《Molecular Therapy》：A Singular Base Editing Platform for Polyfunctional Multiplex Engineering of Immune Cells
编辑推荐：
摘要目前用于构建抗原特异性受体的方法依赖于随机整合载体或通过双链断裂实现的目标整合，这两种方法都存在安全风险。为打造一种可同时实现多重基因敲除和敲入的一体化工具，我们利用碱基编辑器中的切口酶活性来促进同源定向修复，并将具有临床应用价值的嵌合抗原受体插入特定基因位点。通过创新的sg
摘要
目前用于构建抗原特异性受体的方法依赖于随机整合载体或通过双链断裂实现的目标整合，这两种方法都存在安全风险。为打造一种可同时实现多重基因敲除和敲入的一体化工具，我们利用碱基编辑器中的切口酶活性来促进同源定向修复，并将具有临床应用价值的嵌合抗原受体插入特定基因位点。通过创新的sgRNA设计策略以及重组腺相关病毒携带的DNA模板，我们提高了ABE8e介导的同源定向修复在人类T细胞中的效率。通过将针对CD19、CD33或间皮素的嵌合抗原受体与超过95%的四重基因敲除（B2M/CD3ε/PDCD1/CISH）相结合，我们得以一步生成功能更强的现成CAR T细胞产品。重要的是，我们未检测到任何转位现象或显著的脱靶编辑，且该技术在对多种癌症细胞系以及3D球状培养模型中均显示出良好的疗效。这种被称为“迭代切割实现T细胞同步工程重编程”（INSERT）的高效工程化方法，为先进的CAR T细胞治疗提供了安全且简化的平台。
Joseph G. Skeate|Nicholas J. Slipek|Walker S. Lahr|Shambojit Roy|Bryce J. Wick|Bibekananda Kar|Jae-Woong Chang|Erin M. Stelljes|Alexandria K. Gilkey|Prateek P. Thenge|Miechaleen D. Diers|Joshua B. Krueger|Ethan M. Niemeyer|Cara-lin Lonetree|Mitchell G. Kluesner|Jason B. Bell|Kendell Clement|Paolo P. Provenzano|Branden S. Moriarity|Beau R. Webber
美国明尼苏达州明尼阿波利斯市明尼苏达大学儿科系
