《Histopathology》：TROP2 immunoreactivity in pulmonary large cell neuroendocrine carcinoma
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TROP2抗体药物偶联物（antibody-drug conjugates, ADCs）已显示出有前景的抗肿瘤活性，但此类药物在肺大细胞神经内分泌癌（large cell neuroendocrine carcinoma, LCNEC）中的活性以及TROP2表
TROP2抗体药物偶联物（antibody-drug conjugates, ADCs）已显示出有前景的抗肿瘤活性，但此类药物在肺大细胞神经内分泌癌（large cell neuroendocrine carcinoma, LCNEC）中的活性以及TROP2表达情况均尚未得到充分研究。LCNEC是一种罕见且侵袭性强的癌种。本研究旨在：（i）确定LCNEC中TROP2免疫反应性的发生率；（ii）评估LCNEC中TROP2免疫反应性与RB1免疫组织化学（immunohistochemistry, IHC）缺失或与非小细胞肺癌（non-small cell lung carcinoma, NSCLC）或小细胞肺癌（small cell lung carcinoma, SCLC）成分是否存在关联；（iii）确定LCNEC中TROP2免疫反应性是否具有预后意义。
对58例纯LCNEC和25处合并 affirmative癌区域的LCNEC进行了组织微阵列格式的TROP2免疫组织化学检测。对TROP2按肿瘤细胞染色百分比进行评分，并评估胞质与膜染色情况，近似于此前已发表的一种预测性评分方法。
纯LCNEC肿瘤中，≥1%和≥50%细胞出现TROP2染色者分别占60%和26%。胞质型染色（此前认为与抗体药物偶联物疗效更佳相关）见于48%的纯LCNEC病例。与纯LCNEC相比，含NSCLC成分的肿瘤中LCNEC区域的TROP2阳性率更高（≥1%：P = 0.0087；≥50%：P = 0.011），且纯LCNEC中≥50% TROP2染色与RB1免疫组织化学保留相关（P = 0.032）。TROP2染色与无复发生存期或疾病特异性生存结局无显著关联。
TROP2免疫组织化学频繁阳性提示TROP2抗体药物偶联物可能成为LCNEC的潜在治疗选择。
肺大细胞神经内分泌癌（LCNEC）是一种罕见且具有高度侵袭性的恶性肿瘤，亟需开发有效的治疗手段。近年来，抗体药物偶联物（ADCs）作为新型靶向治疗策略在非小细胞肺癌（NSCLC）等实体瘤中展现出显著疗效，其中TROP2（trophoblast cell surface antigen 2，滋养层细胞表面抗原2）靶向ADCs已成为研究热点。TROP2是一种广泛表达于多种癌组织、而在正常组织中表达有限的跨膜糖蛋白，其作为ADCs靶点具有独特的肿瘤选择性优势。然而，尽管TROP2 ADCs在NSCLC和SCLC中已显示出治疗潜力，但其在LCNEC中的应用价值及TROP2表达特征尚不明确，这构成了本研究的核心背景。
LCNEC的诊断和治疗面临多重挑战。该肿瘤具有高度异质性，可表现为纯LCNEC，也可与NSCLC或SCLC成分合并存在。更为复杂的是，LCNEC在分子水平上可分为RB1保留型和RB1缺失型等不同亚群，这些亚群可能对治疗反应存在差异。此外，TROP2免疫组织化学（IHC）作为预测性生物标志物的优化仍存在争议。近期研究开发了一种数字化的TROP2评分系统（QCS-NMR），通过区分膜定位与胞质定位染色来预测TROP2 ADC datopotamab deruxtecan的治疗反应，该系统发现当膜区染色占比低于56%时（即胞质型染色为主），患者对药物的反应更优。然而，该评分系统依赖于深度学习算法，外部验证困难，且尚未在临床试验以外的肺癌亚型中进行过近似评估。与此同时，TROP2免疫反应性在多种癌症中作为不良预后因素已有报道，但其在LCNEC中的预后价值、与分子亚群的关系以及与组织学成分的关联均未得到研究。基于上述空白，研究人员开展了一项针对LCNEC中TROP2表达的系统研究，旨在为这一罕见肿瘤的靶向治疗提供理论依据，研究结果发表于《Histopathology》杂志分部。
