通过基因敲除淋巴细胞系中的CD25，建立由白细胞介素-2β/γ受体介导的刺激模型

《Scientific Reports》：CD25 genetic ablation on lymphoid cell lines to obtain models of stimulation through the Interleukin-2 beta/gamma receptor

　　

摘要

白细胞介素-2（IL-2）在免疫系统中具有多种功能作用。其功能的多样性取决于其与免疫细胞亚群上差异表达的各种受体亚基之间的相互作用。调节性T细胞（Tregs）与效应淋巴细胞之间的平衡决定了免疫反应的结果。调节性T细胞持续表达由α亚基（也称为CD25）、β亚基和γ亚基组成的三聚体IL-2受体，而静息状态和记忆状态的CD8+ T细胞则表达二聚体β/γ受体。通过三聚体受体进行的IL-2信号传导作用通常在体外使用小鼠CTLL-2或人类Kit225淋巴细胞系进行研究。我们通过CRISPR/Cas9技术敲除CTLL-2和Kit225细胞中的CD25基因表达，获得了具有二聚体β/γ受体的IL-2反应性细胞模型。通过增殖实验以及检测一系列IL-2衍生的重组突变蛋白，包括激动剂、超激动剂和拮抗剂，证明了这些稳定生成的CD25-KO细胞系的实用性。同时，也分析了这类实验中可能存在的问题及解决方法，并进行了基于KO细胞系的Stat5磷酸化检测。这些细胞模型以及在使用过程中积累的经验，有助于评估不同实验室开发的IL-2工程策略的成效。