摘要
镰刀菌赤霉病是由禾谷镰刀菌引发的，它在全球范围内导致小麦产量大幅下降并引发霉菌毒素污染。初步研究发现，多粘类芽孢杆菌具有很强的拮抗作用。为明确其主要的抗真菌成分，通过硫酸铵沉淀、DEAE-52阴离子交换层析和Sephadex G-75凝胶过滤层析技术对一种胞外蛋白进行了纯化。SDS-PAGE检测显示该蛋白在76 kDa处有一条单一条带，液相色谱-串联质谱分析确认该蛋白属于糖苷水解酶家族，序列相似度达86%。生化特性分析表明，这种粗蛋白在40–90 °C及pH 3.0–9.0的条件下保持稳定，但对蛋白酶K、胰蛋白酶和中性蛋白酶敏感。纯化的76 kDa蛋白对禾谷镰刀菌具有抗真菌活性。该蛋白的编码基因已被克隆并在大肠杆菌中表达，复性后的重组蛋白p76kd的抗真菌活性与天然蛋白相当。本研究通过LC-MS/MS肽段比对，确定了一种被归类为糖苷水解酶的76 kDa蛋白，并对其进行了纯化与特性分析；根据现有同类研究，其抗真菌功能很可能源自保守的糖苷水解酶结构域，这与此前报道的脂肽或尚未被鉴定的复合体有所不同。这种蛋白有望成为控制镰刀菌赤霉病及谷物作物相关真菌病害的生物防治候选物质。
