《Graefe's Archive for Clinical and Experimental Ophthalmology》：Corneal nerve regeneration and ocular surface restoration following treatment with autologous serum eye drops in patients with paralytic lagophthalmos and neurotrophic keratitis
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目的：研究20%自体血清眼用滴眼液（ASED）在改善麻痹性眼睑闭合不全（PL）和神经营养性角膜炎（NK）患者眼表状况及促进角膜神经再生方面的作用。方法：这项前瞻性研究纳入了11例单侧NK合并PL患者，接受20% ASED治疗2个月。眼表评估包括Schirmer
目的：研究20%自体血清眼用滴眼液（ASED）在改善麻痹性眼睑闭合不全（PL）和神经营养性角膜炎（NK）患者眼表状况及促进角膜神经再生方面的作用。方法：这项前瞻性研究纳入了11例单侧NK合并PL患者，接受20% ASED治疗2个月。眼表评估包括Schirmer I试验、非侵入性泪膜破裂时间（NIBUT）、Oxford染色评分、眼表疾病指数（OSDI）和角膜知觉测量。使用活体共聚焦显微镜（IVCM）量化角膜基底下神经丛的变化，评估角膜神经纤维长度（CNFL）、神经纤维密度（CNFD）和神经分支密度（CNBD）。比较治疗前后的数值。结果：10例患者完成了研究。ASED治疗显著改善了Schirmer I值（平均值：10.3?±?4.7 mm至19.7?±?12.1 mm；p?=?0.041）、OSDI评分（21.1?±?12.9至17.0?±?10.0；p?=?0.009）和角膜敏感性读数（中央知觉测量：3.4?±?1.9 cm至5.0?±?1.2 cm；p?=?0.005）。IVCM显示CNFL（11.1?±?6.4至14.7?±?7.3 mm/mm2；p?=?0.006）和CNFD（23.1?±?13.2至33.8?±?11.9纤维/mm2；p?=?0.012）显著增加。1例患者因眼部不适退出治疗。结论：局部应用20% ASED改善了PL和NK患者的功能性和结构性参数，提示其具有神经再生潜力。这些发现支持将ASED作为复杂性眼表疾病的一种治疗选择，并将IVCM作为监测神经恢复的有价值工具。
**论文解读：自体血清眼用滴眼液促进麻痹性眼睑闭合不全合并神经营养性角膜炎患者的角膜神经再生与眼表修复**
**研究背景与问题**
麻痹性眼睑闭合不全（Paralytic Lagophthalmos, PL）是最常见的眼睑闭合不全类型，由面神经（VII）麻痹引起，导致眼轮匝肌功能受损和眼睑不能完全闭合。病因包括创伤、感染、肿瘤浸润、医源性损伤、代谢性疾病及先天性或神经性病变。角膜是人体中神经支配最密集的组织，其神经支配来源于三叉神经眼支的长睫状神经，这些纤维形成基质神经丛后脱髓鞘，在角膜上皮下形成角膜基底下神经丛（Corneal Subbasal Nerve Plexus, CSNP）。角膜神经支配对维持上皮完整性、增殖和伤口愈合至关重要。三叉神经损伤会导致角膜敏感性降低或丧失，进而引发神经营养性角膜炎（Neurotrophic Keratitis, NK）。临床表现为点状角膜病变、溃疡、溶解、穿孔、基质瘢痕、新生血管、泪膜不稳定和眨眼反射减弱。PL导致的眼睑闭合不全与角膜神经损伤引起的角膜敏感性降低相结合，可导致严重的角膜病变，进展为角膜溃疡、穿孔和永久性视力丧失。传统治疗包括人工泪液和眼膏，以及临时性措施如睑缘缝合术、肉毒杆菌毒素诱导的上睑下垂或可移除眼睑负重物。然而，绷带式角膜接触镜常因局部干燥、机械性磨损和佩戴不佳而不适用。自体血清眼用滴眼液（Autologous Serum Eye Drops, ASED）富含多种生物活性成分，如表皮生长因子（EGF）、转化生长因子β（TGF-β）、维生素A、纤维连接蛋白、白蛋白、α-2巨球蛋白以及神经肽如P物质（Substance P, SP）和胰岛素样生长因子1（IGF-1），这些成分具有神经营养特性，可促进眼表上皮细胞增殖、迁移和分化以及神经再生。活体共聚焦显微镜（In Vivo Confocal Microscopy, IVCM）作为非侵入性高分辨率成像技术，能直接观察角膜神经，评估神经损伤并监测治疗后的再生情况。因此，研究人员开展此项研究，旨在评估ASED对PL合并NK患者眼表及CSNP的影响。
**研究方法**
本研究为单中心、前瞻性研究，在意大利罗马萨皮恩扎大学感官器官科进行，经伦理委员会批准。纳入标准：年龄≥18岁；因周围性面神经麻痹导致眼睑闭合不全≥5mm并持续至少6个月；存在角膜病变（Oxford评分>0.5）且对泪液替代物无反应或不适合治疗性角膜接触镜；OSDI评分>10；根据Mackie分类诊断为单侧1期NK（神经外科术后）。排除标准：近30天内使用局部皮质类固醇或免疫抑制剂；佩戴角膜接触镜；既往角膜手术史或角膜疾病；近6个月内眼部手术；青光眼治疗史；活动性感染或炎症；糖尿病；周围神经病变史；无法配合；血清学筛查阳性（乙肝、丙肝、梅毒、HIV）。最终纳入11例患者（6女5男，平均年龄60.0±6.1岁），其中8例（72.7%）为医源性面神经麻痹（肿瘤切除术后），3例（27.3%）为肿瘤浸润。所有患者均接受20% ASED治疗，每日6次，持续2个月。