在急性髓系白血病中，OT-55改变了由耐受原性BH3模拟物诱导的细胞凋亡为免疫原性细胞死亡，从而增强PD-1/Tim-3阻断作用

《Cell Death & Disease》：OT-55 reshapes tolerogenic BH3-mimetic-induced apoptosis toward immunogenic cell death in acute myeloid leukemia, potentiating PD-1/Tim-3 blockade

　　

摘要

BH3模拟物可引发细胞凋亡，但很少导致免疫原性细胞死亡，这限制了持久抗肿瘤免疫的形成。我们假设，一种能够诱导免疫原性细胞死亡的免疫佐剂可将BH3模拟物引发的耐受性细胞凋亡转化为免疫原性反应，从而增强检查点免疫疗法的效果，并克服急性髓系白血病的免疫逃逸机制。我们在体内研究了羟基香豆素OT-55与Bcl-xL抑制剂A-1331852的联合使用效果，旨在增强在依赖Bcl-xL的鼠类预防性及双侧AML疫苗模型中的PD-1/Tim-3阻断作用。为明确其临床和免疫学意义，我们通过对三个AML患者群体（TARGET-AML、BEAT-AML、GSE37642）的转录组中的34个与免疫原性细胞死亡相关的基因进行筛选，最终确定了九个基因组成的AML免疫原性细胞死亡评分指标（ATG5、CALR、CD8A、CD8B、IFNGR1、IL1B、PDIA3、PIK3CA、TLR4），这些基因均与较好的预后相关（风险比＜1，Cox回归分析）。根据免疫原性细胞死亡评分的中位数，我们将这些患者群体分为两组，通过CIBERSORTx方法分析其免疫组成，检测驱动突变，并评估白血病细胞的成熟程度。较高的免疫原性细胞死亡评分与免疫激活状态、更多的CD8? T细胞、活化的树突状细胞以及更高的HAVCR2（Tim-3）表达水平相关，这些均有利于提高生存率。对AML患者和健康供体的骨髓进行单细胞RNA测序后，我们发现了与免疫原性细胞死亡相关的细胞以及从前体细胞向中间状态转化的耗竭型T细胞，同时也在髓单核细胞型AML中观察到了T细胞的减少。在实验中，我们利用鼠类C1498髓单核细胞型AML细胞，通过预防性全细胞疫苗接种的方式，评估了OT-55与A-1331852的联合使用效果，检测了DAMP物质的释放情况、药物依赖性（CRT中和作用及apyrase酶活性）、抗原特异性CD8? T细胞反应，以及该联合疗法与抗PD-1/抗Tim-3疗法在双侧肿瘤模型中的协同作用，同时还监测了患者的血液学指标和血清指标。OT-55能够降低C1498细胞的存活率，促使CRT物质释放并增加ATP的释放，进而提供依赖于CRT/ATP但与HMGB1无关的疫苗保护作用。虽然A-1331852具有细胞毒性，但其免疫原性较弱，而与OT-55联合使用后，可增强DAMP物质的释放，提高CD8? T细胞的效应功能；结合PD-1/Tim-3阻断疗法，该组合方案能够在低毒性的前提下实现局部及远处肿瘤的控制。这些研究结果表明，OT-55是一种具有免疫原性的佐剂，能够将BH3模拟物引发的耐受性细胞凋亡转化为免疫原性细胞死亡，为髓单核细胞型AML的治疗提供了新的思路。