关于高效诱导海萝片段形成不定芽及其附着技术的研究

《Aquaculture》:Study on the efficient induction of adventitious buds from Gelidium amansii segments and their attachment technology

【字体: 大 中 小 】 时间:2026年07月08日 来源:Aquaculture 4.4

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  Xingyu Liao|Qikun Xing|Yuanyuan Xu|Liya Ma|Yingying Qin|Fuli Liu中国海洋大学海洋生命科学学院,教育部海洋遗传育种重点实验室,山东省青岛市266003摘要Gelidium amansii是一种在生态和经济上都很重要的红

  
Xingyu Liao|Qikun Xing|Yuanyuan Xu|Liya Ma|Yingying Qin|Fuli Liu
中国海洋大学海洋生命科学学院,教育部海洋遗传育种重点实验室,山东省青岛市266003

摘要

Gelidium amansii是一种在生态和经济上都很重要的红藻,但由于人工培育幼苗的效率低下,其商业化栽培面临诸多挑战。依赖野生采收无法满足工业需求,还会进一步加剧对自然资源的压力。为解决这一问题,我们系统研究了培养方法、植物生长调节剂以及光照质量对G. amansii段形成不定芽的影响。通气培养显著提高了芽的诱导率,每段可产生15.29?±?0.80个芽,芽的长度为1617.84?±?466.99微米,相对生长速率为80.89?±?23.33微米/天。激素的应用时机至关重要:0.01毫克/升的2,4-D在0–30天内可促进芽的初始形成,而随后使用的0.01毫克/升的IBA则能加速芽的伸长。与红光相比,蓝光和白光都能显著增加芽的数量。此外,在后期阶段,蓝光带来的芽伸长效果明显优于白光和红光。为解决附着问题,我们使用了椰壳纤维或棉绳作为培养基,还采用了一种生物黏合剂,该黏合剂由2%(重量/体积比)的海藻酸钠(在60℃下溶解10分钟)构成,并通过喷洒3%(重量/体积比)的CaCl?溶液(约10毫升,处理15分钟)进行交联。20天的测试结果显示,这种生物黏合剂能有效确保培养段的高附着率,且在所测试条件下并未显著降低芽的形成数量或最终芽的伸长长度。总体而言,这项研究为G. amansii段的培养建立了优化方案,有助于实现可持续的海水养殖业所需的规模化幼苗生产。

引言

Gelidium amansii(红藻门)是一种具有重要商业价值的红藻,原产于温带和亚热带沿海地区,是琼脂生产的主要原料。这种硫酸化多糖具有优异的凝胶性能和物理化学稳定性,因此在食品加工(Liu, 2017; Qiao and Chen, 2025)、制药领域(Ram et al., 2021; Nur et al., 2023)以及生物技术行业(Ramos et al., 2025)有着广泛的应用。此外,它所含的生物活性成分——包括多糖、蛋白质和矿物质——还具有抗炎、抗氧化和免疫调节作用,这表明它在传统用途之外还有很大的价值提升空间(Wang et al., 2023)。尽管它具有重要的经济价值,但一些固有的限制因素制约了其规模化栽培:较慢的生长速度和漫长的繁殖周期阻碍了海藻养殖的发展。因此,琼脂产业仍然依赖野生资源。过度捕捞再加上气候变化带来的压力,已使自然种群的数量降至不可持续的水平。具体来说,东亚地区的商业捕捞强度是自然恢复速度的3.8–5.2倍。此外,海洋酸化(ΔpH = ?0.3至?0.4单位)和海水温度上升(ΔT = +1.2至+2.4℃)会降低光合作用效率27–34%,同时增加呼吸作用成本18–22%(Kim et al., 2020)。这种双重压力加上资源枯竭以及生理功能的受损,都威胁着琼脂产业的供应链。要实现可持续发展,就需要采取综合策略:建立海洋保护区、运用先进的繁殖技术,以及培育具有抗逆性的品种(Weinberger et al., 2016)。
规模化栽培面临的一个主要瓶颈是缺乏高效的幼苗培育体系。有性繁殖的周期较长(从孢子到藻体成熟需要4–6个月),还存在季节性孢子形成以及较低的附着率(体外实验中低于30%,Huang, 1982),因此无法满足商业需求。相比之下,利用组织培养技术进行无性繁殖能够快速高效地实现克隆扩繁。虽然这种技术在陆生植物中已经得到广泛应用,但在大型藻类中的应用还处于起步阶段。例如,Gracilaria属物种的不定芽诱导技术已经得到了发展和优化(Yeong et al., 2014; Chen and Chen, 2017)。对于像G. amansii这样生长缓慢的物种来说,组织培养更具优势,因为它可以突破自然繁殖的限制,同时还能保持母本的特征,无需经历与基因重组相关的性状分离。自20世纪90年代以来,关于G. amansii的组织培养研究主要集中在对培养条件(包括培养基成分、25–35 PSU的盐度以及15–25℃的温度)和物理参数(包括光照强度、光谱、光周期以及通气方式)的优化上(Pei et al., 1988, Pei et al., 1989; Yang et al., 2020)。然而,对于植物生长调节剂以及光照质量的作用机制,目前仍缺乏深入的了解。虽然外源生长素(如0.05毫克/升的2,4-D)可以通过激活MAPK途径来促进相关藻类的芽诱导形成(Paulo et al., 2023),但针对G. amansii的优化研究还缺乏浓度比例的调整。尽管蓝光可以调控藻类的形态建成,从而影响其光合作用、竞争力和代谢功能(Zhu, 2024),但其在G. amansii芽诱导中的作用尚未得到明确研究。本研究通过系统探讨植物生长调节剂的使用时机、浓度比例以及光谱控制因素,旨在填补这些研究空白。
将G. amansii的组织培养幼苗移栽到开放海域进行养殖时,面临着一个关键问题:培养基的附着能力不足。这一限制源于该藻类的固有生物学特性。首先,G. amansii只有较为简单的纤维状固着器,由单细胞或少数细胞构成的细丝组成,与大型褐藻那坚固的盘状固着器相比,其机械固定能力较差(Santelices, 1999; Santelices, 2007)。其次,它分泌的黏合剂固化速度较慢,最终强度也低于Fucus属藻类配子体中所含的蛋白类黏合剂(López et al., 2015)。与具有特殊根状结构的褐藻不同,G. amansii的藻段没有天然的附着结构,因此只能依靠生化黏合作用,这就决定了其天然附着能力的薄弱。来自G. lingulatum的研究也为这一属植物的附着问题提供了佐证,表明在二次附着过程中,其固着器的形成速度也很慢(Otaíza et al., 2018),进一步凸显了这一属植物的共同局限性。先前的研究表明,表面纹理(粗糙度)会直接影响藻类的定殖效率(Shi et al., 2014; Shi, 2015a),而经过生态优化的培养基则能提升附着效果(Bi et al., 2022)。此外,钙离子交联的海藻酸钠能够形成可渗透的三维网络(Meng, 2025),而卡拉胶衍生物则具有形成纤维和包裹物质的能力(Lu et al., 2024; Zhang et al., 2025a),这些都表明它们有可能作为外源黏合剂使用(Leong et al., 2016; Olga et al., 2019)。尽管已有这些进展,但目前的研究大多集中在培养基的优化上(Wang, 2014),而对于黏合剂的系统研究却相对较少。Tarakhovskaya(2014)指出,鉴于大型藻类附着的复杂生化机制,外源黏合剂具有巨大的应用潜力,而这一理论观点需要在G. amansii身上得到实证验证。因此,弥补这一技术缺口显得极为重要。
本研究旨在利用组织培养技术,系统探究培养方法、植物生长调节剂以及光照质量对G. amansii段不定芽形成和生长的影响。此外,本研究还评估了不同培养基和黏合剂对藻段附着效率以及不定芽形成情况的影响。这些研究结果为开发G. amansii的大规模幼苗繁殖方案奠定了基础。

