利用经过开发与验证的高性能液相色谱结合折射率检测器技术，揭示抗糖尿病药用植物的碳水化合物组成

《Scientific Reports》：Unveiling the carbohydrates profile of anti-diabetic medicinal plants by a developed and validated high-performance liquid chromatography coupled with refractive index detector (HPLC-RID)

　　

摘要

天然存在的碳水化合物在植物的营养价值及药用特性中起着关键作用。然而，对于常见草本产品中的这些糖分检测方法尚未完全确立，尤其是那些用于糖尿病患者的产品。这些产品中的糖分含量直接影响其安全性、有效性以及真实性。本研究提出了一种简单实用的等度高效液相色谱法，该法配有折射率检测器，能够同时检测并测定七种糖分：d-(?)-核糖、d-(+)-木糖、d-(?)-果糖、d-(+)-葡萄糖、蔗糖、d-(+)-麦芽糖以及α-乳糖。该方法被用于检测甜菊叶、甘草根、冬虫夏草根、苦瓜叶、马齿苋叶、罗汉果果实、印楝叶、阿洛尼树皮、印度醋栗树皮以及芦荟叶浆的水提取物中的糖分含量。我们采用了基于ACE Excel 5 NH₂柱的方法，以乙腈-水（85:15，体积比）为流动相，流速为1.0毫升/分钟，检测温度为35摄氏度。该方法无需样品衍生化处理，可直接对水样进行分析。在方法验证过程中，我们遵循了ICH Q2 (R1)指南，结果证明该方法具有出色的线性度、灵敏度（LOD/LOQ）、准确性、精密度、特异性以及稳定性。我们从多个批次中提取植物材料（每种植物取5个批次），首先在80摄氏度下用热水提取2小时，然后在室温下浸泡24小时，最后进行冷冻干燥，以此确保不同采收期的检测结果一致性。我们的方法能够为不同药用植物提供可靠的糖分分析数据，显示出不同批次之间的差异，同时为产品质量控制与鉴定提供了可靠的数据基础。这项工作的独特之处在于它将通用的、非破坏性的折射率检测系统与等度流动模式相结合，而目前大多数已发表的研究还无法在HPLC-RI平台上实现这一技术。该方法无需样品衍生化处理或复杂的样品前处理，即可实现对药用植物中多种糖分的检测。由于其简单性和可靠性，该方法非常适合用于草本产品的常规质量检测，尤其是那些用于控制血糖水平的产品。若存在未被检测出的糖分掺假情况，将会影响治疗效果。