《MUTATION RESEARCH-GENETIC TOXICOLOGY AND ENVIRONMENTAL MUTAGENESIS》：Does the 2-test in vitro genotoxicity battery of Ames plus in vitro micronucleus tests detect relevant substances that induce gene mutations in vivo?
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大卫·K|达米安·鲍文|保罗·福勒•在监管检测中，常用的体外基因毒性检测组合包括阿姆斯试验和微核试验•研究了26种在体内能诱发基因突变但在体外检测为阴性的物质•仅有普卡巴嗪在体内检测呈阳性，而在体外主要呈阴性•这种差异主要是由于体外代谢条件不佳所致•现有数据不足以支持在检测组合中
大卫·K|达米安·鲍文|保罗·福勒
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在监管检测中，常用的体外基因毒性检测组合包括阿姆斯试验和微核试验
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研究了26种在体内能诱发基因突变但在体外检测为阴性的物质
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仅有普卡巴嗪在体内检测呈阳性，而在体外主要呈阴性
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这种差异主要是由于体外代谢条件不佳所致
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现有数据不足以支持在检测组合中加入哺乳动物细胞基因突变试验
引言
由细菌基因突变试验（阿姆斯试验）和体外微核试验组成的体外基因毒性检测组合被监管机构广泛推荐用于药品、食品添加剂、工业化学品、化妆品成分等领域的检测，因为它能够检测三种主要的基因毒性作用方式：基因突变诱导、染色体损伤（致裂性）以及染色体丢失（非整倍体）。推荐使用该检测组合是基于其检测体内基因毒素和致癌物的高灵敏度，而如果增加其他检测方法，则会降低对非基因毒素和非致癌物给出阴性结果的准确性（参见[1]、[2]、[3]）。在欧盟，对于化妆品成分，基因毒性检测仅基于体外试验（自2009年起已禁止体内试验）；在其他一些监管情况下，比如低吨位工业化学品和食品添加剂，如果体外基因毒性试验呈阴性，则无需进行进一步的体内试验。因此，确保体外基因毒性检测组合不会遗漏重要的致突变或基因毒性物质至关重要。
选择这种两项检测组合而非以往的三项检测组合，是基于将体内基因毒性和致癌性研究的结果与阿姆斯试验加微核试验的结果进行比较后做出的决定。不过，这些建议[1]、[2]、[3]是在13多年前提出的，当时大多数体内数据来自微核和染色体畸变研究，关于能诱发基因突变的物质的相关公开数据十分有限。近年来，关于转基因啮齿动物和Pig-a突变研究中基因突变诱导现象的研究越来越多，相应的OECD指南也得到了更新（分别为OECD指南488和470）。由于能诱发基因突变的物质尤其值得关注（它们会导致稳定的基因变化，是致癌过程中的关键步骤），一些监管机构的顾问质疑阿姆斯试验加微核试验组合是否能够有效检测体内能诱发基因突变的物质。
因此，在本文中，我们筛选出了那些有研究表明能在体内诱发转基因啮齿动物或Pig-a突变，但在阿姆斯试验中却被判定为不能诱发基因突变的物质。我们仔细分析了这些在体内检测呈阳性、在阿姆斯试验中呈阴性的结果在符合监管要求和OECD指南的检测设计方面的可靠性，同时探讨了是否需要在体外检测组合中加入哺乳动物细胞基因突变试验（例如针对Tk或Hprt突变的试验）。
章节摘要
方法
我们搜索了五篇包含阿姆斯试验和转基因啮齿动物试验结果表格的数据库文献，以找出在阿姆斯试验中呈阴性但在转基因啮齿动物试验中呈阳性的物质。这五篇文献分别是：
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Lambert等人，2005年[4]，其中包含了为制定OECD指南488而提交的详细评审资料中的数据。
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Kirkland等人，2011年[2]，建议将阿姆斯试验加微核试验作为检测体内基因毒素和致癌物的足够体外核心检测组合。
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Morita等人，2016年[5]，该研究
结果
在上述五篇数据库文献中，共有26种物质最初被报道为在阿姆斯试验中呈阴性但在转基因啮齿动物试验中呈阳性，这些物质列于表1中。在可能的情况下，我们会核查做出这些判断的文献或数据来源，并补充任何额外的新数据。同时，也会查找并核查其他相关检测指标的数据，包括体外染色体畸变试验、微核试验、哺乳动物细胞基因突变试验，以及体内的染色体畸变试验和微核试验。
在某些情况下
总结与讨论
通过上述分析，对于数据库中的26种物质，有25种的“阿姆斯试验阴性/转基因啮齿动物试验阳性”这一分类在按照标准监管要求和OECD指南进行检测时其合理性尚不确定。唯一未在上面讨论的物质是普卡巴嗪。
关于普卡巴嗪：
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其在阿姆斯试验中的阴性结果似乎较为可靠。
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无论是口服还是腹腔注射给药，它在转基因啮齿动物试验中均为阳性。
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它在Pig-a试验中也呈阳性。
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作者贡献说明
大卫·柯克兰：写作——审稿与编辑，写作——初稿撰写，项目监督，项目管理，方法设计，实验研究，概念构思。保罗·福勒：写作——审稿与编辑，结果验证。达米安·鲍文：写作——审稿与编辑，结果验证。
利益冲突声明
作者声明，他们不存在任何可能影响本文研究结果的已知财务利益关系或个人关系。