主要技术方法：1）眼表评估：包括Schirmer I试验、非侵入性泪膜破裂时间（Non-Invasive Tear Film Break-Up Time, NIBUT）使用Sirius角膜地形图仪、Oxford染色评分、眼表疾病指数（Ocular Surface Disease Index, OSDI）问卷和Cochet-Bonnet角膜知觉测量；2）活体共聚焦显微镜（IVCM）分析：使用HRT3-RCM（Rostock角膜模块）对中央角膜进行成像，通过NeuronJ半自动追踪软件分析角膜神经纤维长度（Corneal Nerve Fiber Length, CNFL）、神经纤维密度（Corneal Nerve Fiber Density, CNFD）和神经分支密度（Corneal Nerve Branch Density, CNBD）；3）ASED制备：按标准化方案，采集外周血，离心后取上清液，用平衡盐溶液稀释至20%浓度，分装后冷冻保存。所有患者在治疗前（V0）和治疗后2个月（V1）接受相同评估。
**研究结果**
**临床发现**：10例患者完成研究（1例因眼部不适退出）。治疗2个月后，Schirmer I值从治疗前平均值10.3±4.7 mm显著增加至19.7±12.1 mm（p=0.041），表明泪液分泌改善。中央角膜敏感性从3.4±1.9 cm提高至5.0±1.2 cm（p=0.005），所有象限平均敏感性从3.0±1.7 cm提高至4.7±1.2 cm（p=0.002），提示角膜知觉恢复。OSDI评分从21.1±12.9显著降低至17.0±10.0（p=0.009），Oxford染色评分从1.7±1.0降低至0.8±0.8（p=0.008），表明眼部不适和角膜上皮损伤减轻。NIBUT无明显变化（7.2±3.9 s vs 6.9±3.3 s，p=0.590）。
**活体共聚焦显微镜发现**：IVCM分析显示，CNFL从11.0±6.4 mm/mm2显著增加至14.7±7.3 mm/mm2（p=0.006），CNFD从23.1±13.2纤维/mm2增加至33.8±11.9纤维/mm2（p=0.012），提示角膜基底下神经丛结构再生。CNBD从18.8±14.1分支/mm2增加至25.0±14.1分支/mm2，但未达到统计学显著性（p=0.071）。
**相关性分析**：治疗后CNFL和CNBD与治疗前后OSDI评分呈负相关（p<0.01和p<0.05），提示神经完整性越高，主观症状越轻。治疗后CNFD与基线NIBUT呈负相关（p<0.05），表明神经纤维密度与泪膜稳定性相关。此外，基线中央角膜敏感性（CCS）和治疗后平均角膜敏感性（MCS）与治疗前后NIBUT呈正相关（p<0.05），治疗后CCS与治疗后Oxford评分呈负相关（p<0.05）。角膜敏感性与IVCM参数之间无显著相关性。
**讨论与结论**
讨论部分指出，本研究首次在PL合并NK患者中证实20% ASED不仅能改善眼表功能（泪液分泌、角膜敏感性、上皮染色和症状），还能通过IVCM观察到角膜神经结构再生（CNFL和CNFD增加），提示其神经营养潜力。这些效果可能源于血清中的生物活性成分，如神经生长因子（Nerve Growth Factor, NGF）、脑源性神经营养因子（BDNF）、胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）以及P物质，它们促进神经发芽、轴突生长和功能性恢复。研究还发现CNBD改善未达统计学意义，可能需更长时间治疗。与既往研究（如Kim等、Aggarwal等、Abazari等）的结果一致，但本研究的优势在于前瞻性设计、严格纳入标准以及同时评估功能和结构参数。局限性包括：无对照组（因疾病罕见难以匹配）、样本量小、随访时间短、IVCM视野限制及无法精确重复同一位置。未来需更大规模、更长随访的对照研究验证。
**研究结论**：本研究强调了20% ASED在PL合并NK患者中促进角膜神经再生、增强角膜敏感性及恢复眼表健康的潜力。这些发现支持ASED作为复杂性眼表疾病的神经再生和营养性治疗选择。更大规模、长期的研究将有助于确认这些结果并优化治疗方案。整合IVCM等先进影像工具可能进一步支持个体化治疗并改善神经营养性眼病的预后。（原文结论：In conclusion, this study highlights the potential of 20% ASED to promote corneal nerve regeneration, enhance corneal sensitivity, and restore ocular surface health in patients with PL and NK. These findings support the neurotrophic and regenerative properties of ASED as a promising therapeutic option for complex ocular surface diseases. Larger, long-term studies are warranted to confirm these results and optimize treatment protocols. The integration of advanced imaging tools, such as IVCM, may further support personalized approaches and improve outcomes in neurotrophic ocular conditions.）
