来自患者的蜕膜类器官揭示了在复发性自然流产中与rhG-CSF相关的、涉及JAK2/STAT3信号通路的保护性反应

《Stem Cell Research & Therapy》：Patient-derived decidual organoids reveal rhG-CSF-associated protective responses involving JAK2/STAT3 signaling in recurrent spontaneous abortion

　　

摘要

背景

反复自然流产是一种复杂的生殖系统疾病，目前往往缺乏有效的治疗手段。重组人粒细胞集落刺激因子在改善反复自然流产患者的妊娠结局方面显示出潜力，但其作用机制仍不清楚。类器官技术为生殖医学领域的疾病建模和机制研究提供了新的机遇。

方法

利用反复自然流产患者的蜕膜组织样本，通过三维培养技术构建蜕膜类器官。通过形态学观察、苏木精-伊红染色和过碘酸-雪夫染色、免疫荧光及免疫组化等方法，分析这些类器官的关键标志物表达情况以及激素反应性。同时采用荧光检测法评估rhG-CSF对类器官存活率的影响。通过转录组测序和生物信息学分析，确定rhG-CSF刺激后差异表达的基因和信号通路，再通过西方印迹法进一步检测蛋白质表达及信号通路的激活情况。

结果

成功构建了蜕膜类器官，其结构和功能特征与原始组织相似，包括激素反应性和标志物表达情况。rhG-CSF能显著促进类器官增殖，增强其抗凋亡和促血管生成能力，还会引发炎症反应。转录组和信号通路分析显示，rhG-CSF处理后JAK2/STAT3信号通路被激活。西方印迹法检测结果显示，rhG-CSF作用下JAK2和STAT3的磷酸化水平上升，PCNA、VEGFA、IL-1β、IL-6和Bcl-2的表达升高，而Bax的表达则下降。

结论

成功构建并验证了基于患者来源的蜕膜类器官模型，该模型可模拟体内组织的特性。在这一体外反复自然流产模型中，rhG-CSF可通过促进增殖、抑制凋亡和增强血管生成发挥保护作用，而这些作用可能与JAK2/STAT3信号通路的激活有关。这些研究结果为未来反复自然流产的治疗策略提供了新的思路和实验依据。