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神经肌肉接头（NMJ）的功能在许多神经肌肉疾病（NMDs）中受损，例如自身免疫性或先天性重症肌无力（MG）、肌萎缩侧索硬化症（ALS）、脊髓性肌萎缩症（SMA）和肌营养不良症。NMJ含有肌肉特异性激酶（MuSK），它是NMJ完整性和功能的关键调节因子。激活Mu
神经肌肉接头（NMJ）的功能在许多神经肌肉疾病（NMDs）中受损，例如自身免疫性或先天性重症肌无力（MG）、肌萎缩侧索硬化症（ALS）、脊髓性肌萎缩症（SMA）和肌营养不良症。NMJ含有肌肉特异性激酶（MuSK），它是NMJ完整性和功能的关键调节因子。激活MuSK信号级联反应可能在几种以神经肌肉通讯受损为特征的疾病中具有治疗潜力。MuSK信号级联反应由不同组分构成，可通过在不同水平的干预进行激活。近年来，不同的治疗策略被进一步开发用于此目的，包括使用由蛋白质C端片段组成的工程化重组agrin（mini-agrin）、该通路中关键蛋白的基因治疗、激动剂MuSK抗体以及含Src同源2结构域的磷酸酪氨酸磷酸酶2（SHP2）抑制剂。这些策略各自作用于不同的信号组分：mini-agrin（无论是重组蛋白还是基因治疗）增强agrin-Lrp4-MuSK相互作用；Dok7基因治疗放大MuSK磷酸化；Lrp4基因治疗增强agrin反应性；MuSK激动剂抗体绕过上游缺陷并促进下游信号传导；SHP2抑制剂延长活性MuSK信号的持续时间。这些治疗策略已在MG、运动神经元疾病和肌营养不良症的多种临床前模型中改善了NMJ的完整性和功能。在本综述中，研究人员强调了MuSK信号作为可能的治疗靶点，描述了干预MuSK信号在不同NMDs中的治疗效果，并对未来的临床开发进行了展望。
1 引言
肌肉特异性激酶（MuSK）是一种受体酪氨酸激酶（RTK），主要位于骨骼肌细胞表面。它属于一个更大的家族，人类中有58种已知的RTK。MuSK具有RTK的特征性结构：胞外配体结合域、一个跨膜螺旋和胞内区域。MuSK的胞外域由三个免疫球蛋白（Ig）样域和一个Frizzled（Fz）域组成，胞内区域包含近膜区和带有ATP结合区及激活环的激酶域。MuSK是负责形成和维持神经肌肉接头（NMJ）的信号通路中不可或缺的部分。MuSK的激活是乙酰胆碱受体（AChR）高密度聚集所必需的，这些聚集直接位于运动神经末梢ACh释放位点的对侧。有效的肌肉收缩需要释放足够的ACh以打开足够多的AChR离子通道，从而产生动作电位。重要的是，MuSK缺失会导致呼吸肌无法形成正常的NMJ，从而无法收缩，因此致死。MuSK还通过聚集低密度脂蛋白受体相关蛋白4（Lrp4）来维持突触前分化。许多神经肌肉疾病（NMDs）中NMJ功能受损，可能是主要原因或继发于其他病变。在自身免疫性重症肌无力（MG）和先天性肌无力综合征（CMS）中，NMJ关键组分（如AChR、MuSK、对接蛋白7（Dok7）、Lrp4和rapsyn）的功能直接受到抗体或突变的损害。然而，在运动神经元疾病如肌萎缩侧索硬化症（ALS）和脊髓性肌萎缩症（SMA），以及肌营养不良症如杜氏肌营养不良症（DMD）和常染色体显性Emery-Dreifuss肌营养不良症（AD-EDMD）中，NMJ完整性的丧失是继发于这些疾病中主要的运动神经元或肌肉缺陷。对于这些疾病，激活MuSK信号可能通过刺激和维持紧密的AChR聚集从而改善神经肌肉传递，具有治疗潜力。MuSK信号可以通过不同的干预措施激活，例如重组工程化agrin、信号通路关键组分的遗传过表达、激动性抗体或磷酸酶抑制剂。这些方法已在多个NMD模型中进行了临床前测试，首个同类MuSK激动剂抗体目前正在临床试验中（NCT06441682，NCT06436742）。本文综述了在开发针对不同NMDs治疗的激活MuSK信号干预措施方面取得的进展。
