切勒瑞瑟林：一种用于靶向鼻咽癌中miR-21/PTEN/PI3K/AKT通路的新候选药物

《Journal of Translational Medicine》：Chelerythrine: a novel candidate for targeting miR-21/PTEN/PI3K/AKT in nasopharyngeal carcinoma

　　

摘要

背景

鼻咽癌具有高度的转移潜能和耐药性，因此需要开发新的安全治疗策略。PI3K/AKT信号通路的过度激活通常由致癌性微RNA-21（miR-21）驱动，进而导致PTEN蛋白的抑制，这一过程在鼻咽癌的进展中起着关键作用。来自天然植物的生物碱——红景天碱具有强大的抗肿瘤活性，但其具体的调控机制以及在鼻咽癌中的应用潜力仍不清楚。

方法

通过网络药理学预测红景天碱针对鼻咽癌的核心下游信号通路。在体外实验中，使用CCK-8检测、实时细胞分析、流式细胞术、伤口愈合试验以及Transwell迁移试验，来评估红景天碱对正常鼻咽上皮细胞（NP69）和鼻咽癌细胞（5–8 F和6-10B）的细胞毒性及抗恶性作用。通过RT-qPCR技术检测初级miR-21、前体miR-21以及成熟miR-21的表达水平。在体内实验中，建立BALB/c裸鼠异种移植模型，系统评估红景天碱的抑瘤效果及其宏观和组织学安全性。此外，还通过特定的PI3K激活剂以及慢病毒介导的miR-21修饰细胞系进行了验证实验。

结果

网络药理学分析表明PI3K/AKT通路是红景天碱发挥作用的关键路径。从功能上看，红景天碱在NP69细胞及体内主要器官中表现出良好的安全性，同时能有效抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭，并诱导其凋亡。从机制上分析，红景天碱能够同时抑制pri-miR-21和pre-miR-21的表达，说明miR-21的转录水平下降。这种上游抑制使得肿瘤抑制蛋白PTEN得以恢复，进而使PI3K/AKT通路失活，同时逆转上皮-间质转化现象。值得注意的是，与PI3K激活剂联合使用或通过慢病毒过表达miR-21，都会显著削弱红景天碱的抑瘤效果，而敲低miR-21则能增强其作用效果。

结论

总体而言，我们的研究结果表明红景天碱是一种安全有效的鼻咽癌治疗候选药物。它通过转录下调miR-21，从而解除对PTEN的抑制，进而使PI3K/AKT信号通路完全失活，从而达到抗肿瘤和抗转移的效果。

图表摘要

背景

鼻咽癌具有高度的转移潜能和耐药性，因此需要开发新的安全治疗策略。PI3K/AKT信号通路的过度激活通常由致癌性微RNA-21（miR-21）驱动，进而导致PTEN蛋白的抑制，这一过程在鼻咽癌的进展中起着关键作用。来自天然植物的生物碱——红景天碱具有强大的抗肿瘤活性，但其具体的调控机制以及在鼻咽癌中的应用潜力仍不清楚。

方法

通过网络药理学预测红景天碱针对鼻咽癌的核心下游信号通路。在体外实验中，使用CCK-8检测、实时细胞分析、流式细胞术、伤口愈合试验以及Transwell迁移试验，来评估红景天碱对正常鼻咽上皮细胞（NP69）和鼻咽癌细胞（5–8 F和6-10B）的细胞毒性及抗恶性作用。通过RT-qPCR技术检测初级miR-21、前体miR-21以及成熟miR-21的表达水平。在体内实验中，建立BALB/c裸鼠异种移植模型，系统评估红景天碱的抑瘤效果及其宏观和组织学安全性。此外，还通过特定的PI3K激活剂以及慢病毒介导的miR-21修饰细胞系进行了验证实验。

结果

网络药理学分析表明PI3K/AKT通路是红景天碱发挥作用的关键路径。从功能上看，红景天碱在NP69细胞及体内主要器官中表现出良好的安全性，同时能有效抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭，并诱导其凋亡。从机制上分析，红景天碱能够同时抑制pri-miR-21和pre-miR-21的表达，说明miR-21的转录水平下降。这种上游抑制使得肿瘤抑制蛋白PTEN得以恢复，进而使PI3K/AKT通路失活，同时逆转上皮-间质转化现象。值得注意的是，与PI3K激活剂联合使用或通过慢病毒过表达miR-21，都会显著削弱红景天碱的抑瘤效果，而敲低miR-21则能增强其作用效果。

结论

总体而言，我们的研究结果表明红景天碱是一种安全有效的鼻咽癌治疗候选药物。它通过转录下调miR-21，从而解除对PTEN的抑制，进而使PI3K/AKT信号通路完全失活，从而达到抗肿瘤和抗转移的效果。

图表摘要