《Frontiers in Immunology》：The “two flowers therapy”: clinical efficacy and mechanisms of a total glucosides of paeony -colchicine dual-drugs for Beh?et’s disease derived from Chinese physicians’ medication experience
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目的：阐明在中国应用逾30年的白塞病（Beh?et’s disease, BD）治疗方案“双花疗法”——即白芍总苷（Total Glucosides of Paeony, TGP）-秋水仙碱（colchicine）联合用药——对伴黏膜皮肤受累BD的协同机制及其
目的：阐明在中国应用逾30年的白塞病（Beh?et’s disease, BD）治疗方案“双花疗法”——即白芍总苷（Total Glucosides of Paeony, TGP）-秋水仙碱（colchicine）联合用药——对伴黏膜皮肤受累BD的协同机制及其疗效与安全性。方法：研究人员开展了一项整合计算生物学的回顾性临床队列研究。筛选了5个生物活性成分（其中4个来自TGP，1个为秋水仙碱）；通过多组学鉴定出31个重叠的BD相关靶点，最终确认6个核心基因。将355例BD患者分为联合组（Combination group, CG, n=231）和单药组（Monotherapy group, MG, n=124）。结果：TGP的4个活性成分（氧化芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷、芍药苷）与秋水仙碱构成5种生物活性化合物。从GeneCards检索到837个BD相关靶点，获得5种化合物与BD间的31个重叠靶点。构建含31个节点、197条边的蛋白-蛋白互作（Protein-protein interaction, PPI）网络，识别出核心靶点（MMP9、ICAM1、FGF2、TLR4、EGFR、NOS3）。分子对接证实其高亲和力：秋水仙碱与EGFR、ICAM1、NOS3形成氢键（2.2–3.4 ?）并与TLR4发生疏水相互作用；TGP成分与EGFR、FGF2、MMP9形成2–4个氢键（2.2–3.9 ?）。基因本体（Gene Ontology, GO）分析涉及炎症及免疫相关生物学过程；京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG）鉴定出10条富集通路（包括脂质与动脉粥样硬化、AGE-RAGE等），调控炎症、免疫及血管功能。临床上，CG在早期（M1–M2）疗效更优：口腔溃疡患病率M1为0.0% vs. 21.0%，M2为0.0% vs. 100.0%；生殖器溃疡患病率M1为0.9% vs. 6.5%（均p<0.05）。两组自M3起均实现溃疡完全消退。CG在M2红细胞沉降率（Erythrocyte sedimentation rate, ESR）显著更低（p<0.001），C反应蛋白（C-reactive protein, CRP）无差异。CG出现短暂腹泻；两组均未报告药物相关血细胞减少。结论：在中国应用逾30年的TGP联合秋水仙碱方案，通过调节核心靶点与炎症通路对BD发挥治疗作用。临床上，该方案更有效控BD患者早期黏膜皮肤病变复发，具良好长期疗效与安全性。
该研究发表于《Frontiers in Immunology》。白塞病（Beh?et’s disease, BD）是一种以血管受累为突出表现的变异性血管炎及慢性炎性疾病，具有高度异质性多器官损害特征，复发性痛性口腔黏膜溃疡、生殖器溃疡及葡萄膜炎是其经典表现，其中黏膜皮肤病变最普遍且显著损害患者生活质量。目前国际指南推荐秋水仙碱（colchicine）作为BD黏膜皮肤受累的一线药物，但其单药治疗存在部分患者应答不全、耐药或胃肠道不耐受等不良反应，且尚无普适标准化方案，临床管理依赖个体化。中国临床实践中基于传统中药经验发展出白芍总苷（Total Glucosides of Paeony, TGP，提取自芍药Paeonia lactiflora Pall.根的主要生物活性成分，含氧化芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷、芍药苷等单萜苷类）联合秋水仙碱的“双花疗法”（Shuang-hua Therapy，因两药均源自开花植物而得名），已口头传承并广泛应用逾30年，但缺乏高质量临床证据及明确的分子机制探讨。为此，研究人员开展回顾性临床队列结合计算生物学研究，系统评估该联合方案对伴黏膜皮肤受累BD患者的疗效与安全性，并利用网络多组学技术探索其潜在机制。