2 生理性MuSK信号
为了开发激活MuSK信号的干预措施，了解生理条件下MuSK信号级联反应的要素及其功能非常重要。正常情况下，MuSK由其配体神经agrin激活，后者由运动神经元持续释放。神经agrin是一种220 kDa的多结构域细胞外基质蛋白，富集于NMJ的基底膜。需要AGRN基因的一个特定剪接变体，其蛋白C端区域含有z-insert，才能诱导AChR聚集。为简便起见，本综述余下部分用agrin指代这种特定的神经剪接变体。在突触间隙中，agrin与其位于肌肉膜上的共受体Lrp4结合。单独来看，agrin和Lrp4与MuSK的结合较弱，但两者共同能与MuSK的Ig样域1强烈相互作用。冷冻电镜和X射线晶体学结构显示，暴露于Lrp4和agrin的MuSK残基位于Ig样域1的相对两侧，但agrin和第二个MuSK分子结合在重叠的残基上。对于与Lrp4的相互作用，I96残基被确认为关键位点，而agrin/MuSK界面需要M48和L83。Lrp4也可能与Fz域的C端部分相互作用，但这尚未通过MuSK突变体的相互作用研究得到证实。两个agrin-Lrp4-MuSK复合物共同形成一个异源四聚体复合物，使MuSK二聚化。这是将胞外分化信号转导至胞内环境以支持突触后结构重排的关键步骤。MuSK二聚化导致其胞内激酶激活，引起其胞内域多个酪氨酸的（自）磷酸化。激活环中Y750、Y754、Y755残基的组合磷酸化对于近膜区Y553的磷酸化很重要。Y553残基是MuSK功能最关键磷酸化位点，因为它是对接蛋白7（Dok7）的结合位点。Dok7的结合和二聚化进一步增强并稳定MuSK的磷酸化，并激活下游信号级联反应，导致致密AChR簇的启动和维持。这些AChR簇定义了组织良好的NMJ，对于实现有效的神经肌肉传递从而肌肉收缩至关重要。MuSK磷酸化受Dok7降解和磷酸酶SHP2的负调控。除了参与MuSK激活的蛋白质外，MuSK还在胞外与biglycan、骨形态发生蛋白4（BMP4）、Wnt11和Van Gogh样蛋白2（Vangl2）相互作用。除Dok7外，MuSK在胞内还与Disheveled（Dvl）、Crk（-L）、Tumorous imaginal disc 1（Tid1）、Abl、Src homology和Collagen D（ShcD）以及14-3-3 γ相互作用。这些与MuSK在NMJ的相互作用作用不太明确，但包括支持AChR聚集和MuSK降解的下游信号传导。这些相互作用的中断或次优促进可能导致MuSK激活不足，引起NMJ稳定性受损，或破坏MuSK的激酶非依赖功能。尚未见这些相互作用因子的CMS形式的报道。
3 操纵MuSK信号的方法
已在MuSK信号级联反应的不同水平研究了多种干预措施在治疗NMDs中的治疗潜力。本节将讨论这些方法，包括蛋白质生物制剂、基因治疗、MuSK抗体或小分子抑制剂。图2概述了这些治疗的靶点位置及其如何汇聚于MuSK信号。
3.1 使用重组mini-agrin间接激活MuSK信号