本研究纳入了58例纯LCNEC、17例合并NSCLC成分的LCNEC、6例合并SCLC成分的LCNEC以及2例含LCNEC、SCLC和腺癌三种成分的肿瘤，样本队列来源于加拿大不列颠哥伦比亚大学临床档案中的手术切除标本。主要技术方法包括：基于组织微阵列（tissue microarray, TMA）的TROP2 IHC检测（采用ENZ-ABS380-0100克隆，1:1500稀释）、TROP2半定量评分（包括≥1%和≥50%两个阳性阈值，以及膜型与胞质型染色的区分），以及RB1 IHC检测用于分子分型。统计学分析采用卡方检验/ Fisher精确检验分析分类变量关联，Cox比例风险模型进行生存分析，Cohen's kappa系数评估观察者间一致性。
研究结果部分，研究人员首先报告了TROP2免疫染色的发生率。在58例纯LCNEC中，35例（60%）显示≥1%的TROP2阳性染色，15例（26%）显示≥50%的阳性染色，其中胞质型染色（<25%细胞以膜染色为主）见于28例（48%），提示相当比例的LCNEC可能具有TROP2 ADC治疗潜力。与合并NSCLC成分的LCNEC相比，纯LCNEC的TROP2阳性率显著较低（≥1%：60% vs. 94%，P = 0.0087；≥50%：26% vs. 59%，P = 0.011），这一差异在早期病例中依然存在，提示组织学成分对TROP2表达具有调控作用。值得注意的是，样本储存时间与TROP2染色阴性率相关，实际阳性率可能被低估。
在TROP2与病理临床特征的关联方面，≥50% TROP2染色与RB1 IHC保留显著相关（P = 0.032），而≥1%染色则无此关联。此外，TROP2阳性更常见于神经内分泌标记物局灶染色而非弥散染色的病例（P = 0.017-0.022），这与POU2F3阳性SCLC中TROP2高表达的特征相平行，提示TROP2可能与特定神经内分泌分化状态相关。然而，无论采用何种阈值或染色模式，TROP2均与无复发生存期（RFS）或疾病特异性生存（DSS）无显著关联，表明TROP2在LCNEC中可能主要作为治疗预测标志物而非预后标志物。
讨论部分，研究人员首先强调了本研究的创新性：这是首个系统评估LCNEC中TROP2表达与组织学、免疫组织化学及临床结局关系的研究。尽管TROP2在多种恶性肿瘤中被报道与不良预后相关，且既往一项研究在高级别肺神经内分泌癌混合队列中发现膜型TROP2高表达与预后改善相关，但本研究未能证实TROP2与LCNEC survivalT的关联，这可能是由于样本量限制或不同的评分方法所致。
关于TROP2 IHC评分方法，研究人员指出当前文献中评分系统存在高度异质性。本研究首次尝试模拟先前与ADC疗效相关的数字化评分系统（QCS-NMR），通过人工区分膜型与胞质型染色来评估其适用性。胞质型染色可能反映TROP2蛋白的内化过程，这或许能增强ADC的内吞效率和细胞毒活性，但该假设尚需实验验证。研究人员也坦承了研究的局限性：TMA的两点取样可能无法完全反映肿瘤异质性；回顾性数据的固有偏倚；以及样本储存时间对抗原性的潜在影响。尽管如此，在存在这些限制的情况下仍能检测到较高的TROP2阳性率，更加支持了TROP2在LCNEC中的表达普遍性。
研究结论为：TROP2免疫组织化学在纯LCNEC中频繁阳性（60%的病例≥1%细胞染色，48%的阳性病例呈胞质型染色模式），这一发现为TROP2抗体药物偶联物在LCNEC患者中的临床试验提供了理论依据。进一步探索LCNEC中靶向治疗反应的新型预测性生物标志物，将有助于拓展这一侵袭性罕见肿瘤的治疗选择并改善患者预后。
