《Leukemia》：Phase I, open-label, multi-center dose-finding and expansion study to investigate the safety, tolerability, and preliminary efficacy of CR-001 (5-FU-miR-15a) in patients with acute myeloid leukemia
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研究人员报告了一项多中心、首次人体、I期、剂量探索临床试验，旨在使用标准3+3剂量递增研究设计，调查CR-001的安全性、耐受性和初步疗效。符合条件的患者（N=11，中位年龄74岁，中位治疗线数3线，7/11在异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后复发）
研究人员报告了一项多中心、首次人体、I期、剂量探索临床试验，旨在使用标准3+3剂量递增研究设计，调查CR-001的安全性、耐受性和初步疗效。符合条件的患者（N=11，中位年龄74岁，中位治疗线数3线，7/11在异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后复发），于2022年8月15日至2023年12月13日期间入组，并接受了总共66剂CR-001治疗。所有参与者的基线特征总结在补充表1和2中。10例（91%）患者为复发/难治性急性髓系白血病（AML），1例（9%）为新诊断AML且被研究者认为不适合标准治疗。所有患者均具有不良风险遗传学特征（ELN 2022），5例（43%）患者携带TP53突变，6例（55%）患者具有复杂核型。所有接受至少一剂CR-001的患者均纳入安全性分析，而仅接受至少三剂的患者纳入疗效分析。疗效评估在最后一次给药后一周进行，安全性评估在治疗后30天进行。在初始四周每周剂量（周期1）后显示疾病稳定的患者，有资格接受最多额外四剂CR-001治疗。
**论文解读文章**
**研究背景**
急性髓系白血病（AML）是一种高度异质性的血液系统恶性肿瘤，治疗耐药是其难治和复发的主要原因。尽管化疗和靶向治疗取得进展，但多数患者最终产生耐药，尤其是复发/难治（R/R）AML患者预后极差。微小RNA（miRNA）作为关键的表观遗传调控因子，在肿瘤发生和治疗耐药中发挥重要作用。miR-15a是一种肿瘤抑制性miRNA，在AML中表达下调，其靶点包括BCL2、YAP1、WEE1、CHK1和BMI1等致癌蛋白。既往研究显示，恢复miR-15a表达可抑制AML细胞增殖并诱导凋亡。然而，miRNA模拟物的体内递送和稳定性是临床转化的主要挑战。5-氟尿嘧啶（5-FU）修饰的miRNA（如CR-001）旨在通过增强稳定性、维持靶向特异性并促进细胞摄取，实现双重抗肿瘤机制：一方面释放化疗药物5-FU抑制胸苷酸合酶，另一方面通过miR-15a抑制多条耐药相关通路。基于此，该研究首次在人体中评估CR-001在R/R AML患者中的安全性、耐受性和初步疗效，论文发表在《Leukemia》。
**研究内容与结论**
该研究是一项多中心、首次人体、I期剂量探索临床试验，采用标准3+3设计，入组了11例R/R AML患者（中位年龄74岁，中位既往治疗线数3线，其中7例接受过异基因造血干细胞移植）。研究人员通过递增CR-001剂量（7.5 mg、11.25 mg、15 mg和18.75 mg，每周一次，共4周），同时保持递送载体聚乙烯亚胺（PEI）剂量恒定，评估了CR-001的安全性和初步疗效。主要结论包括：CR-001总体耐受性良好，未观察到剂量限制性毒性；73%的患者在4剂后ECOG体力状态评分为0-1；初步疗效可评估的10例患者中，6例（60%）获得疾病稳定（SD），其中3例携带TP53突变；3例患者在3-4剂后骨髓原始细胞计数下降，1例患者在接受8剂后出现持续缓解；单细胞质谱流式分析显示，CR-001可下调miR-15a靶点蛋白（如WEE1、BCL2、MCL1），尤其在较高剂量水平下。该研究的意义在于，首次证明了基于肿瘤抑制性miR-15a的5-FU修饰miRNA疗法在R/R AML中的可行性和安全性，为后续维持治疗研究提供了依据。
**关键技术方法**
研究人员采用标准3+3剂量递增设计，纳入11例R/R AML患者（来源：多中心临床试验，EudraCT编号2021-006332-46）。关键技术包括：①静脉注射CR-001（5-FU-miR-15a）与固定低剂量PEI共递送，每周一次共4周；②使用质谱流式技术（CyTOF）对患者外周血和骨髓样本进行单细胞蛋白组学分析，检测miR-15a靶点（BCL2、YAP1、WEE1、CHK1、BMI1）及AML相关标记物；③采用ELN 2022标准评估疗效，基于CTCAE v5.0评估安全性；④患者接受地塞米松、对乙酰氨基酚、法莫替丁和西替利嗪预处理以预防输注反应。
**研究结果**
**安全性**：所有11例患者均接受至少一剂CR-001，未观察到剂量限制性毒性。常见治疗相关不良事件（TRAEs）包括感染（100%）、高血糖（64%）和输注相关反应（55%）。高血糖为轻度（CTCAE 1级）且短暂，无需胰岛素治疗。输注反应表现为寒战和心动过速，持续约30分钟并完全缓解，仅1例患者（患者9）怀疑细胞因子释放综合征并接受托珠单抗治疗。输注反应出现在7.5 mg以上剂量水平，且延长输注时间（20-120分钟）未能完全避免。所有allo-HSCT后复发患者未出现新发或加重移植物抗宿主病（GVHD）。
**疗效**：在可评估的10例患者中，6例（60%）在3-4剂CR-001后获得疾病稳定（SD），其中3例携带TP53突变。2例患者（患者5和6）在8剂后仍保持SD。3例患者（患者6、7、9）在3-4剂后骨髓原始细胞计数减少，1例（患者5）在8剂后出现减少。患者5（乳腺癌治疗相关AML，复杂核型，NRAS、ASXL1、TP53突变）在接受2剂后白血病性心包积液持续消退，体力状态良好，在11.25 mg剂量水平下生存4.1个月（末次给药后），并观察到骨髓粒系成熟/分化征象，伴随中性粒细胞增加/正常化。另外2例患者（患者6和7）在同一剂量水平下也出现中性粒细胞增加/正常化，并均获得SD。
**单细胞蛋白组学分析**：质谱流式分析显示，在最低剂量水平（7.5 mg），部分AML原始细胞簇在14天时出现miR-15a靶点（如BMI1、WEE1、MCL-1）降低，但整体簇轨迹变化多样，且患者1在脓毒症时多个标记物强度增加。在较高剂量水平（11.25 mg），患者7出现WEE1、BCL2和MCL1的更明显降低，但同一剂量水平的患者6未重复此现象。
**总结与讨论**
该研究是首个基于肿瘤抑制性miR-15a的CR-001在复发/难治AML中的I期临床试验。CR-001总体耐受性良好，未出现剂量限制性毒性，且基于单细胞蛋白组学分析显示出生物学活性信号，表现为疾病稳定和靶点蛋白下调。研究结论指出，CR-001具有优越的安全性特征，可能作为AML维持治疗的潜在候选药物。讨论部分强调，尽管疗效初步，但疾病稳定和中性粒细胞恢复提示CR-001可能通过miR-15a介导的靶点抑制和5-FU化疗作用实现双重抗白血病效应。未来研究需扩大样本量，优化剂量和给药方案，并探索生物标志物以预测疗效。该研究局限性包括样本量小、单臂设计及缺乏长期随访，但为后续II期临床试验奠定了基础。
