牙形滴虫和牙龈内阿米巴与种植体周围炎和牙周炎的关联

《Clinical Oral Investigations》：The association between Trichomonas tenax and Entamoeba gingivalis and periimplantitis and periodontitis

　　

摘要
目的本研究旨在评估与健康对照组相比，牙形滴虫（*Trichomonas tenax*, *T. tenax*）和牙龈内阿米巴（*Entamoeba gingivalis*, *E. gingivalis*）与种植体周围疾病和牙周疾病的关联。材料与方法本研究共纳入140名参与者，分为四组：35名患有种植体周围炎和牙周炎的患者（IP+P组）；35名种植体周围和牙周健康者（IH+PH组）；35名牙周炎患者（P组）；以及35名牙周健康个体（PH组）。记录临床牙周和种植体周围炎参数。从P组和PH组的牙齿周围，以及IP+P组和IH+PH组的种植体和牙齿周围采集牙菌斑样本。在显微镜下检测*T. tenax*和*E. gingivalis*的存在。结果IP+P组和P组牙齿样本中*T. tenax*和*E. gingivalis*寄生虫的检出率高于IH+PH组和PH组（*p*<0.001）。IP+P组种植体样本中这两种寄生虫的检出率高于IH+PH组（分别*p*<0.001和*p*=0.001）。在IP+P组和IH+PH组中，同一宿主牙齿和种植体样本之间的寄生虫检出率无差异（*p*≥0.05）。*T. tenax*和*E. gingivalis*的存在与牙周病的存在、牙周炎的严重程度和分级相关，且独立于其他因素（*p*<0.05）。结论*T. tenax*和*E. gingivalis*的存在可能与种植体周围炎和牙周炎病变相关。同一口腔内牙齿和种植体表面的寄生虫检出率相似。临床相关性疾病部位发现的原生动物可能不意味着与疾病存在直接的因果关系；然而，它们的检出可提示机会性微生物活动或正在进行的口腔炎症。

**论文解读：牙形滴虫与牙龈内阿米巴在种植体周围炎和牙周炎中的关联性研究**

**研究背景与问题**
种植体周围炎（peri-implantitis）是种植体周围支持组织因生物膜积聚引发的感染性骨丧失，患者层面患病率约为19.83%–22%。其核心病因是种植体周围菌斑堆积，导致组织稳态破坏和微生物失调（microbial dysbiosis）。既往研究已揭示细菌（如铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌）、真菌（如拟青霉属）及病毒（如EB病毒）参与其中，但真核原生动物（protozoa）——尤其是口腔内最常见的两种寄生虫，即牙形滴虫（*Trichomonas tenax*, *T. tenax*）和牙龈内阿米巴（*Entamoeba gingivalis*, *E. gingivalis*）——在种植体周围炎和牙周炎（periodontitis）中的作用尚不明确。已有研究表明，*E. gingivalis*可侵入牙龈上皮细胞并摄取宿主细胞核物质，*T. tenax*能破坏细胞连接并诱导IL-6产生。然而，目前仅有一项研究探讨了这两种寄生虫与牙周炎的关联，尚无研究系统比较其在种植体周围炎和牙周炎微生态位中的检出情况。因此，开展此项研究旨在评估*T. tenax*和*E. gingivalis*与种植体周围疾病和牙周疾病的关联，并分析同一患者口腔内种植体与牙齿位点寄生虫检出的差异。

**研究内容与结论**
研究人员在土耳其哈塔伊穆斯塔法凯末尔大学牙科学院牙周病科和医学院寄生虫学科开展了一项横断面研究（cross-sectional study），纳入140名参与者，分为四组：种植体周围炎和牙周炎组（IP+P组，*n*=35）、种植体周围和牙周健康组（IH+PH组，*n*=35）、牙周炎组（P组，*n*=35）以及牙周健康组（PH组，*n*=35）。通过临床牙周参数（菌斑指数、牙龈指数、探诊出血、探诊深度、临床附着丧失）记录及标准化根尖片评估骨丧失，依据2017年世界牙周和种植体周围疾病分类标准进行诊断。采用无菌刮匙采集牙齿和种植体周围菌斑样本，通过直接镜检和吉姆萨染色（Giemsa staining）在显微镜下检测寄生虫。主要发现：IP+P组和P组牙齿样本中*T. tenax*和*E. gingivalis*检出率显著高于IH+PH组和PH组（*p*<0.001）；IP+P组种植体样本中两者检出率亦高于IH+PH组（*p*<0.001和*p*=0.001）；同一口腔内牙齿与种植体样本的寄生虫检出率无差异（*p*≥0.05）。多因素逻辑回归分析显示，*E. gingivalis*的存在与牙周病（IP+P组和P组）独立相关（比值比OR分别为36.16和79.23），且与牙周炎分期（Stage I-II和Stage III-IV）及分级（Grade A、B、C）均显著相关（*p*<0.001）；*T. tenax*亦与牙周炎分期和分级独立相关（*p*<0.001）。结论表明，*T. tenax*和*E. gingivalis*可能与种植体周围炎和牙周炎病变相关，且同一口腔内牙齿与种植体表面寄生虫检出率相似。该研究发表于《Clinical Oral Investigations》。

