《TAXON》：Reconciling morphological and molecular approaches: The integrative taxonomy of Leucobryum (Leucobryaceae) in the Malagasy region
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白藓属（Leucobryum）（白藓科）是藓类植物（Bryophyta）的一个属，在非洲，特别是西印度洋地区的研究很少。本研究整合了形态学和分子数据，以修订该属在该地区的分类学。研究人员对藏于隐花植物标本馆（Herbier de Cryptogamie, PC
白藓属（Leucobryum）（白藓科）是藓类植物（Bryophyta）的一个属，在非洲，特别是西印度洋地区的研究很少。本研究整合了形态学和分子数据，以修订该属在该地区的分类学。研究人员对藏于隐花植物标本馆（Herbier de Cryptogamie, PC, MNHN, Paris）的模式标本以及1994年至2019年间采集的野外标本进行了形态学分析，识别出10个不同的形态学聚类。获得了三个条形码标记的序列数据，并采用了多种物种界定方法。基于距离的方法（ASAP）和基于树的溯祖模型（bPTP, GMYC）被用于推断物种边界。在综合分类学框架内，同种性矩阵（Conspecificity Matrices, CoMa）决策工具支持共识别出10个物种：9个界定良好的物种（L. acutifolium, L. boivinianum, L. boryanum, L. cambouei, L. cucullatum, L. galinonii, L. madagassum, L. parvulum, L. perrotii），以及L. comorense，该种与L. isleanum, L. mayottense和L. sanctae-mariae几乎没有形态和分子分化，支持将它们合并为同物异名。白藓属在分类学上仍然具有挑战性，并突显了在非洲大陆也需要开展类似的综合方法。
**论文解读：马达加斯加地区白藓属（Leucobryaceae）的综合分类学修订**
**研究背景与问题**
传统苔藓分类学长期依赖形态学和解剖学特征，但这种方法存在明显局限：表型可塑性、种内变异以及隐存种（cryptic species）常导致鉴定错误，关键诊断特征缺失时尤为困难。白藓属（Leucobryum）作为藓类植物（Bryophyta）的一个属，其形态简单且多变，叶片几乎全由透明细胞（leucocytes）和含叶绿体的菱形细胞（chlorocysts）构成，种间和种内多态性显著，即使同一植株不同部位也存在变异。该属在非洲，尤其是西印度洋区域（包括马达加斯加、科摩罗群岛、留尼汪和毛里求斯）的研究严重不足。尽管早期Cardot（1904）基于形态学描述了12种，后续Marline等（2022）记录19个种及种下单元，但自Cardot以来未进行过现代修订。该区域生物多样性极高，但白藓属的物种界定（species delimitation）问题突出，诊断性状常连续或重叠，形态可塑性大。因此，研究人员开展本研究，旨在整合形态学和分子数据，修订该区域白藓属的分类学，并评估哪些配子体形态解剖特征能可靠区分物种。论文发表在《TAXON》。
**主要技术方法**
研究人员采用以下关键技术：形态学分析（体视显微镜观察、叶片横切解剖、多变量分析如主成分分析PCA和混合数据因子分析FAMD，以及置换多元方差分析PERMANOVA）；分子条形码（三个标记：叶绿体rps4编码基因、trnL-F非编码区、核糖体ITS2间隔区，对78份近期标本进行Sanger或Illumina测序）；分子物种界定方法（距离法ASAP、基于树的bPTP和GMYC，利用贝叶斯推断构建系统树）；整合决策工具同种性矩阵（CoMa）。样本来源涵盖马达加斯加、留尼汪岛、科摩罗群岛等，标本藏于巴黎植物标本馆（PC）、密苏里植物园标本馆（MO）和匈牙利自然历史博物馆（BP），时间跨度1994–2024年。
**研究结果**
**从形态解剖观察到初级物种假说**
通过FAMD对8个定量和10个定性性状进行分析，第一维度（28.5%方差）主要反映配子体长度、叶片大小及背腹透明细胞尺寸，第二维度（17.1%）主要受尖头（apiculus）形状影响。叶翼细胞层数和透明细胞层数贡献较小。尖头形状和翼部规则性等性状此前未被报道为诊断特征。PERMANOVA证实组间差异显著（F=76.37, R2=0.89, p=0.001）。聚类结果对应单一原始物种或缺乏一致形态差异的类群。包含模式标本后，共识别出10个初级物种假说（primary species hypothesis, PSH）：L. acutifolium、L. boivinianum、L. boryanum、L. cambouei、L. comorense（包含L. isleanum、L. mayottense、L. sanctae-mariae）、L. cucullatum、L. galinonii、L. madagassum（包含L. pseudomadagassum）、L. parvulum、L. perrotii。其中L. boivinianum与L. heterodictyon因大小连续而合并，L. madagassum与L. pseudomadagassum无法区分。
**分子物种界定**
对78份标本获得ITS2（64条）、rps4（70条）、trnL-F（62条）序列，其中41份三个标记均成功。ITS2变异最大（配对一致性81.9%，一致位点36.5%），而rps4和trnL-F高度保守（一致位点均94.8%）。各标记独立进行ASAP、bPTP和GMYC分析。基于ITS2的ASAP评分9.5识别出9个分子物种，与PSH完全对应；ASAP评分4.0则识别13个。bPTP和GMYC（恒定溯祖模型，严格分子钟）结果与ASAP高度一致，但GMYC对trnL-F标记产生22个物种的过度分裂。CoMa整合后，ITS2共识别出7个群和2个单系，对应9个分子物种。主要差异在于L. comorense多物种复合体（MSC）和L. acutifolium：除ITS2的ASAP和GMYC外，其他分析均将L. acutifolium归入L. comorense MSC；而L. comorense MSC内部（包括L. comorense、L. isleanum、L. mayottense、L. sanctae-mariae）在所有分子标记中始终作为一个单一谱系，仅个别分析将其分为两个亚群，但无形态支持。
**讨论与结论**
讨论部分强调，综合方法有效解决了白藓属的分类难题。L. cambouei、L. cucullatum、L. galinonii、L. perrotii在所有分析中均被一致界定；L. boryanum除trnL-F外均独立；L. madagassum与L. pseudomadagassum、L. boivinianum与L. heterodictyon的形态重叠和遗传一致支持各自合并；L. acutifolium仅靠ITS2区分，但形态差异支持其种级地位；L. comorense MSC因缺乏形态和分子分化而视为单一物种。研究还指出，尖端和透明细胞相关特征（尖头形状、透明细胞层数、背腹透明细胞相对大小）是最稳定的诊断性状，而茎横切面、气孔大小等因变异过大不可靠。ITS2因其高变异性和跨方法一致性，被推荐为白藓属物种界定的核心标记。研究最终接受10个物种，其中9个基于形态-分子综合证据，L. parvulum仅基于形态学。将L. heterodictyon、L. isleanum、L. mayottense、L. pseudomadagassum和L. sanctae-mariae处理为异名，使该区域白藓属分类单元从19个减少至10个。研究结论指出，该区域白藓属多样性低于先前估计，综合方法为苔藓分类提供了可重复的框架，并强调未来需在非洲大陆开展类似研究，并扩大采样范围以揭示潜在隐存多样性。
