采用等温核苷酸扩增技术，可实现探针引导的扩增以及在室温下的直接检测

《Nature Communications》：Annexing isothermal nucleotide amplification enables probe-guided amplification and direct detection at ambient temperature

　　

摘要

等温核酸扩增技术在分散式诊断中相比qPCR具有优势，但其应用仍受限于严格的引物设计、检测复杂性以及设备依赖性。基于重组酶的系统虽然比其他等温方法能在更低温度下工作，但需要较长的引物以及额外的酶处理步骤才能完成检测。在此，我们介绍了附着型等温核苷酸扩增技术（ANINA），这是一种基于探针的重组酶系统，能够在室温下通过单一冻干反应同时实现扩增和检测。该技术中的附着探针可通过空间附着作用结合短引物，从而在25℃下30分钟内高效完成扩增，并且无需额外酶处理即可直接进行侧流检测。研究表明，该技术能够检测出存在于大量宿主基因组DNA中的阿托摩尔级的WSSV和EBV DNA，可在人工构建的样本中实现对DNA、RNA病毒及细菌的特异性检测，其定量实时检测能力可与qPCR相媲美。此外，该技术还实现了无需任何设备的45分钟样本检测流程，能够在自然宿主模型中以与qPCR相当的灵敏度检测早期病毒感染，其性能也优于市面上的抗原检测产品。