摘要
研究目的：瞬时受体电位锚蛋白1（TRPA1）是一种能响应压力而产生的离子通道，与钙平衡、氧化还原信号传导、细胞迁移以及癌细胞存活密切相关；不过，激活TRPA1与抑制其功能在抗癌治疗中的实际作用仍不明确。本研究在多种人类癌细胞系中，比较了TRPA1激动剂ASP7663与TRPA1拮抗剂HC030031的抗癌潜力。研究方法：通过MTT法和LDH法检测细胞的增殖抑制和细胞毒性效应，同时全面分析了细胞的凋亡信号、DNA断裂情况、线粒体膜电位、细胞迁移能力、DNA与BSA的相互作用、拓扑异构酶I的抑制作用以及分子对接情况。研究结果：在大多数癌症模型中，ASP7663的GI50值明显低于HC030031，且对正常细胞的杀伤作用相对较小，具有较好的肿瘤选择性。从机制上看，ASP7663能显著诱导细胞凋亡，表现为Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的表达显著上升，同时DNA断裂加剧，细胞核出现明显凝集现象。罗丹明-123染色进一步显示线粒体膜电位显著下降，表明细胞内的凋亡途径被激活。此外，ASP7663还能在恶性细胞中造成选择性的膜损伤，在骨肉瘤和软骨肉瘤模型中更强烈地抑制细胞迁移，提高CT-DNA/BSA的结合亲和力，部分抑制拓扑异构酶I的活性，并能与包括Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bax和Bcl-2在内的凋亡相关靶标形成更强的分子对接作用。结论：总体而言，这些研究结果表明ASP7663是一种具有潜力的多靶点抗癌药物候选物，也为进一步研究TRPA1相关通路作为癌症治疗的潜在靶点提供了依据。
