由癌症相关成纤维细胞分泌的INHBA，通过ENG介导的凋亡抑制和EMT诱导作用，促进卵巢癌的对顺铂的耐药性及恶性进展

《Journal of Translational Medicine》：INHBA secreted by cancer-associated fibroblasts promotes cisplatin resistance and malignant progression of ovarian cancer via ENG-mediated suppression of apoptosis and induction of EMT

　　

摘要

背景

铂耐药性仍是卵巢癌治疗失败的主要原因。作为肿瘤微环境中的关键成分，癌症相关成纤维细胞在卵巢癌进展中起着重要作用。抑制素βA亚单位及其潜在受体内皮凝集素与卵巢癌的化疗耐药性有关，但它们在介导顺铂耐药性中的作用机制尚不清楚。

方法

通过单细胞RNA测序技术分析卵巢癌组织中的成纤维细胞亚群，并检测INHBA和ENG的表达情况。同时利用免疫组化及免疫荧光技术分析组织微阵列，以评估相应蛋白的表达及空间定位关系。研究人员分离出了原始成纤维细胞和正常成纤维细胞，通过CRISPR/Cas9技术在成纤维细胞中敲除INHBA，再利用慢病毒shRNA在顺铂耐药的卵巢癌细胞中稳定敲低ENG。通过体外实验、共免疫沉淀、分子对接以及体内异种移植模型，进一步研究INHBA-ENG轴的功能作用。

结果

单细胞RNA测序共识别出四种成纤维细胞亚群，其中在铂耐药的肿瘤中myoCAF1占主导地位。INHBA主要存在于myoCAF1中，而ENG则多分布于上皮细胞中，二者mRNA水平呈显著正相关。免疫组化检测也证实，卵巢癌患者尤其是铂耐药病例中INHBA/ENG的表达明显升高。由成纤维细胞产生的INHBA会促进卵巢癌细胞的增殖、侵袭、上皮间质转化以及顺铂耐药性的形成。分子对接实验显示INHBA与ENG之间存在高亲和力相互作用，这一结论也在卵巢癌与成纤维细胞共培养的实验中得到验证。敲低ENG可逆转顺铂耐药性，而重组INHBA则会消除这一效应。在体内实验中，由成纤维细胞产生的INHBA会在依赖ENG的作用下促进肿瘤生长和顺铂耐药性的产生。

结论

由myoCAFs产生的INHBA会与卵巢癌细胞表面的ENG结合，抑制细胞凋亡，诱导上皮间质转化，进而推动顺铂耐药性的形成。INHBA–ENG轴是克服卵巢癌铂耐药性的重要治疗靶点。