通过使用重组mini-agrin（NT1654）可以以剂量依赖性方式间接激活MuSK信号。Mini-agrin由agrin的神经胰蛋白酶抗性C端片段（aa1519-1950）组成，包含对NMJ突触后分化重要的z-8氨基酸插入。当通过每日皮下注射施用于去神经支配的肌肉时，它诱导了许多异位AChR簇，进一步支持了其生物学相关的MuSK激活效应。由于mini-agrin仅包含agrin的C端部分，它没有层粘连蛋白、肝素和整合素等其他蛋白质的结合位点。这种较短agrin变体的优势在于其增加了组织渗透性，同时保持了对MuSK信号的活性。然而，失去与其他（细胞骨架）结合伴侣的相互作用可能限制其对其他NMJ相关途径的作用。这种治疗的缺点是需要每日注射，如果人类也需要这种频率，则可能不利。
3.2 诱导mini-Agrn、Lrp4、MuSK或DOK7表达的基因治疗
MuSK激动作用也可以通过过表达mini-Agrn、Lrp4、MuSK或DOK7来实现，从而产生过量的蛋白质，增加/稳定NMJ处的MuSK信号。为此，已使用腺相关病毒（AAV）载体或转基因小鼠模型。几项研究描述了包装在内体中的AAV载体编码这些NMJ基因，通过肌肉内注射递送，而在其他研究中则通过全身给药。直接证据表明此类策略在体内激活MuSK信号疗效的研究有限，仅有一项研究证实DOK7 AAV处理小鼠的后肢MuSK磷酸化和AChR水平增加。对于人类应用，需要考虑AAV载体在高度复制的组织（例如幼儿肌肉或某些有大量再生的NMDs）中效果较差。
为了测试增加Lrp4和mini-agrin水平的治疗价值，开发了在NMD疾病背景下过表达这些基因的转基因小鼠模型，包括mdx小鼠。这些模型使用人α-骨骼肌动蛋白或肌肉肌酸激酶启动子驱动转基因的骨骼肌特异性表达。在这些小鼠的不同组织中可以确认表达增加和组织特异性。
3.3 MuSK激动剂抗体
描述刺激MuSK信号的第一份报告来自使用二价MuSK抗体的实验，这些抗体绕过了对神经agrin的需求，以刺激肌管中的AChR聚集。这些抗体是通过筛选针对鼠MuSK的人scFv抗体噬菌体展示库，或从MuSK主动免疫兔模型血清中提取而发现的。这些研究证实了二价MuSK抗体迫使两个MuSK分子二聚化以刺激下游信号传导和突触后分化的必要性。目前，至少有三种来源的MuSK抗体正在研究中：通过动物免疫产生的多克隆或单克隆抗体、在抗体噬菌体展示或等效文库中鉴定的抗体，以及从MuSK MG患者体内分离的多克隆和单克隆抗体。本综述余下部分将重点关注已在NMD体内模型中测试的MuSK单克隆激动剂抗体。这些MuSK抗体的特征总结在表1中。首先描述的MuSK激动剂抗体靶向Fz域。其中两个单克隆抗体（X17和mAb#13）通过噬菌体展示库筛选获得，而ARGX-119来源于美洲驼免疫。这三种抗体已在多种NMD动物模型中广泛测试。mAb#13可以结合小鼠但不结合人MuSK，而X17结合不同物种的MuSK，并显示与另外两个蛋白（EphB1和EphB2）的脱靶结合。ARGX-119也能结合鼠、非人灵长类或人源的MuSK，并且没有任何脱靶结合。此外，从MuSK MG患者体内衍生出四个靶向Ig样域1的单克隆抗体。这些单克隆MuSK抗体结合人和小鼠MuSK，并激活MuSK激酶。有趣的是，其他一些患者来源的双价抗体尽管激活了MuSK激酶，但在小鼠中诱导了克隆依赖性的MG表型。迄今为止，尚未观察到Fz域MuSK抗体的这种致病效应。为什么某些Ig样域1结合的MuSK抗体诱导MG，而其他抗体不诱导，目前尚不清楚。每种提到的MuSK激动剂抗体都在C2C12小鼠肌管上测试了刺激MuSK磷酸化的能力。所有抗体激活MuSK磷酸化达到天然配体agrin的约60%或更高。它们还诱导C2C12肌管中的AChR聚集。ARGX-119和X17达到agrin水平的AChR聚集。对于mAb#13，AChR簇未量化。重要的是，抗体介导的激动作用可能遵循钟形效能，因为抗体浓度过高可能导致单价结合和治疗效果降低。事实上，在MuSK MG的多克隆患者IgG4被动转移模型中观察到了钟形效能，并且在C2C12肌管的磷酸化和AChR聚集中也看到了钟形效能的趋势。NMJ处的MuSK浓度可能因NMD而异；因此，最佳剂量可能因疾病而异。在转化研究中，抗体通过腹腔注射给药。考虑到它们的半衰期为4-15天，需要频繁注射以维持动物体内稳定的暴露量，具体方案因克隆和动物模型而异。
