海洋海绵相关真菌Amesia atrobrunnea菌株AF5对多重耐药革兰氏阳性细菌的抗菌潜力

《Archives of Microbiology》：Antibacterial potential of marine sponge-associated fungus Amesia atrobrunnea strain AF5 against multidrug-resistant Gram-positive bacteria

　　

摘要

为应对日益严重的抗菌药物耐药性病原体问题，本研究旨在探索海洋相关真菌作为产生具有抗多重耐药菌活性的抗菌代谢物的来源。从印度古吉拉特邦纳拉拉礁地区采集的5份不同海洋样本中分离出了10种不同的真菌，随后评估了它们对多种细菌病原体的抑制作用。在这10个分离株中，与海绵相关的真菌菌株AF5对7种革兰氏阳性细菌病原体表现出强烈的抑制作用，包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐万古霉素粪肠球菌（VRE）。然而，对于所检测的革兰氏阴性细菌病原体，则未观察到明显的抑制作用。通过基于内部转录间隔区序列、大亚基以及β-微管蛋白基因的形态学、分子学和系统发育分析，确定该真菌分离株AF5为Amesia atrobrunnea。优化实验表明，在测试的4种培养基中，马铃薯葡萄糖肉汤和Czapek酵母提取物肉汤能促进最高的抗生素产量，经过16天培养后，其抑菌圈分别为24.62±1.2毫米和24.84±0.5毫米。在所测试的溶剂中，氯仿的提取效率最高，能够形成最大的抑菌圈（24.12±0.3毫米），提取率为2.814±0.641毫克/克。粗制氯仿提取物也显示出显著的抗菌活性，其对耐多重耐药金黄色葡萄球菌的抑菌圈为15.00±0.00毫米，对耐多重耐药粪肠球菌的抑菌圈为9.00±1.00毫米。此外，该提取物在最低浓度下对MRSA就表现出较强的抗菌活性，其最小抑菌浓度为3.90微克/毫升，最低杀菌浓度为7.81微克/毫升；对VRE则表现为中等活性，其最小抑菌浓度和最低杀菌浓度均为31.25微克/毫升。进一步通过对具有生物活性的TLC组分C3和C4进行GC–MS分析，发现2,4-二叔丁基酚、三(2,4-二叔丁基苯)磷酸酯以及7,9-二叔丁基-1-氧代螺[4,5]十环-6,9-二烯-2,8-二酮是可能与上述抗菌活性相关的主要化合物。据我们所知，这是首次报道从海洋中分离出的Amesia atrobrunnea菌株（AF5）能够产生具有强抗菌活性的生物活性代谢物，可有效对抗革兰氏阳性多重耐药菌。