LncRNA KIAA0125通过miR-4640-5p/KCNQ1轴促进Kasumi-1细胞的增殖，同时引起Wnt/β-catenin信号通路的相应变化

《Scientific Reports》：LncRNA KIAA0125 promotes the proliferation of Kasumi-1 cells through the miR-4640-5p/KCNQ1 axis with associated changes in the Wnt/β-catenin signaling pathway

　　

摘要

本研究旨在探讨长非编码RNA（lncRNA）KIAA0125对人类急性髓系白血病M2亚型细胞系Kasumi-1的增殖和凋亡的影响。研究采用重组慢病毒技术和CRISPR/Cas9-SAM技术，分别构建出lncKIAA0125表达下调和过表达的Kasumi-1细胞。通过细胞计数试剂盒-8（CCK-8）检测各组细胞的增殖率，利用流式细胞术测定细胞凋亡率。随后通过RIP实验和双荧光素酶实验验证miR-4640-5p与lncKIAA0125以及miR-4640-5p与KCNQ1之间的结合关系。Western blotting技术用于检测各组中与Wnt/β-catenin信号通路相关的蛋白质，同时通过 rescue实验确认lncKIAA0125/miR-4640-5p/KCNQ1轴在Kasumi-1细胞中的作用。最后建立皮下异种移植肿瘤模型，以验证lncKIAA0125在体内对Kasumi-1细胞生长的影响。结果显示，lncKIAA0125表达下调会抑制Kasumi-1细胞的增殖并促进其凋亡，而表达上调则会对细胞增殖产生相反作用。RIP和双荧光素酶实验证实lncKIAA0125可直接与miR-4640-5p结合，且miR-4640-5p也能与KCNQ1结合。此外，lncKIAA0125表达下调会在mRNA和蛋白质水平上抑制KCNQ1的表达，进而减弱与Wnt/β-catenin信号通路相关的信号传导，反之，表达上调则会产生相反效应。体内实验表明，下调lncKIAA0125的表达可抑制裸鼠体内Kasumi-1细胞的增殖。lncKIAA0125在AML细胞中高表达，似乎通过miR-4640-5p/KCNQ1轴促进Kasumi-1细胞的增殖，同时还与Wnt/β-catenin信号通路的变化有关。