3.4 MuSK去磷酸化的抑制剂
MuSK激酶活性及其下游信号传导能力受SHP2调节。SHP2的作用是去除MuSK上的磷酸基团，从而对agrin/Lrp4/MuSK通路施加抑制，抑制AChR聚集。通过引入SHP2抑制剂，这一过程被打断，agrin/Lrp4/MuSK级联反应保留了更多活性更长时间。NSC-87877是一种含有src同源2结构域的SHP2酪氨酸磷酸酶抑制剂。当引入C2C12肌管时，NSC-87877在有无agrin的情况下均以剂量依赖性方式增加MuSK磷酸化水平和AChR聚集。这种效能在约100 μM处有最佳值，呈钟形，并且是时间依赖性的。SHP2抑制还可以增加过表达Dok7的肌管中的MuSK信号和AChR聚集，表明多种靶向MuSK信号的治疗可能具有协同作用。类似的MuSK激活和AChR聚集效应可以通过另一种酪氨酸磷酸酶抑制剂：过氧钒酸盐实现。重要的是，SHP2在许多组织中表达，并在包括癌症在内的许多不同通路中发挥作用。因此，使用此类抑制剂进行治疗可能会导致显著的副作用。SHP2抑制迄今为止尚未在临床前动物NMD模型中研究。总之，所有这些方法都显示出增加MuSK磷酸化，从而激活胞内信号通路，通过改善AChR聚集来维持NMJ完整性。由于缺乏头对头比较，这些方法对影响特定下游信号传导的比较尚不清楚。
4 操纵MuSK信号的治疗效果证据
多种NMDs存在NMJ功能受损，这可能是主要症状或疾病病理生理学的次要后果。本文将讨论在多种NMD模型中刺激MuSK信号治疗效果的（临床前）证据。
4.1 重组mini-agrin在肌肉减少症、CMS、SMA和AChR MG中的应用
重组mini-agrin（NT1654）已在多种小鼠NMD模型中测试：肌肉减少症、agrin CMS、MYO9A CMS、SMA和AChR MG。肌肉减少症是一种以骨骼肌质量和力量进行性丧失为特征的肌肉消耗综合征。导致肌肉丢失的因素之一被认为是NMJ功能障碍。为了测试mini-agrin在肌肉减少症小鼠模型中的治疗潜力，将mini-agrin（NT-1654）注射到SARCO小鼠中。Mini-agrin治疗改善了这些小鼠的NMJ完整性、肌纤维类型和功能性表现，表明它能够部分改善表型。CMS是一组多样化的神经肌肉疾病，由对神经肌肉传递重要的基因突变引起，最终导致肌肉无力。其中一种疾病是agrin CMS，至少可由16种不同的突变引起。为了研究mini-agrin对agrin CMS的治疗效果，将mini-agrin注射到Agrinnmf380小鼠中，该小鼠含有小鼠Agrn基因的点F1061S突变，导致蛋白质部分功能丧失。Mini-agrin治疗的小鼠在体重、前肢抓力、NMJ形态和纤维类型分布方面有所改善。Mini-agrin（NT-1654）也在第二种由MYO9A突变引起的CMS中进行了测试。MYO9A是非常规肌球蛋白的一部分，在轴突运输中起重要作用。在MYO9aa/ab双敲低斑马鱼中施用mini-agrin改善了它们的运动能力（以游泳距离和速度衡量），并改善了NMJ形态。Mini-agrin并未改善其存活率。