《Transboundary and Emerging Diseases》：Bluetongue Virus Surveillance in Yunnan, China, 2025: Isolation of Multiple Serotypes From Culicoides and Seasonal Seroepidemiology in Cattle
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蓝舌病病毒（BTV）是一种节肢动物传播的病原体，在全球范围内对反刍动物造成巨大的经济损失。云南省位于中国热带和亚热带边境地区，面临BTV传播的高风险。本研究监测了BTV的传播媒介，对流行的BTV毒株进行了遗传特征分析，并评估了血清阳性率，以支持早期预警工作。2
蓝舌病病毒（BTV）是一种节肢动物传播的病原体，在全球范围内对反刍动物造成巨大的经济损失。云南省位于中国热带和亚热带边境地区，面临BTV传播的高风险。本研究监测了BTV的传播媒介，对流行的BTV毒株进行了遗传特征分析，并评估了血清阳性率，以支持早期预警工作。2025年，研究人员从三个县收集了46,000只库蠓，进行了鉴定并分为460个混合池。此外，使用竞争ELISA（C-ELISA）检测了来自17个边境县的5,934份牛血清样本。研究人员使用RT-qPCR筛选库蠓混合池中的BTV核酸，然后接种到C6/36细胞进行病毒分离。对分离株进行了全基因组测序以及VP2和VP5基因的系统发育分析。在所有采样点，尖喙库蠓（C. oxystoma）和三带库蠓亚属（C. trithecoides）是优势蠓种。RT-qPCR鉴定出11个BTV阳性混合池，主要涉及尖喙库蠓、伊米库蠓（C. imicola）、泰纳库蠓（C. tainanus）和雅各布森库蠓（C. jacobsoni）。四个BTV分离株被鉴定为血清型1、4、5和16。VP2和VP5的系统发育分析显示，所有四个毒株可能属于东方拓扑型（Eastern topotype），并与来自中国、日本、印度和澳大利亚的历史BTV毒株密切相关。牛群中BTV的总体血清阳性率为41.37%（95%置信区间[CI]，40.12%?42.62%），秋季（58.07%，95% CI，56.29%?59.85%）显著高于春季（24.87%，95% CI，23.32%?26.42%）。在云南边境地区，研究人员从多种库蠓中检测并分离了多种BTV血清型。此外，在当地牛群中观察到BTV血清阳性率，表明该地区可能是一个重要的BTV流行热点。这些发现强调了持续开展媒介监测和早期预警系统以预防易感牲畜中蓝舌病暴发的必要性。
**论文解读：2025年中国云南边境地区蓝舌病病毒媒介监测、血清流行病学及分子特征分析**
**研究背景与目的**
蓝舌病（BT）由蓝舌病病毒（BTV）引起，通过库蠓叮咬传播，对全球反刍动物养殖业造成严重经济损失。云南省位于中国西南边境，地处热带和亚热带，历史上曾多次分离出多种BTV血清型，但自2018年后系统性监测停滞。2023年，欧洲BTV-3暴发并迅速扩散，凸显了重新评估边境地区BTV流行状况的紧迫性。当前存在的主要问题包括：云南边境地区库蠓媒介种类组成、BTV血清型多样性及季节性流行规律尚不明确，缺乏早期预警所需的基础数据。为此，研究人员开展了2025年度的监测研究，旨在鉴定BTV媒介、分析循环毒株的遗传特征、评估牛群血清阳性率，从而为蓝舌病防控提供科学依据。该研究发表在《Transboundary and Emerging Diseases》。
**主要技术方法（不超过250字）**
样本队列来源：库蠓样本于2025年6月至7月采自云南省双江、景洪、师宗三县的牛舍，牛血清样本于2025年春季和秋季采自17个边境县（包括沧源、凤庆、富宁、江城、景洪、梁河、陇川、陆良、泸水、芒市、勐海、勐腊、弥勒、师宗、双江、腾冲、盈江），共5,934份。关键技术方法：库蠓经形态学鉴定后按同种100只分组，采用RT-qPCR检测BTV核酸；阳性混合池滤液接种C6/36细胞进行病毒分离；通过FLAC技术扩增全基因组cDNA，结合二代测序（NGS）获得基因组序列；对VP2和VP5基因进行最大似然法系统发育分析；牛血清使用竞争ELISA（C-ELISA）检测BTV抗体，采用卡方检验和二元逻辑回归模型评估季节差异的比值比（OR）。