章节摘录

材料来源

本研究中所使用的G. amansii样本采集自中国山东省青岛市第三海滩附近的沿海区域(北纬35°53′42.6″,东经120°52′54.2″)。

材料预处理

首先挑选健康的G. amansii藻体,清除其表面的共生生物,然后将其放入装有过滤海水的通气培养箱中,在20℃、12小时光照:12小时黑暗的光照条件下培养5天,光照强度为20–30微摩尔·平方米?2·秒?1。适应培养结束后,用1%的聚维酮碘对藻体表面进行消毒

培养方法对G. amansii段不定芽形成和生长的影响

研究结果表明,培养方法显著影响了G. amansii段不定芽的诱导和生长情况,其中通气液体培养的效果最为优异。具体而言,在不定芽的数量方面(见图2A),通气液体培养产生的芽数为15.29?±?0.80个,显著高于静态液体培养的8.89?±?0.87个芽(P值=0.0001),也远高于固体培养的3.45?±?0.53个芽(P值<0.0001)。至于不定芽的长度(见图2

讨论

本研究证明了通气液体培养在G. amansii微繁殖中的优越性,与静态液体培养和固体培养相比,它能显著提高芽的数量(15.29?±?0.80个)和芽的伸长长度(1617.84?±?466.99微米)(P值<0.05)。这一表现优于之前的研究记录(Pei et al., 1989),其原因在于本研究采用了经过优化的MES培养基,而非普通的灭菌海水。根据以往的研究(Teng et al., 2010; Xiao and Lan, 2017; Lou, 2020),可以推测

结论

本研究分析了培养方法、植物生长调节剂、光照质量以及黏合剂对G. amansii段不定芽发育的影响。结果表明,通气液体培养能够显著促进芽的诱导和伸长。分阶段的激素处理方案——即在前30天内使用0.01毫克/升的2,4-D,之后再使用0.01毫克/升的IBA——能够有效促进芽的初始形成以及后续的伸长。蓝光有利于芽的形成和生长,而椰壳纤维和棉绳则能提升藻段的附着能力,但是

CRediT作者贡献说明

Xingyu Liao:撰写——初稿。 Qikun Xing:数据整理。 Yuanyuan Xu:监督指导。 Liya Ma:方法设计。 Yingying Qin:结果验证。 Fuli Liu:撰写——审阅与编辑。

未引用参考文献

Cong, 2019
Li et al., 2021
Lin et al., 2024
Ramírez et al., 2025
Sun et al., 2025
内布拉斯加大学林肯分校,2026
Zhang et al., 2021
Zhu et al., 2020

利益冲突声明

我们,即这篇题为“研究Gelidium amansii段不定芽的高效诱导及其附着技术”的论文的作者,特此声明:
本研究是在没有任何可能被视为利益冲突的商业、财务或个人关系的情况下开展的。本研究得到了中国国家关键研发计划(2024YFD2401801)、山东省关键研发计划的资助

致谢

本研究得到了中国国家关键研发计划(2024YFD2401801)、山东省关键研发计划(2025CXPT148和2025LZGC010)、中国国家自然科学基金(32403012)以及中国海洋大学教师科研启动基金(862401013149)的支持。
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