采用反向疫苗学策略，以凝集素样蛋白的N端结构域为靶点，设计针对耳念珠菌的嵌合多表位疫苗

《Scientific Reports》：Designing a chimeric multi-epitope vaccine against Candida auris using reverse vaccinology approach targeting the agglutinin-like protein N-terminal domain

　　

摘要

耳念珠菌是一种新兴的多药耐药真菌病原体，具有高死亡率、快速全球传播的特点，且对常规抗真菌疗法具有耐药性。该病原体能够巧妙地逃避宿主免疫反应并在医疗环境中持续存在，这亟需开发有效的免疫治疗策略。本研究采用反向疫苗学和免疫信息学方法，设计了一种新型嵌合多表位疫苗，其靶标为参与宿主与病原体相互作用的凝集素样蛋白的暴露在表面的N端结构域。根据抗原性、致敏性、毒性以及人群覆盖范围等标准，筛选出了高亲和力的B细胞及T细胞（MHC I类和II类）表位。这些选定的表位通过优化的连接子（EAAAK、AAY和GPGPG）以及佐剂进行组合，以提高免疫原性和结构稳定性。为评估该疫苗构象，研究人员对其进行了物理化学特性分析、结构验证、与人Toll样受体4的分子对接、正常模式分析、免疫模拟、密码子优化以及在pET28a+载体中的计算机克隆实验。结果显示，所选表位的人群覆盖率为97.31%。最终得到的疫苗构象具有较高的抗原性、无致敏性，且结构稳定、可溶性良好。分子对接分析表明，该疫苗构象与人类TLR4之间存在强而稳定的相互作用，结合能为?906.1千卡/摩尔。正常模式分析进一步证实了疫苗受体复合物的结构稳定性。免疫模拟结果显示，该疫苗能引发强烈的初级和二级免疫反应，表现为IgG和IgM抗体水平升高，同时细胞因子谱以IFN-γ和IL-2为主，属于Th1型反应。密码子优化和计算机克隆实验表明，该疫苗在pET28a+表达系统中的翻译效率良好。这种设计的嵌合多表位疫苗对耳念珠菌具有良好的免疫原性、结构稳定性以及受体结合能力。这些研究结果表明，该疫苗构象有望成为进一步实验验证的候选对象，也为未来开发针对多药耐药真菌感染的有效免疫治疗手段提供了可能。