TSC表达与子宫腺肌病患者月经过多的相关性

《Reproductive Sciences》：Correlations between TSC Expression and Menorrhagia in Adenomyosis Patients

　　

TSC复合物由TSC2与TSC1及TBC1D7结合形成，通过TSC-mTORC1轴在子宫内膜相关疾病的发生中发挥重要作用。然而，迄今为止这些蛋白质与子宫腺肌病(AM)之间的关系尚未明确。研究人员旨在研究AM中TSC蛋白质的表达，并确定TSC表达与AM患者临床病理参数之间的相关性。本研究纳入了21名经组织学诊断为AM并因非子宫内膜疾病接受子宫切除术的患者（年龄范围40-50岁）。健康子宫内膜标本取自21名接受腹腔镜检查的宫颈原位癌患者（年龄范围38-53岁）。采用包含社会人口学特征和生育史的标准问卷对参与者进行了访谈。通过视觉模拟评分法(VAS)和月经图文评估法对痛经和月经过多的严重程度进行量化，并测定了术前血红蛋白水平。收集了血清和子宫内膜组织样本，通过免疫荧光确定了TSC和VEGF的表达，并通过ELISA（酶联免疫吸附测定）定量分析了血清中VEGF的表达。研究发现，在AM患者中，TSC的表达在分泌期显著降低。子宫内膜TSC1和TSC2的表达与月经量相关。此外，高水平的VEGFD增加了AM患者发生中重度月经过多的可能性。研究结果表明，TSC与月经过多等临床症状相关。此外，VEGFD可能是AM患者月经过多严重程度的潜在定量预测指标。

子宫腺肌病(AM)是一种以子宫内膜异位和邻近平滑肌在子宫肌层增生为特征的良性子宫疾病，被认为是引起盆腔疼痛、异常子宫出血和不孕的主要原因之一。目前，尽管已有研究发现TSC-mTORC1轴在子宫内膜相关疾病的发生中发挥主要作用，但TSC复合物蛋白与AM之间的关系尚未确定。TSC复合物由Tuberin(TSC2蛋白)与Hamartin(TSC1蛋白)和TBC1D7结合形成，通过翻译后修饰等方式负向调节下游mTORC1复合物的活性，在抑制肿瘤和调节细胞增殖中发挥作用。鉴于前期研究表明子宫内膜中TSC2的下调会通过过度激活mTORC1信号通路抑制自噬，导致细胞过度迁移和上皮-间充质转化(EMT)，研究人员推测子宫内膜中TSC的低表达可能促进AM的发生。此外，由于血管生成在AM发展中具有重要作用，研究人员认为可能受TSC抑制的血管内皮生长因子(VEGF)也参与了AM的发病机制。为了明确TSC表达与AM临床病理参数的关系，研究人员开展了相关研究。该研究验证了AM患者TSC表达与临床病理参数的相关性，发现TSC与月经过多等临床症状相关，而VEGFD可作为AM患者月经过多严重程度的潜在定量预测指标。这一结论有助于阐明AM的病因，并在发病机制与临床表现之间建立联系，该论文已发表于《Reproductive Sciences》。

在主要关键技术方法方面，样本队列来源于上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院。研究人员纳入了21名经组织学诊断为AM并行子宫切除术的患者，同时从21名接受腹腔镜检查的宫颈原位癌患者获取健康子宫内膜样本。采用标准问卷收集社会人口学和生育史特征。利用视觉模拟评分法(VAS)和月经图文评估法对痛经和月经过多的严重程度进行量化，并测定术前血红蛋白水平。收集血清与子宫内膜组织样本后，使用免疫荧光(IF)染色技术测定组织中TSC1、TSC2、VEGF-A和VEGFD的表达水平，应用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术检测血清中VEGF-A和VEGFD的含量。使用GraphPad Prism软件进行非配对双尾t检验、相关性分析及线性回归等统计学分析。

关于研究结果，具体分为以下四个部分：

**上皮TSC表达在分泌期显著降低**
通过免疫荧光(IF)染色分析人子宫内膜活检组织，发现TSC广泛表达于子宫内膜组织，尤其是上皮细胞的细胞质中。在分泌期，AM患者在位子宫内膜及病灶的TSC1和TSC2表达量均显著低于对照组子宫内膜，这验证了TSC在分泌期AM中呈低表达的假设。

**42名患者中TSC表达与临床病理参数的相关性**
相关性分析显示，TSC1和TSC2表达水平与VAS评分和子宫体积呈负相关，与术前三个月的最低血红蛋白水平呈正相关。同时，TSC1和TSC2表达与月经量呈负相关。TSC表达与血小板计数、凝血酶原时间等凝血指标之间未发现显著相关性。这提示TSC表达与痛经和月经过多等临床症状存在关联。

**21名AM患者中TSC表达与临床病理参数的相关性**
为了探究TSC表达是否与AM严重程度相关，研究人员专门对AM患者组进行了分析。在AM组中，TSC1和TSC2表达与VAS评分、子宫体积或术前最低血红蛋白水平无显著相关性。但TSC1与月经量呈显著负相关，而TSC2无此相关性。因此，推测TSC1水平可用于推断AM患者是否发生或将发生月经过多。

**血清和子宫内膜VEGF水平与AM患者月经过多严重程度的相关性**
研究人员进一步检测了TSC下游VEGF的表达。免疫荧光染色显示VEGFA和VEGFD具有不同的染色强度。血清VEGD表达水平与月经量呈显著正相关，而VEGFA无此相关性。术前血红蛋白水平与VEGFA或VEGD表达均无明显相关。同时，子宫内膜组织中TSC1和TSC2表达与组织中VEGD或VEGFA表达无显著相关性。此外，采用受试者操作特性(ROC)分析评估了内膜TSC1、血清VEGFD和血清CA-125三种生物标志物的鉴别性能。结果显示，TSC1和VEGFD的曲线下面积(AUC)较大，表明这两种标志物在区分AM患者月经过多方面具有进一步研究价值。

在论文的讨论部分，研究人员总结道，本研究再次证实了TSC在AM患者分泌期子宫内膜中表达下调，并首次揭示了TSC与出血指标的相关性。TSC与VAS评分、子宫体积和月经量呈负相关，与血红蛋白水平呈正相关，表明TSC与痛经和月经过多等临床症状相关。由于临床上难以获取内膜TSC表达水平，研究人员探讨了更易检测的指标VEGF。由于TSC可通过依赖与非依赖mTOR的途径调节VEGF，且VEGF作为内皮细胞有丝分裂原能增加血管通透性并参与血管生成，在AM发展中具有重要作用。本研究发现血清VEGFD水平与AM患者月经过多严重程度呈正相关，高水平VEGF增加了发生中重度月经过多的可能性。TSC失调可能代表了驱动AM病灶异常血管生成活动的上游机制。

最后，研究人员翻译了研究结论部分：研究人员验证了AM患者TSC表达与临床病理参数之间的相关性。TSC可能与月经过多等临床症状相关。此外，VEGFD可能是AM患者月经过多严重程度的潜在定量预测指标。这些发现有助于阐明AM的病因，并在该疾病的发病机制与临床表现之间建立联系。