优化的培养条件有助于维持羊胚胎干细胞的持续增殖与多能性

《Journal of Integrative Agriculture》：Optimized culture conditions enable sustainable proliferation and pluripotency of sheep embryonic stem cells

　　

金妙涵|宋圣交|梁景茹|李丽达|张柯静|沈文文|彼得·卡尔兹|陈宇林|王小龙

中国海南省三亚市572025，西北农林科技大学海南研究院

摘要

胚胎干细胞的多能性受多种信号通路的动态调控。通过添加不同的小分子化合物来研究多能性的变化，能为推进胚胎发育研究提供新的见解和方法。在本研究中，我们首先评估了WNT激活剂（CHIR99021）和抑制剂（IWR-1）对羊胚胎干细胞的影响。随后，我们筛选了七种其他小分子，并设计了合理的组合配方。在优化的培养体系——4i-LA（LIF、PD0325901、Vc、活化素A、G?6983和CGP77675）作用下，羊胚胎干细胞能够保持稳定的圆顶状形态，持续表达多能性标志物，具有较高的单细胞克隆形成效率，且能长期增殖（超过30代），同时仍保留向三系分化的能力。这些研究结果表明，4i-LA体系是一种高效、可化学定义的羊胚胎干细胞分离与维持方法，可为基础研究和应用研究提供标准化平台。