研究人员开展研究用到的主要关键技术方法包括：基于传统中药系统药理学数据库与分析平台（Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform, TCMSP）及文献筛选TGP活性成分与秋水仙碱，利用Swiss Target Prediction预测成分靶点，从GeneCards收集BD相关靶点并通过Gene Denovo平台取交集；借助STRING平台构建蛋白-蛋白互作（Protein-protein interaction, PPI）网络并在Cytoscape中可视化，基于基因表达综合数据库（Gene Expression Omnibus, GEO）系列GSE209567分析差异表达基因以确定核心靶点；采用AutoDock Vina进行分子对接验证配体与受体结合；利用Microbioinformatics平台进行基因本体（Gene Ontology, GO）与京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG）通路富集分析；临床方面纳入355例新诊断伴黏膜皮肤受累BD患者（联合组CG n=231，单药组MG n=124，分组依据患者意愿与医师判断非严格随机），进行12个月随访观察疗效及安全性指标（黏膜皮损复发率、ESR、CRP及不良事件等）并用IBM SPSS Statistics 26.0进行统计分析。
研究结果如下：
3.1 机制结果（Mechanism result）。3.1.1 TGP与秋水仙碱治疗BD的活性成分及靶蛋白筛选（Screening for active components and target proteins of TGP and colchicine in treatment of BD）：研究人员从TCMSP及文献筛选出TGP的氧化芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷、芍药苷及秋水仙碱，从GeneCards收集837个BD靶点，获得31个TGP、秋水仙碱与BD的重叠靶点并导入Cytoscape构建同心圆图。3.1.2 PPI网络构建与核心靶点（Construction of PPI network and core targets）：将31个重叠靶点与5种化合物输入STRING数据库构建含31节点197边（平均节点度12.7）的PPI网络；基于GEO数据库GSE209567分析最终选定6个核心基因（MMP9、ICAM1、FGF2、TLR4、EGFR、NOS3），在Cytoscape中按Degree法排序可视化，最高值为5对应MMP9、ICAM1、FGF2、TLR4，最低值4对应EGFR、NOS3。3.1.3 TGP与秋水仙碱治疗BD候选靶点验证（Validation of candidate TGP and colchicine targets in treating BD）：分子对接显示秋水仙碱与EGFR(1M14)的LYS-721、CYS-773形成2个氢键（2.2、2.4 ?），与ICAM1(1IAM)的THR-85、ARG-13形成3个氢键（2.3、2.8、3.4 ?），与NOS3(1M9J)的VAL-185、GLY-186、GLN-247形成3个氢键（2.9、3.3、3.1 ?），与TLR4(5NAM)通过LEU-28、VAL-29、PHE-32、TYR-33发生疏水相互作用（3.8、3.5、3.5、3.8 ?）；TGP各成分（芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷、氧化芍药苷、芍药苷）分别与EGFR、FGF2(1BAS)、MMP9(1ITV)等形成2–4个氢键（键长2.2–3.9 ?），证实高亲和力结合。