外泌体通过外泌体来源的hsa_circ_0057320-miR-28-5p/E2F6轴调节巨噬细胞的代谢重编程及M2极化，从而促进肝细胞癌的发展

《Journal of Translational Medicine》：Exosome-mediated hepatocellular carcinoma progression by modulating macrophage metabolic reprogramming and macrophage M2 polarization via exosome-derived hsa_circ_0057320-miR-28-5p/E2F6 axis

　　

摘要

背景

肝细胞癌是一种恶性程度极高的疾病，预后较差。最新研究强调了肿瘤微环境在肝细胞癌进展中的重要性，而外泌体则是连接肿瘤细胞与周围基质成分的关键信使。尽管环状RNA在肿瘤来源的外泌体中大量存在，但其在肝细胞癌中的具体作用和机制仍不明确。

方法

通过透射电子显微镜和流式细胞术对外泌体进行表征。利用RNA测序识别差异表达的环状RNA。通过西方印迹法、免疫荧光法和代谢组学技术检测巨噬细胞的极化及代谢重编程情况。通过转孔实验、管状形成实验和球形细胞萌发实验研究hsa_circ_0057320、miR-28-5p和E2F6在肝细胞癌进展中的作用。构建异种移植小鼠模型，进一步验证这些因子在肝细胞癌转移和血管生成以及外泌体在疾病进展中的作用。同时利用RIP技术和双荧光素酶报告基因实验探究hsa_circ_0057320、miR-28-5p和E2F6之间的相互作用。

结果

在本研究中，我们发现经HOXD3处理的肝细胞癌产生的外泌体可通过代谢重编程促使巨噬细胞向M2表型极化。此外，HOXD3诱导的肝细胞癌会分泌富含hsa_circ_0057320的外泌体，这类外泌体能在体内和体外诱导巨噬细胞呈现替代激活的M2表型，进而增强血管生成能力和转移能力。在miR-28-5p水平升高后，hsa_circ_0057320在肝细胞癌转移和侵袭中的作用会被逆转。作为miR-28-5p的作用靶标，E2F6在肝细胞癌组织和细胞中的表达显著上升。同时，hsa_circ_0057320与E2F6之间存在正相关关系，而与miR-28-5p则呈负相关关系。

结论

由HOXD3诱导的肝细胞癌产生的外泌体可通过代谢重编程促进巨噬细胞向M2表型极化。此外，HOXD3诱导的含有hsa_circ_0057320的外泌体可通过miR-28-5p/E2F6通路进一步促进巨噬细胞M2极化，从而加速肝细胞癌的恶性发展。这些研究结果揭示了肝细胞癌与肿瘤微环境之间的交互通信机制，同时表明hsa_circ_0057320可能是用于监测转移性肝细胞癌的外泌体标志物，也是潜在的治疗靶点。