SMA是一种由SMN1基因突变引起的疾病，导致运动神经元（MN）变性、突触缺陷和骨骼肌萎缩。常用于研究SMA的动物模型是严重的SMAΔ7小鼠模型，出生后存活1-2周。每日用mini-agrin治疗这些小鼠使其存活期轻微延长数天，部分（但并非全部）运动性能测试有所改善，NMJ形态有改善趋势。脊髓运动神经元数量未增加。AChR MG是一种自身免疫性疾病，由损害AChR功能的抗体引起，导致神经传递受损和易疲劳的骨骼肌无力。使用电鳐AChR的主动免疫大鼠模型测试了mini-agrin的疗效。Mini-agrin治疗的大鼠在体重、CMAP递减、NMJ形态和胫骨前肌肌纤维大小方面有所改善。对于大多数结果，这些效果接近完全挽救表型。总之，重组mini-agrin在肌肉减少症、CMS、SMA和自身免疫性AChR MG的动物模型中显示出轻度至显著的治疗效果。迄今为止，尚未注册重组mini-agrin的临床试验。
4.2 在若干NMDs中使用mini-Agrn、Lrp4、Musk或DOK7的基因治疗
mini-Agrn、Lrp4、Musk或DOK7的基因治疗已在多种NMDs中进行测试，包括LAMA2相关肌营养不良症（LAMA2MD或MDC1A）、肢带型肌营养不良症、DMD、AD-EDMD、ALS、Dok7 CMS、SMA和衰老。LAMA2 MD是一种早发性先天性肌营养不良症，由LAMA2基因突变引起，导致merosin的层粘连蛋白α2链原发性缺乏。患有这种疾病的患者发育迟缓、进行性肌肉无力和营养不良。几项研究通过使用转基因Dyw/Dyw小鼠或Dy3K/Dy3K小鼠（消除LAMA2）研究了mini-Agrn表达对LAMA2 MD的影响。这些研究表明，mini-Agrn表达显著改善了这些小鼠的体重、存活率和肌肉性能。使用相同小鼠模型但使用AAV载体（AAV-9）进行转导的研究对外周神经的各种参数甚至产生了更有希望的效果，包括部分恢复髓鞘形成、减少施万细胞病变和改善感觉运动处理。总之，过表达mini-Agrn改善了这些LAMA2 MD小鼠模型的肌肉和运动神经元病变。肢带型肌营养不良症是另一组以进行性肌肉消耗和骨骼肌无力为特征的先天性NMD。Mini-Agrn已在FKRPP448L小鼠模型中测试。局部肌肉内注射AAV6-CB-mini-agrin未能改善任何结局指标，包括肌肉组织病理学、体重或抓力，尽管肌肉agrin水平明显上调。DMD是一种X连锁遗传病，以进行性骨骼肌消耗为特征，由肌膜相关蛋白dystrophin的完全缺失引起。在DMD临床前实验的金标准mdx小鼠模型中过表达Lrp4导致NMJ完整性、功能性运动表现和NMJ传递轻微改善。使用AAV6-CMV载体在mdx小鼠中引入Musk的肌肉内注射仅使应变损伤后的肌力、NMJ完整性和肌肉组织病理学轻微增加。AD-EDMD以心脏缺陷和骨骼肌无力为特征，由编码lamin A/C的LMNA基因突变引起。在缺乏lamin A/C的AD-EDMD小鼠模型中使用AAV-D7载体过表达DOK7导致NMJ显著增大、寿命显著延长和肌肉力量增强。DOK7肌肉特异性表达还诱导突触前神经末梢增大，这可能通过未知机制有益于运动神经元健康和突触稳定性。ALS是一种神经退行性疾病，其中运动神经元进行性丢失，导致进行性肌肉无力并最终死亡。尽管运动神经元细胞死亡是该疾病的标志，但神经肌肉突触通讯的丧失被认为是肌肉无力第一阶段的原因。大约90%的患者患有散发性ALS，而约10%的患者由ALS相关基因的显性突变引起，包括SOD1、C9ORF72、TDP43和FUS。这些遗传性ALS经常用于临床前模型来测试新疗法。