3.1.4 GO富集分析结果（GO enrichment analysis results）：对31个靶点进行GO分析（P<0.05）筛选出1283个生物学过程，顶部富集主要涉及对细菌源分子反应、一氧化氮生物合成过程、一氧化氮代谢过程、活性氮物种代谢过程，与炎症及免疫调节相关。3.1.5 KEGG通路富集结果（KEGG pathway enrichment results）：KEGG分析显示10条显著富集通路，顶部包括脂质与动脉粥样硬化、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、松弛素信号通路、流体剪切应力与动脉粥样硬化、HIF-1信号通路、TNF信号通路、疟疾、利什曼病、类风湿关节炎、IL-17信号通路，关联炎症、免疫及血管功能，最显著为脂质与动脉粥样硬化通路。
3.2 临床结果（Clinical result）。3.2.1 临床疗效评价（Evaluation of clinical efficacy）：12个月观察期内，早期（M1、M2）CG口腔黏膜溃疡复发率显著低于MG（M1：0.0% vs. 21.0%，M2：0.0% vs. 100.0%，p<0.05），M1生殖器溃疡复发率CG为0.9% vs. MG 6.5%（p<0.05）；自M3起两组均达口腔及生殖器溃疡完全缓解，无统计学差异；结节性红斑消退两组相当。3.2.2 实验室生物标志物分析（Analysis of laboratory biomarkers）：ESR轨迹不同，CG在M1初始较高，M2急剧下降显著低于MG（p<0.001），M3后两组持平；CRP在各时间点无显著差异；其他血常规及肝肾功能指标均在正常范围。3.2.3 治疗安全性评估（Assessment of treatment safety）：联合方案耐受良好，CG在初期（M1–M3）药物诱导腹泻发生率 transiently升高（35.9%、38.1%、39.4%），MG始终低于1.6%（均p<0.05），此后下降；两组全程无药物相关血细胞减少；M1 CG药物相关皮疹0.0%显著低于MG 4.0%（p<0.05），其余时间点无差异，无药物过敏；不良事件少见且无明确持续风险增加趋势。
讨论部分总结：BD伴黏膜皮肤受累最常见且损生活质量，秋水仙碱为一线但存局限，“双花疗法”在中国应用30余年缺系统证据。本研究首次结合临床队列与网络多组学探究TGP联合秋水仙碱对黏膜皮肤BD的疗效、安全及分子机制，填补传统经验与现代药理证据间隙。网络药理学与分子对接表明TGP四成分与秋水仙碱靶向31重叠靶，PPI示平均度12.7，核心靶MMP9、ICAM1、FGF2、TLR4、EGFR、NOS3与BD发病相关：TLR4在活动期高表达识别HSP/LPS，秋水仙碱与TGP均下调TLR4/NF-κB轴；ICAM1高表达致白细胞跨内皮迁移异常，两者均下调ICAM1；MMP9促炎症扩散，TGP成分芍药内酯苷及秋水仙碱均下调MMP9；分子对接证稳定结合。GO富集涉细菌源分子反应及NO代谢等炎症免疫过程；KEGG富集通路含脂质与动脉粥样硬化、TNF、IL-17等炎症免疫血管通路。临床示联合组早期黏膜皮损复发控制更优，ESR早期骤降示抑炎更快，长期均完全缓解；安全性示短暂可耐受腹泻，无血细胞减少，不增过敏风险；MG在M2口服溃疡100%复发反映中国患者秋水仙碱单药疗效有限，佐证联合方案现实需求。研究存单中心、非随机、样本限、MG后期转联合、随访12月不够长、机制需体内外验证等局限，未来需多中心随机对照长随访及深入机制研究。
结论部分翻译： “双花疗法”——TGP联合秋水仙碱——对BD患者实现显著更优的早期黏膜皮肤病变控制，具有以短暂可管理腹泻为特征的良好安全性。其协同机制涉及同时调节六个核心炎症靶点（MMP9、ICAM1、FGF2、TLR4、EGFR、NOS3）及关键通路，包括TLR4/NF-κB、TNF和IL-17信号。对于临床实践，该方案作为一种有价值的一线补充选择，特别适用于对秋水仙碱单药应答不全或不耐受的患者，促进更早症状缓解并降低复发风险。对于未来研究，有必要开展延长随访的多中心随机对照试验以确认其长期疗效与普适性，同时需细胞与动物研究验证这些预测的分子和靶点。
要不要我帮你把文中涉及的6个核心靶点（MMP9、ICAM1等）的具体生物学功能再单独整理成一段简明释义？
