《Current Issues in Molecular Biology》：Gestational Paracetamol (Acetaminophen) Toxicity Induces Behavioral and Structural Brain Defects in Rats
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对乙酰氨基酚是一种公认的镇痛药。研究将妊娠期对乙酰氨基酚使用与孤独症及注意缺陷/多动障碍等疾病联系起来。本研究旨在评估产前对乙酰氨基酚暴露对1月龄子代大鼠的作用。16只妊娠白化大鼠被分为四组：Ⅰ组接受生理盐水；Ⅱ组在胚胎第13天腹腔注射600 mg/kg丙戊酸
对乙酰氨基酚是一种公认的镇痛药。研究将妊娠期对乙酰氨基酚使用与孤独症及注意缺陷/多动障碍等疾病联系起来。本研究旨在评估产前对乙酰氨基酚暴露对1月龄子代大鼠的作用。16只妊娠白化大鼠被分为四组：Ⅰ组接受生理盐水；Ⅱ组在胚胎第13天腹腔注射600 mg/kg丙戊酸钠（Sodium valproate）；Ⅲ组从胚胎第13天至21天每日腹腔注射100 mg/kg对乙酰氨基酚；Ⅳ组在胚胎第13天单次腹腔注射300 mg/kg对乙酰氨基酚。对子代进行行为测试参数评估。动物脑进行脑源性神经营养因子（Brain-derived neurotrophic factor，BDNF）的组织病理学与免疫组织化学分析。Ⅱ组（丙戊酸）与Ⅳ组（单次对乙酰氨基酚剂量）的子代在神经行为测试参数上存在差异，并得到小脑与海马病理学的支持。丙戊酸组与单次对乙酰氨基酚组的BDNF染色小脑与海马切片显示小脑颗粒细胞与海马锥体细胞呈局灶性染色。这些发现表明，产前暴露于高剂量对乙酰氨基酚可诱导神经发育病理学改变。妊娠期对乙酰氨基酚使用的安全性需进一步评估。
该研究发表于《Current Issues in Molecular Biology》。目前，评估治疗剂量对乙酰氨基酚的研究普遍未能证明妊娠各 trimester 存在不良胎儿效应，对乙酰氨基酚传统被归类为B类（人类无风险）药物，许多作者认为其作为单一制剂在任何 trimester 均不增加胎儿风险，被认为在妊娠期使用安全。然而，越来越多的证据引发了对妊娠期使用对乙酰氨基酚的担忧，该药可跨越胎盘并可能影响发育中的胎儿。尽管研究相对稀少，但日益增长的证据表明，慢性和母体滥用对乙酰氨基酚与高血压、肾脏及肺部疾病相关。重要的流行病学研究表明，母体过度暴露于对乙酰氨基酚与儿童行为改变（包括害羞减少）有关；另一项研究记录了母体过度暴露于对乙酰氨基酚与兄弟姐妹中注意缺陷/多动障碍发生之间的关联。妊娠期对乙酰氨基酚清除率显著增加，其镇痛效应消退更快，可能需更高剂量以达到充分镇痛效果，而对乙酰氨基酚毒性可源于急性过量或慢性过度使用。2015年美国食品药品监督管理局（Food and Drug Administration，FDA）发布关于妊娠期疼痛药物使用的报告，揭示了对乙酰氨基酚与注意缺陷多动障碍之间可能联系的证据尚不确定。对乙酰氨基酚因其低分子量及对血浆蛋白的低亲和力可穿越血脑屏障（Blood–brain barrier）。神经行为障碍涵盖与导致脑部疾病或损伤的其他状况相关的广泛损害，其特征是在运动、社交、语言和认知等多种发育领域的技能获得中出现中断或紊乱，可表现为注意障碍、孤独症谱系障碍及运动与感觉处理障碍。过去十年，儿童神经发育障碍如注意缺陷/多动障碍（Attention-deficit/hyperactivity disorder，ADHD）发病率迅速上升，这种增长率不仅归因于诊断程序或父母意识的变化，还归因于产前期起作用的非遗传风险因素，这些障碍患病率的增加可能部分源于产前暴露于感染或某些药物，如风疹，或妊娠期丙戊酸、酒精或可卡因。脑源性神经营养因子（Brain-derived neurotrophic factor，BDNF）在神经保护中发挥多重作用，是神经发生的良好指标，涉及多种神经与神经发育障碍。在动物中，早期发育期间给予治疗剂量的对乙酰氨基酚可能改变运动与行为反应，这些改变可能通过对乙酰氨基酚诱导的BDNF与神经递质系统（包括血清素能、多巴胺能与肾上腺素能系统，以及内源性内源性大麻素系统与环氧化酶-2（Cyclooxygenase-2）的变化介导。因此，研究人员开展本研究以评估产前暴露于治疗剂量与高单次剂量对乙酰氨基酚对1月龄大鼠子代脑的影响，结合行为测试参数、组织病理学与免疫组织化学评估对乙酰氨基酚诱导的动物孤独症样行为改变证据，以产前暴露于丙戊酸（公认的孤独症实验模型）的子代为阳性对照组，并评估小脑与海马组织中BDNF免疫染色，得出结论：产前暴露于高剂量对乙酰氨基酚可诱导大鼠神经行为测试参数紊乱及海马与小脑组织病理学改变，类似于与孤独症谱系障碍及多动相关的一些行为与神经病理学特征，实验动物海马切片显示BDNF表达增加，对乙酰氨基酚的观察效应可与众所周知的动物孤独症模型丙戊酸所诱导的效应相比拟，这些不良效应背后的机制需进一步研究。该研究的重要意义在于对妊娠期对乙酰氨基酚使用的安全性提出进一步评估的需求，为相关神经发育毒性的探讨提供依据。
研究人员为开展研究用到的主要关键技术方法包括：实验经曼苏拉大学医学院医学研究伦理委员会批准（代码MS/May 2017），使用来源于曼苏拉大学医学院医学实验研究中心（Medical Experimental Research Center，MERC）动物房的16只妊娠白化Wistar大鼠，体重约150–200 g，按妊娠大鼠分为四组（Ⅰ组阴性对照每日生理盐水、Ⅱ组阳性对照胚胎第13天单次600 mg/kg丙戊酸钠、Ⅲ组胚胎第13至21日每日100 mg/kg对乙酰氨基酚、Ⅳ组胚胎第13天单次300 mg/kg对乙酰氨基酚）。子代生长1月后，使用ANY-maze的开放场测试（Open-field test）进行神经行为测试参数评估；随后深度麻醉处死取脑，进行苏木精-伊红（Hematoxylin and eosin，H&E）染色组织病理学评估及稀释度1/100的BDNF抗体亲和素-生物素技术免疫组织化学研究；使用Olympus数字相机与显微镜及Video Test Morphology软件、ImageJ-Win64软件进行数字形态