在SOD1 G93A ALS小鼠模型中使用静脉暴露于AAV-CMV-DOK7过表达DOK7导致肌肉性能增强、肌肉萎缩减少和运动神经末梢退化减少。这些效果是显著的，可以使这些小鼠的寿命延长数周。Dok7 CMS是一种罕见的遗传性NMD，由DOK7基因突变引起。使用AAV9-CMV-DOK7载体治疗携带患者常见突变Dok7c.1124_1127dupTGCC的纯合Dok7 CMS小鼠模型完全挽救了致死表型。虽然这些小鼠通常在出生后2-3周内死亡，但这种治疗单独就挽救了小鼠免于死亡。这些结果在使用不同的Dok7 CMS小鼠模型中得到了重复。SMA是一种运动神经元疾病，上一节已介绍。通过在Smn2B/-小鼠模型中静脉注射AAV9-CB-DOK7研究了DOK7过表达在SMA中的效果。DOK7治疗的小鼠NMJ形态和肌肉组织病理学改善，这有利于它们的抓力，并使寿命略微延长几天。尽管对小鼠功能表现的结果不如上述其他模型显著，但这确实表明改善SMA中的突触稳定性和功能可能对挽救运动神经元遗传缺陷具有附加价值。衰老导致运动功能的自然衰退，其特征包括轻度至中度NMJ功能障碍、神经支配减少和肌肉萎缩。一些人假设年龄相关的肌肉退化可以通过加强神经肌肉突触来阻止。在老年（>2年）C57BL6小鼠中使用AAV-CMV过表达DOK7导致NMJ增大，与上述先前的DOK7过表达研究一致，从而增强了神经支配。这些结构上的改善辅以旋转棒运动性能的增加。总之，在不同NMDs中过表达MuSK信号蛋白的效果从无效果到完全挽救Dok7 CMS的致死表型不等。在大多数模型中，可以观察到基因治疗明显的组织病理学改善，但功能效果似乎大多是轻度至中度的，并且可能取决于挽救基因与它试图挽救的潜在缺陷之间的直接关系。鉴于DOK7基因治疗在此处描述的几个模型中的成功，该治疗策略的临床前开发正在推进，看起来很有希望，但尚未报告临床试验。
4.3 MuSK激动剂抗体在Dok7 CMS、MuSK MG、ALS和SMA中的应用
MuSK激动剂抗体迄今已在三种CMS形式中测试了其治疗潜力：Dok7 CMS、Agrin CMS和ColQ CMS。两种Fz域结合MuSK激动剂抗体X17和ARGX-119已在Dok7 CMS小鼠模型Dok71124_1127dup中测试。两种激动剂的全身给药完全挽救了早期致死性并恢复了运动功能。ARGX-119也在Agrin CMS（Agrnnmf380小鼠）和ColQ CMS（ColQ-/-小鼠）模型中进行了测试。ARGX-119治疗的Agrin CMS显示NMJ形态改善、存活率增加和通过抓力测量的运动性能改善。在ColQ CMS小鼠中未观察到此类益处。对于自身免疫性MuSK MG，已在不同的被动转移模型中测试了几种不同的MuSK激动剂抗体来模拟MuSK MG：要么使用单克隆单臂MuSK抗体，要么使用纯化的多克隆患者IgG4来重现疾病。首先，从患者体内分离的单克隆单臂重组抗体（测试了两个不同克隆）单次注射诱导了Bl6小鼠的MuSK MG。ARGX-119能够在预防性和治疗性设置中挽救进行性致死性MG表型、肌肉性能和NMJ形态。为了补充这些研究并创建反映患者自身抗体库复杂性的更具转化性的模型，还将四名不同患者的多克隆纯化IgG4被动转移到NOD/SCID小鼠中以评估ARGX-119的治疗益处。这些研究显示ARGX-119对一名患者的纯化hIgG4小鼠模型的肌肉性能和存活率具有患者特异性疗效。患者模型间治疗效果的差异仍未得到解释，但可能与某些患者血清中激动剂MuSK抗体的比例有关。使用多克隆IgG4但用Ig样域1 MuSK激动剂抗体3F6c治疗的类似MuSK MG小鼠模型未改善存活率和肌肉性能。