中国NK细胞大颗粒淋巴细胞白血病患者的临床表现与遗传特征——一项单中心回顾性分析

《International Journal of Molecular Sciences》：Clinical Manifestations and Genetic Profile of Chinese Patients with NK-Cell Large Granular Lymphocytic Leukemia—A Single-Center Retrospective Analysis

　　

自然杀伤细胞大颗粒淋巴细胞白血病（NK-LGLL）是一种罕见且异质性的淋巴增殖性疾病。本研究回顾性评估了连续35例中国患者（中位年龄58岁），以评估其独特的临床-生物学特征和治疗反应。该中国人群表现出独特的合并症谱，与西方队列相比，并发关节炎（2.9%）和继发性恶性肿瘤的发生率较低。诊断时，31.4%的患者出现中性粒细胞减少症，42.9%出现贫血，31.4%出现血小板减少症。中位大颗粒淋巴细胞计数为3.9 × 10⁹/L（范围0.11–114.8 × 10⁹/L；四分位距1.9 × 10⁹/L，5.9 × 10⁹/L）。免疫表型分析一致鉴定出CD3^-CD56⁺克隆。值得注意的是，通过二代测序（NGS）进行的基因组分析显示STAT3突变率为14.3%。在治疗疗效方面，一线免疫抑制治疗（环磷酰胺或环孢素）与良好的临床应答相关（最佳总体应答率、完全缓解率均为66.7%）。此外，西罗莫司作为一种潜在高效的挽救治疗方案，总应答率为85.7%（95%置信区间42.1–99.6%），完全缓解率为57.1%。该队列的估计3年总生存率为85.6%（95%置信区间73.3%，99.8%），提示NK-LGLL在该中国队列中通常呈惰性病程，并突显了mTOR抑制剂在难治性病例中的潜在价值，值得进一步开展前瞻性研究。

**研究背景与问题**
自然杀伤细胞大颗粒淋巴细胞白血病（NK-LGLL）是一种罕见的惰性淋巴增殖性疾病，约占所有大颗粒淋巴细胞白血病（LGLL）病例的15%。与T细胞大颗粒淋巴细胞白血病（T-LGLL）相比，NK-LGLL的临床、生物学和基因组特征研究尚不充分，全球范围内的已发表数据有限。最大规模西方队列仅包括70例患者，而针对亚洲人群的大规模临床描述和结局分析尤为匮乏。现有研究表明，不同种族或地域背景下NK-LGLL的临床表现、合并症谱及遗传驱动因素可能存在差异。例如，西方队列中并发关节炎和继发性恶性肿瘤的比例较高，而亚洲队列中这些特征尚不明确。此外，STAT3/STAT5b突变是西方队列中的典型驱动突变，但在亚洲人群中的分布及致病意义仍需探索。由于缺乏前瞻性临床试验，NK-LGLL的治疗尚无统一共识，一线免疫抑制方案（环磷酰胺、甲氨蝶呤、环孢素）的疗效存在异质性，且挽救治疗策略的有效性证据有限。因此，研究人员开展此项单中心回顾性研究，旨在系统描述中国NK-LGLL患者的临床-生物学特征、遗传图谱及治疗反应，填补该疾病在亚洲人群中的知识空白。论文发表在《International Journal of Molecular Sciences》。

**研究方法概述**
研究人员纳入2017年1月至2023年10月期间于北京协和医院血液科确诊的35例NK-LGLL患者。诊断标准依据Lamy等描述的标准，要求外周血或骨髓中存在持续>6个月的典型NK细胞免疫表型（CD2⁺/sCD3^-/TCRαβ^-/CD56⁺）的大颗粒淋巴细胞（LGL）克隆。对其中21例患者进行靶向二代测序（NGS），覆盖与髓系肿瘤、淋巴系肿瘤及常见肿瘤信号通路（JAK-STAT、MAPK、PI3K-ALK-mTOR）相关的基因外显子区域。流式细胞术用于免疫表型鉴定，检测标记包括CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD16、CD56、CD57、TCRαβ、TCRγδ等。治疗反应评估采用标准血液学缓解标准。统计分析使用SPSS 22.0，采用Kaplan-Meier法估计总生存（OS）。

