窦椎神经再研究：一项形态学和免疫组织化学研究

《Life》：The Sinuvertebral Nerve Revisited: A Morphological and Immunohistochemical Study

　　

研究人员研究了腰椎（L1-L5）之间的100个脊柱节段，对应马德里康普顿斯大学遗体捐献中心和解剖室的10具成人尸体的两侧。所有节段均被仔细解剖以研究窦椎神经（SVN）的起源，并选取部分SVN样本进行常规石蜡包埋，用Minot型切片机以7μm厚度连续切片。脱蜡后，按照标准组织学实验室方案，对选定的SVN（形态和组织学状态良好）切片进行免疫组织化学方案，以检测CGRP-IH和VIP-IH。数据分析使用IBM SPSS Statistics 27版和RStudio。SVN在82例（85.4%）中观察到单支（模式I），在14例（14.6%）中观察到同一水平两支（模式II）。在椎体水平、侧别或性别方面未发现统计学差异。所有接受免疫组织化学研究的窦椎神经样本均对CGRP和VIP呈阳性，表明神经干内存在混合的自律神经（VIP+）和感觉神经（CGRP+）纤维组成。本研究通过在SVN上直接进行免疫化学表征而非在其支配的结构上进行，确认了SVN的神经化学特征。这一信息支持从病理生理学角度使用SVN阻断用于诊断和治疗技术（如经皮椎间孔内镜下SVN射频消融术）治疗椎间盘源性腰痛。

**论文解读文章**

**研究背景与问题**
窦椎神经（sinuvertebral nerve, SVN）已被证实参与椎间盘源性腰痛，且其阻断可有效减轻弥漫性腰痛的强度与频率，因此相关研究日益增多。然而，由于SVN解剖位置深在、技术难度大，不同研究结果存在巨大差异。尽管近年来大样本研究增多，但关于SVN本质的一些关键数据仍未明确。现有争议集中在SVN的起源（单一脊神经根、单一交感支或混合起源）、走行（上行、下行、斜行或丛状）以及神经化学组成（躯体性、交感性或混合性）。此前多数研究仅在SVN支配的靶结构（如椎间盘、后纵韧带）中检测神经肽，而直接在SVN神经干上进行免疫组织化学表征的报道缺失。为此，研究人员开展本研究，旨在系统描述腰椎SVN的形态学模式与神经化学特征，为诊断和治疗提供病理生理学依据。论文发表在《Life》。

**主要技术与方法**
研究人员选取马德里康普顿斯大学遗体捐献中心10具成人尸体的L1-L5节段两侧共100个样本（排除4个因微解剖损伤的节段后，最终分析96个节段）。主要关键技术包括：
- 显微解剖：在Zeiss手术显微镜下暴露前椎静脉丛、脊髓动脉及SVN，识别交感链与脊神经，并追踪SVN起源与走行。
- 石蜡包埋与连续切片：对形态良好的SVN样本进行7μm厚度连续切片。
- 免疫组织化学：使用抗降钙素基因相关肽（CGRP）和血管活性肠肽（VIP）抗体，在Ventana Discovery Ultra^?自动染色仪上检测CGRP免疫反应性（CGRP-IH）和VIP免疫反应性（VIP-IH），以人结肠（CGRP阳性对照）和胰腺（VIP阳性对照）验证特异性。
- 统计分析：采用IBM SPSS Statistics 27和RStudio，进行卡方检验、ANOVA、Spearman相关分析及多重对应分析。

**研究结果**

**3.1 形态学模式**
SVN在100%的节段中存在（n=96）。所有病例中SVN均起源于相应脊神经的躯体根与交通支的交感支的汇合，随后呈返行进入椎间管。单支模式（模式I）占85.4%（n=82），双支模式（模式II）占14.6%（n=14）。模式I进一步分为四种亚型：
- 1a型：SVN上行至上一椎体中三分之一，覆盖于后纵韧带下，占64.6%（n=62）。
- 1b型：SVN分为上行和下行两支，终止于中线，占17.7%（n=17）。
- 1c型：单支上行两个椎体水平，占2.1%（n=2）。
- 1d型：SVN呈下行走行，占1%（n=1）。
模式II仅观察到一种排列：两支分离的SVN。不同模式与亚型在各椎体水平、侧别及性别间分布均匀，无统计学差异（p>0.005）。Spearman相关分析显示，仅L3与L4椎体间存在负相关（rho=?0.623，p=0.003）。多重对应分析将L1、L2、L5归为第一维度，L3、L4归为第二维度（Cronbach's alpha分别为0.762和0.740）。同侧神经连接在31例中观察到，无侧别、水平或性别差异。

**3.2 免疫组织化学特征**
所有接受免疫组织化学检测的SVN样本均对CGRP和VIP呈阳性反应。VIP阳性染色定位于施万细胞胞质及延伸突起，CGRP阳性染色定位于细神经纤维轴浆及施万细胞核周胞质，结缔组织性神经外膜无染色。这表明SVN神经干内同时存在自律神经纤维（VIP+）和感觉神经纤维（CGRP+），符合混合性自主-感觉纤维组成。

**讨论与结论**
讨论部分指出，本研究在100%的病例中观察到SVN的混合起源（交感与脊神经），支持了多数既往研究，但否认了单一交感起源或单一脊神经起源的观点。解剖难度及未进行组织学验证可能是此前争议的原因。免疫组织化学结果证实SVN神经干同时含有VIP和CGRP，提示其混合性自主-感觉纤维架构，但未对单个纤维亚型进行功能分类。模式分布的均匀性与其他研究一致，但不同于Raoul等报道的L2分支更多（本研究中1a型在L2较常见，但无统计学差异）。同侧连接占32%，未观察到跨中线分支，可能受解剖难度限制。此前研究多在SVN支配结构（如椎间盘、后纵韧带）中检测神经肽，而本研究直接对神经干进行免疫表型分析，避免了周围组织污染。这一神经化学特征为SVN阻断的病理生理学应用提供了依据，例如经皮椎间孔内镜下SVN射频消融术。研究局限包括未进行抗体缺失阴性对照，但内部结缔组织和血管组织的完全阴性染色证实了特异性。

**研究结论**
本研究确认了腰椎窦椎神经的形态学模式（单支为主，少数双支）和神经化学特征（混合VIP+自律与CGRP+感觉纤维）。这一发现填补了直接在SVN神经干上进行免疫组织化学表征的空白，支持SVN阻断在椎间盘源性腰痛诊断与治疗中的病理生理学基础。