《Veterinary Research Communications》：Effects of a kennel conditioning protocol on transport-induced stress in minipigs: insights from heart rate variability and salivary cortisol
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运输可能对实验动物构成显著应激源。本研究评估了一项为期五周的犬舍适应方案在减轻成年小型猪运输诱导应激方面的有效性。研究人员将13只动物随机分配至适应组（conditioned, CND）或对照组（control, CTR）。仅CND组接受了将用于运输的犬舍的适
运输可能对实验动物构成显著应激源。本研究评估了一项为期五周的犬舍适应方案在减轻成年小型猪运输诱导应激方面的有效性。研究人员将13只动物随机分配至适应组（conditioned, CND）或对照组（control, CTR）。仅CND组接受了将用于运输的犬舍的适应训练。适应期结束后，两组均接受模拟运输。通过基线期、犬舍停留期及模拟运输期间的唾液皮质醇（salivary cortisol）水平评估应激反应，同时连续监测心率变异性（heart rate variability, HRV）。两组间唾液皮质醇水平未观察到显著差异。总体而言，两组均未显示运输相关应激的明确生理证据。基线时，CTR组小型猪的样本熵（Sample Entropy, SampEn）（一种自主神经复杂性非线性参数）高于CND组，表明训练导致的正性情绪唤醒。运输期间，与基线相比，CND组小型猪的SampEn出现显著的组内升高，提示自主神经调节的差异。这些结果表明，重复性操作及暴露于非厌恶的实验程序可能有助于增强应激弹性，从而可能降低特定运输适应方案的可检测影响。研究人员的结果强调了生理应激指标解读的复杂性，并支持采用结合互补性福利测量的多模式方法。需进一步研究以确定针对性适应方案与一般饲养管理实践在塑造生物医学小型猪运输反应中的相对贡献。
运输是实验室动物公认的应激源，可引发自主神经系统和下丘脑-垂体-肾上腺（hypothalamic-pituitary-adrenal, HPA）轴激活，导致皮质醇分泌增加及自主神经平衡改变。小型猪因与人类解剖、生理及代谢相似而在临床前研究中日益重要，但运输会损害其福利及实验数据可靠性。当前研究问题在于：能否通过犬舍适应方案降低运输诱导的应激反应？既有研究多关注其他物种，针对小型猪的实证证据有限。为此，研究人员开展了一项包含5周犬舍适应方案的对照实验，旨在评估其对运输应激的缓解作用。研究将13只成年小型猪随机分为适应组（CND）和对照组（CTR），采集唾液皮质醇和心率变异性（Heart Rate Variability, HRV）数据。结果表明，两组均未表现出明确的运输应激生理证据，仅样本熵（Sample Entropy, SampEn）出现组间和组内差异，提示重复性操作和非厌恶暴露可能增强应激弹性。研究结论强调了生理指标解读的复杂性，并支持多模态福利评估方法。该论文发表于《Veterinary Research Communications》。
研究人员采用以下关键技术方法：使用智能纺织电极带（Smartex ECG）连续记录心电图（electrocardiogram, ECG），并通过Kubios HRV软件提取时域（MeanRR、SDNN、RMSSD）、频域（低频频段low-frequency band, LF；高频频段high-frequency band, HF；LF/HF比值）和非线性参数（SD1、SD2、SampEn）。唾液皮质醇通过商业酶免疫分析试剂盒（Salimetrics）测定，样本来自小型猪（内部繁殖设施，2岁混合品种，8雌5雄）在基线、犬舍停留及模拟运输期的采集。统计采用Wilcoxon秩和检验（组间比较）和Friedman检验（组内比较）。
研究结果如下：
**HRV参数**：在五个时间窗口（Basal 1、Permanence、Basal 2、Transport、Basal 3）中，除SampEn外所有HRV参数（MeanHR、MeanRR、SDNN、RMSSD、LF/HF、SD1、SD2）均未发现组间或组内显著差异。Basal 1时，CTR组SampEn显著高于CND组（p < 0.05）；Transport期间，CND组SampEn较Basal 1显著升高（p < 0.05）。
**皮质醇水平**：在四个时间点（T0、T1、T2、T3）中，组间及组内皮质醇浓度均无统计学显著差异。
讨论部分指出，两组均未显示运输应激生理证据，可能源于重复性正面操作及非厌恶刺激暴露使实验动物产生了应激弹性。CND组运输期间SampEn升高可能反映自主调节差异，但生物学意义尚不明确。基线时CND组SampEn较低可能反映正性情绪唤醒（预期奖励），而非福利下降。皮质醇无差异可能受唾液取样干扰或物种特异性影响。局限性包括样本量小、未整合行为指标、适应期仅5-6周、CTR组也经历了操作等。研究结论如下：
**结论**：在模拟运输中，接受5周适应训练的小型猪表现出比对照组更高的SampEn值，但皮质醇水平无组间差异。SampEn变化可能提示自主调节差异，但其对福利结局的确切生物学意义尚不清楚。值得注意的是，两组均未显示运输相关应激的明确生理证据。这一发现表明，重复性正面操作、实验环境熟悉化及非厌恶刺激暴露可能显著增强应激弹性，从而可能降低对特异性运输适应方案的需求。这些结果强调了生理应激指标解读的复杂性，并指出在评估福利时需结合生理、行为及情境指标的多模态方法。未来研究应探讨年龄易感性、延长适应及采样周期，并整合其他生理与行为福利指标，以阐明针对性适应方案与一般饲养管理实践在塑造研究小型猪应激反应中的相对贡献。