**研究结果**
**2.1 NK细胞大颗粒淋巴细胞白血病的临床特征**
研究人员发现，该队列中位诊断年龄为58岁，48.6%的患者在诊断时无症状，中位诊断延迟为12.2个月。常见临床表现包括疲劳（20.0%）、反复感染（20.0%）、脾肿大（8.6%）。28.6%的患者合并活动性自身免疫性疾病（如自身免疫性溶血性贫血、系统性红斑狼疮等）。血细胞减少普遍存在：中性粒细胞减少（31.4%）、贫血（42.9%）、血小板减少（31.4%）。中位LGL计数为3.9×10⁹/L。并发恶性肿瘤（分别为前列腺癌和骨髓增生异常综合征伴原始细胞增多）仅占5.7%。

**2.2 免疫表型特征**
流式细胞术分析显示，异常NK细胞克隆的免疫表型为：TCRαβ^-（100%）、TCRγδ^-（100%）、CD2^+/dim（100%）、sCD3^-（100%）、CD4^-（100%）、CD56^+/dim（100%）、CD57^+/dim（82.9%）、CD7^+/dim（80.0%）。CD8表达在60.0%的患者中为弱阳至强阳，表面CD16阳性率为57.1%。配对骨髓样本（n=4）中观察到一致的免疫表型。

**2.3 突变状态特征**
在21例接受NGS检测的患者中，47.6%检出基因突变，多数为寡突变，涉及JAK-STAT、NF-κB、表观遗传调控和RNA剪接等通路。STAT3突变检出3例（14.3%），包括D661Y、N647I和S614R。STAT5b突变未检出。携带STAT3突变的患者均表现为CD7⁺CD8^-CD56^+/dim表型，无关节炎或其他自身免疫性疾病，仅1例出现血细胞减少（重度贫血）。突变阳性组与阴性组在临床特征、实验室检查和免疫表型方面无显著差异。

**2.4 治疗与结局**
51.4%的患者接受治疗。一线方案包括环孢素（CsA）、环磷酰胺（CTX）、甲氨蝶呤（MTX）、他克莫司（FK506）、糖皮质激素及误诊为PTCL时采用的化疗。CsA和CTX疗效显著：CsA组66.7%达完全缓解（CR），中位缓解持续时间（DOR）未达到；CTX组同样66.7%达CR，DOR分别为34.4+和35.4+个月。西罗莫司作为挽救治疗，总缓解率（ORR）为85.7%，CR率57.1%，中位DOR未达到（范围1.0–33.4+个月）。合并自身免疫性疾病患者血液学缓解同时伴自身免疫症状改善。中位随访33.4个月，4例死亡（2例因LGLL进展、1例因重症肺炎、1例因合并急性髓系白血病），估计3年OS率为85.6%。

**讨论与结论总结**
讨论部分指出，该中国NK-LGLL队列与西方队列相比，临床表现相似但合并症谱存在差异：关节炎（2.9% vs. 21%）和并发肿瘤（5.7% vs. 24%）发生率较低，提示潜在的种族或谱系特异性临床分歧。STAT3突变率（14.3%）与西方报道（12–18%）一致，但低于T-LGLL（40–43%）。未检出STAT5b突变，且多数患者缺乏典型驱动突变，暗示NK-LGLL的发病机制涉及多条失调通路而非单一复发突变。在ASXL1、SF3B1、TET2中检出的突变可能反映背景性克隆造血而非主要致癌驱动事件。治疗方面，环磷酰胺和环孢素作为一线方案诱导良好缓解，而mTOR抑制剂西罗莫司作为挽救治疗显示出高缓解率，提示靶向mTOR通路的治疗价值。研究局限性包括：缺乏NK-LGLL确诊标志物、单中心回顾性设计样本量小、NGS panel未覆盖全部潜在驱动基因。

研究结论部分翻译：在这项研究中，研究人员描述了在中国单一机构诊断并随访的35例未选择NK细胞大颗粒淋巴细胞白血病患者的真实世界经验（临床特征、免疫表型、突变状态、治疗选择及治疗反应）。作为最大的亚洲回顾性NK-LGLL队列，这些患者表现出与西方患者相似的临床表现，但并发恶性肿瘤和关节炎病例较少。环孢素和环磷酰胺在一线治疗中提供了显著应答，而西罗莫司则显示出作为挽救治疗的潜力。这些发现有助于更好地理解这种罕见惰性NK细胞增殖性疾病。未来需要开展多中心前瞻性试验，以评估西罗莫司在NK-LGLL治疗中的作用。