**研究结果**
保留每个小标题，并简要说明结论：
- **3.1 库蠓采集**：研究人员从三个县共采集46,000只库蠓，鉴定出9个种和1个亚属（三带库蠓亚属）。尖喙库蠓（C. oxystoma）和三带库蠓亚属（C. trithecoides）在所有采样点均为优势种，占比分别为35.36%和24.52%。
- **3.2 库蠓中BTV的RT-qPCR检测**：对460个混合池进行RT-qPCR检测，11个池（2.39%）为强阳性（Ct≤30），主要涉及尖喙库蠓、伊米库蠓、泰纳库蠓和雅各布森库蠓，表明这些物种可能携带BTV。
- **3.3 病毒分离与鉴定**：将11个阳性池滤液接种C6/36细胞，4个分离株出现明显细胞病变效应（CPE），经血清型特异性RT-qPCR鉴定为BTV-1、BTV-4、BTV-5和BTV-16，分别来自景洪、师宗和双江的库蠓。
- **3.4 四株毒株的基因组特征**：四个分离株的基因组全长约19,173–19,188 bp，G+C含量43.37%–43.74%，各片段长度高度保守，5′和3′非编码区（NCR）具有保守末端序列（5′—GUUAAAA和ACUUAC—3′），仅Seg-3的5′NCR为GUUAAAT。
- **3.5 节段2/VP2的序列和系统发育分析**：VP2基因系统发育树显示，四个分离株分别与同源血清型的东方拓扑型（Eastern topotype）毒株聚类，与来自中国、日本、印度和澳大利亚的毒株亲缘关系最近（如BTV-1与YNDH/103/2013的核苷酸和氨基酸相似性分别为98.82%和99.06%），而与西方拓扑型（Western topotype）毒株的相似性显著较低（核苷酸相似性<74.32%）。
- **3.6 节段6/VP5的序列和系统发育分析**：VP5基因分析结果与VP2一致，四个分离株均属于东方拓扑型，与亚洲毒株高度相似（如BTV-5与印度毒株的核苷酸相似性达98.88%），而西方拓扑型毒株的相似性较低。
- **3.7 云南牛群中BTV的流行病学调查**：对5,934份牛血清进行C-ELISA检测，总体BTV抗体阳性率为41.37%（95% CI: 40.12%–42.62%）。秋季阳性率（58.07%，95% CI: 56.29%–59.85%）显著高于春季（24.87%，95% CI: 23.32%–26.42%），除双江和陇川外，其余地区两季差异均具有极显著统计学意义（p<0.0001）。腾冲、芒市、勐腊、梁河等地的OR值超过10，表明秋季感染风险显著增高。
**讨论与结论总结**
讨论部分指出，本研究确认了云南边境地区库蠓种类多样性，尖喙库蠓可能为该区域BTV传播的潜在媒介，伊米库蠓虽在欧洲和非洲是主要媒介，但本次检测率较低，需持续监测。不同区域血清型分布差异显著（景洪检出BTV-1和BTV-5，师宗为BTV-4，双江为BTV-16），表明存在相对独立的传播循环，可能受媒介分布、家畜流动和跨境连接影响。系统发育分析证实所有分离株属于东方拓扑型，与亚洲毒株密切相关，排除了近期西方拓扑型毒株的输入。牛群血清阳性率季节变化与库蠓密度高峰一致，秋季阳性率大幅上升，提示夏季至秋季是病毒传播高风险期。研究局限性包括采样点有限、缺乏实验感染验证、未进行全基因组重组分析，以及血清学调查无法区分感染血清型和感染时间。
**研究结论翻译**：2025年，研究人员从云南边境地区（景洪、师宗和双江）的库蠓中分离出四种BTV血清型（1、4、5和16），确认了涉及多种血清型的复杂传播循环。对Seg-2/VP2和Seg-6/VP5的序列和系统发育分析表明，这四个分离株可能属于东方拓扑型，并与亚洲毒株密切相关。尖喙库蠓（C. oxystoma）是优势种，且在多个地点检测到BTV，提示其可能是该地区的潜在媒介物种。此外，在伊米库蠓（C. imicola）、泰纳库蠓（C. tainanus）和雅各布森库蠓（C. jacobsoni）中也检测到BTV，表明多种库蠓可能参与病毒传播。牛血清中BTV阳性率秋季显著高于春季，比值比（OR）超过4，在部分地区超过10。这一趋势可能与夏秋季库蠓活动高峰期有关，库蠓密度增加导致牛群感染率升高。这些发现为中国西南部蓝舌病早期预警提供了关键数据。
