通过优化培养条件提高三棱孢霉中重组eGFP的分泌量

《Microbial Cell Factories》：Enhancing recombinant eGFP secretion in P. tricornutum by optimizing culture conditions

　　

摘要

Phaeodactylum tricornutum是用于生产包括抗体在内的重组治疗性蛋白的极具潜力的候选物种。然而，目前较低的分泌产量仍是其应用于制药领域的重大瓶颈。为提高分泌型重组蛋白的产量，本研究在实验室条件下探讨了优化环境和营养参数的方法，旨在在硝酸盐还原酶启动子（P_NR）的调控下，最大化模型分泌型重组蛋白（eGFPsec）的产量。我们分析了在天然海水和人工海水环境中，硝酸盐浓度、光合光子通量密度（PPFD）以及pH值之间的相互作用。研究结果表明，当硝酸盐浓度未超过临界值时，P_NR的活性并不会随浓度上升而增加；但当PPFD为150 μmol光子m^??2 s^??1时，能显著提升培养基中eGFPsec的积累量。有趣的是，在pH值被调控在8的水平下于天然海水中培养的菌株，其分泌的eGFP荧光强度明显高于在人工海水中培养的菌株。这些发现强调了优化关键环境和营养参数对于提高重组蛋白分泌产量的重要性。通过确定影响培养基中eGFP荧光强度及积累量的关键因素，本研究为工艺优化提供了实用的建议，进一步证明了P. tricornutum作为工业微藻生物制造领域中一种高效且经济实用的平台的巨大潜力。