一种通过实验优化用于从上皮性卵巢癌中生成患者来源类器官的工作流程

《Scientific Reports》：An empirically refined workflow for generating patient-derived organoids from epithelial ovarian cancer

　　

摘要

患者来源的类器官可以再现原始肿瘤的某些特征，为在三维培养环境中研究上皮性卵巢癌提供了有效的工具。不过，用于生成上皮性卵巢癌类器官的培养方案尚未标准化。因此，我们通过实验优化了培养条件和培养基成分，最终在连续5次尝试中均成功建立了上皮性卵巢癌类器官。研究使用了来自29名患者和8名患者的组织及腹水样本，并采用了注射器挤压法制备的类器官基底膜提取物培养技术。通过两两比较，分析了类器官与患者对应肿瘤组织在细胞形态、标志物表达以及可检测的差异方面的相似之处。优化后的培养方案采用了含有重组人R-Spondin 1蛋白（250 ng/mL）、Noggin和NRG1的培养基，这些因子有助于类器官的维持与增殖。最终，有31株上皮性卵巢癌类器官从29份组织样本中的82.8%（24/29）和8份腹水样本中的87.5%（7/8）中成功生成。与表面附着法相比，SOBA技术使10天内的类器官生成率提高了2.75倍（p?<?0.0001）。这种经过优化的培养方案可根据具体实验需求进行调整，但还需要在更多、更具临床多样性的上皮性卵巢癌样本中进行进一步验证。