《Parasitology International》：First detection of a Haemoproteus macrovacuolatus-like parasite in two captive birds of the order Anseriformes: Evidence of atypical morphology
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血孢子虫（Haemosporidians）是媒介传播的寄生虫，感染脊椎动物，常在圈养鸟类中检测到，引起从轻微到严重的感染，可能致命，尤其是涉及疟原虫（Plasmodium）和血变原虫（Haemoproteus）物种的感染。本研究分析了17只雁形目（Anseri
血孢子虫（Haemosporidians）是媒介传播的寄生虫，感染脊椎动物，常在圈养鸟类中检测到，引起从轻微到严重的感染，可能致命，尤其是涉及疟原虫（Plasmodium）和血变原虫（Haemoproteus）物种的感染。本研究分析了17只雁形目（Anseriformes）鸟类的血液样本，包括15只圈养的红鸭（Tadorna ferruginea）和两只黑颈天鹅（Cygnus melancoryphus）。研究人员采用综合方法在每种物种的一只雌性中检测到血变原虫感染，基于线粒体细胞色素b（cytb）基因的478 bp片段，其基因序列与巨大空泡血变原虫（Haemoproteus macrovacuolatus）具有100%相似性。然而，在这些鸟类中观察到的形态与该寄生虫的原始描述略有不同，特别是缺乏大空泡，而大空泡被认为是该物种的特征。结合分子发现，这种形态差异支持将检测到的寄生虫解释为H. macrovacuolatus-like谱系，并强调了综合分类学对于准确鉴定血孢子虫的重要性，特别是在新报告的鸟类宿主中检测到感染时。传统的诊断和物种界定标准可能因宿主相关因素、生理条件和宿主-寄生虫相互作用而变化，这些因素都可能导致这些寄生虫的形态变异。
血孢子虫（Haemosporidians）是媒介传播的寄生虫，在圈养鸟类中常见，尤其以疟原虫（Plasmodium）和血变原虫（Haemoproteus）属感染最为严重，可导致多系统病变甚至死亡。准确鉴定这些寄生虫物种对理解其生态影响至关重要，但传统形态学标准常因宿主因素而变异，需结合分子数据进行综合分类学（integrative taxonomy）分析。巨大空泡血变原虫（Haemoproteus macrovacuolatus）原描述于绿头鸭（Cairina moschata），其配子体具有特征性大空泡。然而，在圈养环境中，新宿主红鸭（Tadorna ferruginea）和黑颈天鹅（Cygnus melancoryphus）中检测到的类似寄生虫是否严格符合该物种形态尚不明确，这促使研究人员开展本研究以明确其身份并探讨宿主相关形态变异。该论文发表在《Parasitology International》。
研究人员在巴西贝洛奥里藏特动物园（Belo Horizonte Zoo）于2023年6月至2024年10月期间，对15只红鸭和2只黑颈天鹅（共17只雁形目鸟类）进行血液采样。关键方法包括：1）血液涂片光学显微镜检查（Giemsa染色，1000倍放大，形态测量及寄生虫血症估算）；2）巢式PCR扩增线粒体细胞色素b（cytb）基因478 bp片段，并进行Sanger测序；3）基于Kimura 2-参数模型计算遗传距离，并利用贝叶斯推断（Bayesian inference）构建系统发育树；4）统计比较感染与未感染红细胞的形态参数（t检验或Wilcoxon检验）。样本来源为圈养个体，未涉及野外采样或质粒构建。
**3.1 显微镜表征**：通过光学显微镜观察，在每物种各一只雌性个体中检测到配子体，其形态与H. macrovacuolatus原始描述一致，具有不环绕红细胞核的发育模式、致密的巨配子体核以及不规则分布的疟色素。形态测量参数（如长度、宽度、面积）与原始描述无显著差异。然而，在巨配子体和微配子体中均未观察到该物种的诊断性特征——大空泡。感染红鸭的寄生虫血症为0.02%（两次采样一致），而黑颈天鹅初次采样为0.28%，经多西环素治疗后降至0.03%。红鸭感染个体的异嗜性粒细胞/淋巴细胞（H:L）比值为9.3，显著高于未感染个体（0.22–1.00）；黑颈天鹅的H:L比值从0.16降至0.04。该结果通过形态学证据支持寄生虫为H. macrovacuolatus-like谱系，并提示空泡缺失可能源于宿主因素。
**3.2 分子和系统发育结果**：来自红鸭和黑颈天鹅的两条序列（PX971593和PZ284967）在cytb片段上与H. macrovacuolatus（KJ175078）具有100%相似性，遗传距离为0.00。系统发育分析显示，它们与来自哥伦比亚绿头鸭的Haemoproteus gabaldoni-like谱系（OL456193）聚为一支（后验概率=1.00），并与H. macrovacuolatus形成姐妹群。与其他Haemoproteus谱系的遗传距离为1%–9%。该结果结合形态学数据，确认了该寄生虫为H. macrovacuolatus-like谱系，并强调单一分子标记可能无法捕获细微的遗传变异。
讨论部分指出，空泡缺失可能源于宿主免疫状态、年龄、性别等生理因素，或制片过程中结晶样物质的溶解，提示该形态特征作为分类标准的局限性。研究还强调，该谱系在红鸭（亚洲至欧洲的迁徙物种）和黑颈天鹅（南美迁徙物种）中的检测，扩展了其已知宿主范围，并可能通过迁徙行为传播病原体。尽管圈养环境可能支持本地传播，但尚无法确认致病性，因为红鸭的死亡与关节炎有关，黑颈天鹅的呼吸道症状在多西环素治疗后缓解。研究结论部分翻译如下：基于这些发现，研究人员得出结论，尽管标准PCR方案和Sanger测序被广泛用作参考技术，但它们可能不足以检测密切相关的遗传谱系；在此背景下，显微镜分析仍然是重要的补充工具，能够检测不同的形态型，识别潜在易感宿主，并有助于更好地理解血孢子虫寄生虫的形态变异。