此外，Ig样域1 MuSK激动剂抗体引起了无法解释的泌尿生殖系统异常，导致C57Bl/6雄性小鼠猝死。因此，MuSK激动剂抗体的临床开发集中在靶向MuSK Fz域的抗体上。MuSK激动作用的治疗潜力也在三项ALS研究中进行了评估，其中两项在SOD1 G93A ALS小鼠模型中测试了MuSK激动剂抗体mAb#13，另一项在C9orf72 ALS小鼠模型中测试了X17。两项mAb#13研究均证明MuSK激动作用改善了NMJ形态，显示去神经支配减少和完全神经支配的NMJ数量增加。然而，一项研究报告称MuSK激动作用改善了ALS小鼠的运动表现并轻微延长了寿命，而另一项研究未报告体重、呼吸功能和存活率的改善。这种差异可以用技术差异来解释，例如治疗剂量、结局指标和动物人道终点定义。C9orf72 ALS模型的X17治疗也显示出有希望的结果。与其他研究一样，使用X17的MuSK激动作用导致NMJ形态改善和脊髓运动神经元数量增加。它还改善了肌肉力量（抓力，但旋转棒测量无改善）并延长了寿命。尽管如此，很明显，仅挽救agrin/Lrp4/MuSK通路可能不足以改善ALS中的进行性疾病和运动神经元丢失。基于这些观察，目前正在进行的临床试验测试MuSK激动剂ARGX-119作为ALS的治疗方法（NCT06441682）。MuSK激动作用也已在SMA中评估了其治疗价值。在SMNΔ7小鼠模型中测试了mAb#13，发现它减少了两个受影响最严重的肌肉中去神经支配的NMJ数量，并增加了完全神经支配的NMJ数量。此外，该激动剂增强了通过细胞内记录终板电位（EPPs）测量的突触传递，并改善了肌肉组织病理学。鉴于该治疗对SMA的合理潜力，已宣布在SMA患者中测试MuSK激动剂ARGX-119的临床试验。总之，MuSK激动剂抗体在多种遗传性和获得性临床前NMD模型中显示出有希望的结果。一种MuSK激动剂的临床开发正在进行中。一项I期研究表明MuSK激动作用可以是安全的，并且在Dok7 CMS的Ib期临床试验中首次报告了成功的初步迹象（NCT06436742）。未来看到MuSK抗体介导的激动作用如何使患者受益将是令人兴奋的。
4.4 SHP2抑制在MuSK MG中的应用
关于SHP2抑制治疗NMD的临床前研究仅限于一项在MuSK MG体外模型中测试该分子的研究。在此，C2C12肌管暴露于MuSK MG血清或纯化的MuSK MG IgG4以及不同剂量的SHP2抑制剂NSC-87877。SHP2抑制能够保护或恢复受MuSK自身抗体挑战的MuSK磷酸化和AChR聚集。尽管SHP2抑制可能产生全身性效应，但了解这种治疗是否能在其他NMD的小鼠模型中显示疗效将是有趣的。
5 结论与展望
若干NMDs的特征是神经肌肉突触结构和功能受损，这预计会导致患者的疾病症状。已经开发出许多干预措施来改善NMJ稳定性，从而促进肌肉收缩，有时甚至是运动神经元健康。在过去的十年中，这些治疗疗效的临床前证据不断增加，旨在修饰MuSK信号作为NMDs治疗的首次临床试验现在正在进行中。在临床前动物模型中，所有治疗策略一致可见NMJ形态和突触连接性的改善；然而，这并不总是转化为显著改善的肌肉功能和延长的寿命。接下来的研究应侧重于获得更多机制上的见解，了解为什么某些MuSK信号修饰治疗在某些NMDs中有效而在其他中无效。结合在递送、减少副作用和剂量方面优化不同治疗策略，应会带来更好的未来治疗。鉴于基因治疗在某些NMDs中的成功应用，考虑此处讨论的不同NMJ稳定策略可以组合以互补的方式挽救患者的全部表型也是有趣的。
