库，通过蛋白质/细胞交替筛选法挑选出抗BAFF-R克隆。这些筛选出的克隆被植入第二代CAR中，进而生成CAR-T细胞。通过检测CD107a脱颗粒现象、基于荧光素酶的细胞杀伤作用、重复抗原刺激反应、激活标志物以及耗竭标志物，来评估体外CAR-T细胞的功能。将Jeko-1细胞静脉注射到NPG小鼠体内后建立异种移植模型，每周记录小鼠的肿瘤负荷和存活情况。

结果

共有三种单结构域重链抗体，即克隆#5、克隆#77和克隆#80，被选出来进行进一步研究。用这三种候选克隆构建的CAR-T细胞在体外表现出针对目标细胞的特异性激活作用以及较强的细胞毒性。其中克隆#5和克隆#77衍生的CAR-T细胞具有更强的细胞毒能力和扩增能力。这三种类型的CAR-T细胞表面耗竭标志物的表达水平没有显著差异。体内实验显示，与其它组相比，克隆#5衍生的CAR-T细胞具有更强的抗肿瘤效果，从而能延长小鼠的生存时间。

结论

我们开发了一种基于全人源单结构域抗体的新型BAFF-R CAR-T细胞产品。该产品在临床前研究中展现出良好的活性，有望为B细胞恶性肿瘤患者提供一种新的治疗选择。