二至天癸方通过Nrf2/HO-1信号通路增强抗氧化防御，从而延缓卵巢衰老

《Journal of Ovarian Research》：Erzhi Tiangui formula ameliorates ovarian aging by enhancing antioxidant defense via Nrf2/HO-1 signaling

　　

摘要

目的

本研究旨在探讨益智调桂方通过Nrf2/HO-1抗氧化通路缓解小鼠年龄相关卵巢衰老的机制。

方法

共100只C57BL/6J小鼠被分为年轻对照组（YC，6–8周龄，n?=?20）和老年组（8–9月龄，n?=?80）。老年小鼠进一步随机分为四组：对照组、低剂量组（0.05克/毫升）、中剂量组（0.2克/毫升）和高剂量组（0.8克/毫升）（每组n?=?20）。治疗10天后，检测小鼠卵巢形态及卵泡数量。第11天，剩余小鼠接受人绝经促性腺激素腹腔注射（15国际单位），48小时后再注射人绒毛膜促性腺激素（12国际单位）。在注射hCG 14小时后，这些小鼠在深度麻醉状态下通过颈椎脱位处死，随后收集颗粒细胞。研究检测了以下指标：氧化应激标志物（ROS）、Nrf2/HO-1通路相关蛋白（Nrf2、HO-1、Keap1）、细胞凋亡相关因子（Bax、Bcl-2、裂解型Caspase-3）、抗氧化酶（SOD、CAT、GPX1）以及线粒体功能（线粒体膜电位、MMP、ATP）。在体外实验中，KGN人类颗粒细胞在含或不含含益智调桂方血清的条件下暴露于H?O?诱导的氧化应激环境中，同时通过siRNA敲低Nrf2以验证通路的特异性。

结果

益智调桂方处理能以剂量依赖的方式显著改善多项指标。经过处理的小鼠发情周期恢复，卵泡发育增强，卵泡萎缩现象减轻。在细胞层面，该方可有效减少ROS积累，同时上调SOD、CAT和GPX1等抗氧化酶的表达。分子分析显示Nrf2/HO-1信号通路被激活，表现为Nrf2和HO-1表达上升，而Keap1表达下降。此外，益智调桂方还具有抗细胞凋亡作用，表现为Bcl-2表达升高，而Bax和裂解型Caspase-3表达降低。线粒体功能检测结果显示，该方能显著提升颗粒细胞的MMP活性和ATP生成量。值得注意的是，在所有检测指标上，中剂量组和高剂量组的表现始终优于低剂量组，进一步证实了明显的剂量效应关系。

结论

益智调桂方通过协同激活Nrf2/HO-1通路，以剂量依赖的方式增强抗氧化防御能力、抑制细胞凋亡并恢复线粒体功能，从而减轻卵巢衰老。这些研究结果为益智调桂方作为治疗年龄相关卵巢功能衰退疾病的潜在疗法提供了机制上的依据。

临床试验编号

无。