**主要技术方法**
本研究采用横断面设计，样本来源于土耳其哈塔伊穆斯塔法凯末尔大学牙科学院牙周病科（2020年1月至2022年1月招募）。关键技术方法包括：①临床牙周和种植体周围参数标准化测量（使用Williams手动牙周探针，单名校准检查者）；②菌斑样本采集（使用无菌Gracey刮匙从牙齿和种植体最深牙周袋及种植体周围袋取样，结合龈沟液/种植体周围沟液采集）；③寄生虫检测（直接显微镜检查于100×和400×镜下观察，吉姆萨染色后在1000×油镜下观察，由不知晓临床来源的寄生虫学专家完成）；④统计分析（采用Kruskal-Wallis检验、卡方检验及多因素逻辑回归分析，校正年龄、性别、BMI、吸烟、全身健康状态等混杂因素）。

**研究结果**
**人口学变量**：PH组年龄低于其他组（*p*=0.001）；BMI、性别、吸烟、全身疾病状态组间无显著差异；PH组牙科检查频率高于其他组（*p*<0.001）；IH+PH组和PH组刷牙频率高于IP+P组和P组（*p*<0.001）。
**临床牙周发现**：IP+P组和P组的全口及采样位点菌斑指数（PI）、牙龈指数（GI）、探诊出血（BOP）、探诊深度（PPD）和临床附着丧失（CAL）均显著高于IH+PH组和PH组（*p*<0.001）。P组中Stage III比例高于IP+P组（*p*=0.041），而IP+P组中Grade B比例高于P组，P组中Grade III比例高于IP+P组（*p*=0.008）。
**显微镜发现**：IP+P组和P组牙齿样本中*E. gingivalis*和*T. tenax*检出率分别为65.7%/42.9%和74.3%/57.1%，显著高于IH+PH组（8.6%/2.9%）和PH组（0%/0%）（*p*<0.001）。IP+P组种植体样本中两种寄生虫检出率（65.7%/42.9%）高于IH+PH组（14.3%/5.7%）（分别*p*<0.001和*p*=0.001）。同一口腔内牙齿与种植体样本检出率无差异（*p*≥0.05）。
**逻辑回归模型**：多因素模型显示，*E. gingivalis*检出与IP+P组（OR=36.16）和P组（OR=79.23）独立相关；PI升高（OR=1.81）及牙周炎Stage I-II（OR=9.67）、Stage III-IV（OR=24.11）及Grade A、B、C（OR分别为9.34、23.51、16.41）均增加*E. gingivalis*检出风险。*T. tenax*检出与牙周炎Stage I-II（OR=9.43）、Stage III-IV（OR=11.79）及Grade A（OR=6.61）、Grade B（OR=13.28）、Grade C（OR=13.23）显著相关。

**讨论与结论**
讨论部分指出，本研究证实了*E. gingivalis*和*T. tenax*在种植体周围炎和牙周炎病变中的检出率高于健康对照，且同一口腔内牙齿和种植体表面检出率相似，提示寄生虫可能是两种病变的核心微生物成员之一。先前研究已表明，*E. gingivalis*可通过直接接触、细胞质穿透及摄取宿主染色质抑制细胞增殖，并上调IL-8和MUC21表达；*T. tenax*可刺激促炎细胞因子（IL-8、MIF、IL-1、ICAM-1、IL-1ra）释放，参与中性粒细胞募集和骨吸收。因此，这些原生动物可能通过影响菌群失调和宿主免疫反应参与疾病发病机制。此外，甲硝唑（metronidazole）对厌氧菌和原生动物（如阴道毛滴虫、溶组织内阿米巴）有效，其在种植体周围炎和牙周炎治疗中的成功可能部分归因于对*E. gingivalis*和*T. tenax*的抑制作用。研究局限性包括横断面设计无法推断因果、缺乏PCR分子验证、未纳入种植体周围炎合并牙周健康组等。
**研究结论翻译**：在本次研究的局限性内，研究结果表明*T. tenax*和*E. gingivalis*可能与种植体周围炎和牙周炎病变相关。同一口腔内牙齿和种植体表面的寄生虫检出率相似。牙周炎的严重程度和分级与*E. gingivalis*和*T. tenax*相关。疾病部位发现的原生动物可能不直接导致这些疾病，但它们的检出可作为机会性病原体或口腔炎症的预警信号。