达非那新在T细胞急性淋巴细胞白血病治疗中的应用评估：对非神经元胆碱能系统及溶酶体组织蛋白酶的选择性靶向作用

《International Journal of Molecular Sciences》：Evaluation of Darifenacin for T-Cell Acute Lymphoblastic Leukemia: Selective Targeting of the Non-Neuronal Cholinergic System and Lysosomal Cathepsins

　　

摘要

T细胞急性淋巴细胞白血病（T-ALL）是一种侵袭性较强的血液系统恶性肿瘤，需要新的治疗靶点以及具有低全身毒性的选择性再利用药物。在此，我们在相同条件下评估了临床已获批的M3型毒蕈碱受体拮抗剂达菲芬辛（DF）对Jurkat和MOLT-4 T-ALL细胞以及正常人T淋巴细胞的作用。达菲芬辛可产生浓度依赖性的选择性细胞毒性，其IC₅₀值分别为26.7 ± 1.07 μM（Jurkat细胞）和30.5 ± 1.54 μM（MOLT-4细胞），而正常T淋巴细胞的IC₅₀值则为197.9 ± 1.29 μM，这意味着该药物存在6.5–7.4倍的治疗窗口。从机制上来看，达菲芬辛能降低M3受体和胆碱乙酰转移酶的表达，同时提高乙酰胆碱酯酶的活性。多项检测结果均表明，这种细胞毒性是由线粒体内在凋亡途径的激活所导致的，具体表现为Bax蛋白水平上升、Bcl-2蛋白水平下降，以及凋亡执行者caspase-3蛋白被切割。此外，达菲芬辛还会通过甲基乙二醛和晚期糖基化终产物的积累引发糖化应激，并选择性抑制溶酶体中的组织蛋白酶B和C。分子对接分析显示，该药物能够很好地与这些蛋白酶的催化腔结合。这些研究结果表明，达菲芬辛可通过干扰胆碱能信号传导、引发糖化应激、抑制组织蛋白酶以及触发细胞凋亡等方式，发挥选择性的抗白血病作用。因此，达菲芬辛有望成为用于T-ALL治疗的多种靶点药物再利用的理想候选药物。