甲基化寡核苷酸与WPC微囊化寡核苷酸在通过基因沉默控制 Dahlia 黄萎病方面的效果比较

《Scientific Reports》：Comparative efficacy of methylated and WPC-microencapsulated OligoDNAs for controlling Verticillium dahliae through gene silencing

　　

摘要

合成寡核苷酸在控制真菌病害方面的实际应用受到其难以有效进入真菌细胞的限制。本研究评估了两种增强递送效率的策略——化学甲基化处理和乳清蛋白浓缩物微囊包封技术——旨在提升针对Verticillium dahliae物种中由植物miRNAs miR166和miR159调控的Clp-1及HiC-15基因的寡核苷酸的抗真菌效果。物理化学分析表明，这些寡核苷酸已被成功封装在稳定的球形乳清蛋白浓缩物微囊中，微囊直径约为0.2–0.36微米。荧光显微镜观察显示，经Cy3标记的寡核苷酸会与真菌菌丝结合，产生离散的荧光点，这可能表明它们与真菌结构存在局部结合。然而，由于成像方法的局限性，目前还无法确定这些寡核苷酸是否真正进入了真菌细胞内部，需要更高分辨率的成像技术来进一步验证。两种递送策略均在体外显著降低了目标基因的表达水平，其中微囊包封处理的降表达效果优于甲基化处理（p?p?