血吸虫传播的异源监测：对消除血吸虫病和人畜共患传播意识的意义

《Frontiers in Tropical Diseases》：Xenomonitoring surveillance of schistosome transmission: implications for schistosomiasis elimination and zoonotic transmission awareness

　　

背景：在喀麦隆，尽管进行了多次针对血吸虫病的大规模筛查和治疗运动，但再感染持续存在，主要原因是持续接触受污染的水体。因此，该疾病仍然对人口健康和社会经济发展构成重大威胁。在这项研究中，研究人员通过筛选中间宿主评估了血吸虫病传播的环境风险。这种补充方法有助于识别人类-水接触点的活跃传播点，并可能通过有针对性的控制干预措施中断寄生虫传播。方法：研究人员在雅温得附近的半农村地区Nkolbisson进行了一项纵向研究，该地区的大规模药物管理（MDA）运动已实施十多年。调查了四个人类-水接触点，收集并分类了螺类。使用寄生虫学技术和两种引物的分子异源监测确定了感染率。ETTS2/ETTS17引物检测了Biomphalaria螺类、血吸虫属（Schistosoma）物种和其他吸虫的核糖体DNA，而SMF/R-F/SMF/R-R引物特异性针对曼氏血吸虫（Schistosoma mansoni）28^S核糖体区域。在34只感染的Biomphalaria pfeifferi中监测了八天的每日尾蚴产量，并对阳性扩增子进行了测序和核苷酸BLAST搜索，以与现有序列进行比较。结果：共收集到来自四个物种的1,482只淡水螺类：Biomphalaria pfeifferi（361只）、Lymnaea natalensis（465只）、Physa acuta（348只）和Melanoides tuberculata（134只）。鉴定出五种形态不同的尾蚴类型。B. pfeifferi的寄生虫学感染率为19.59%，L. natalensis为7.94%。分子异源监测显示B. pfeifferi的感染率显著更高：ETTS引物组为45.14%，曼氏血吸虫特异性SMF引物组为23.07%。感染的螺类在八天内平均每只释放3,151.25±2,165条尾蚴，有些个体每天释放超过2,500条尾蚴。测序分析确认了曼氏血吸虫的身份，与参考菌株显示100%序列相似性。结论：该研究确定了尽管进行了多年的大规模化疗，但人类仍处于曼氏血吸虫感染和人畜共患吸虫暴露高风险中的活跃传播焦点。分子异源监测被证明比传统寄生虫学方法检测感染螺类更敏感。因此，它可能支持有针对性的螺类控制策略，以补充大规模药物管理，实现血吸虫病的可持续消除。

血吸虫病是一种由淡水螺类（中间宿主）释放的裂体吸虫幼虫引起的寄生虫病，在撒哈拉以南非洲地区消除难度极大。尽管世界卫生组织（WHO）已将消除作为公共卫生问题（定义为重度感染患病率<1%），但喀麦隆自2012年以来实施大规模药物管理（MDA）后，再感染仍持续存在，主要原因是人群持续接触受污染水体。为突破这一瓶颈，研究人员在《Frontiers in Tropical Diseases》发表论文，提出通过环境异源监测（xenomonitoring）识别传播热点，以补充传统化疗策略，并评估人畜共患传播风险。

研究人员在喀麦隆雅温得附近半农村地区Nkolbisson的Ekorezok健康区开展为期3个月（2024年2月至4月）的纵向研究。主要关键技术方法包括：1）螺类采集与鉴定：在4个人类-水接触点（A-D）使用标准网具和镊子采集螺类，物种鉴定基于贝壳学特征；2）寄生虫学检查：对Biomphalaria pfeifferi和Lymnaea natalensis进行尾蚴释放诱导，通过形态学鉴定尾蚴类型并计数；3）分子异源监测：对208只B. pfeifferi提取DNA，使用ETTS2/ETTS17引物（扩增ITS1区域，检测螺类、血吸虫及其他吸虫）和SMF/R-F/SMF/R-R引物（特异性检测曼氏血吸虫28^S核糖体区域）进行PCR；4）尾蚴产量监测：对34只感染B. pfeifferi连续8天定量每日尾蚴释放；5）测序分析：对阳性SMF扩增子进行双向测序，经BLAST比对确认物种。

研究结果如下：
**3.1 螺类采集与物种组成**：共采集1,482只淡水螺类，分属4科4种：B. pfeifferi（361只）、L. natalensis（465只）、Physa acuta（348只）和Melanoides tuberculata（134只）。4月采集量最高（572只，38.6%），B. pfeifferi和M. tuberculata丰度逐月增加，而L. natalensis下降。通过比较月份间丰度的χ²检验得出上述趋势。
**3.2 人类-水接触点特征**：螺类主要聚集于点D（1,308只，88.3%），该点用于洗衣、农业、游泳等，水体微浊、底质泥泞，条件适宜。点D的丰度显著高于其他点（χ²=866.54, p<0.0001），通过χ²检验得出。
**3.3 寄生虫学评估与尾蚴多样性**：自然感染仅在3月和4月检测到，B. pfeifferi感染率峰值在3月（29.0%），4月为21.6%；L. natalensis感染率在3月为3.2%，4月为11.4%。总体感染率B. pfeifferi为19.59%，L. natalensis为7.94%。鉴定出5种尾蚴类型：棘口吸虫尾蚴、矛形尾蚴、对盘尾蚴、曼氏血吸虫型尾蚴和叉尾尾蚴（禽类血吸虫，引起游泳者瘙痒）。通过尾蚴释放实验和形态学观察得出。
**3.4 血吸虫感染的分子异源监测**：对208只B. pfeifferi（141只尾蚴阴性，67只阳性）进行PCR，93.8%确认为B. pfeifferi。ETTS引物检测显示，尾蚴阴性螺中36.9%携带血吸虫DNA，3.5%携带其他吸虫；尾蚴阳性螺中41.8%携带血吸虫DNA，4.5%携带其他吸虫。SMF引物检测到S. mansoni在尾蚴阴性螺中占15.6%，阳性螺中占34.3%。总体感染率ETTS为45.14%，显著高于寄生虫学19.59%（p<0.001）；SMF为23.07%，仍显著高于寄生虫学（p<0.05）。通过比较PCR和寄生虫学结果的χ²检验得出。
**3.5 物种身份的分子确认**：对2个阳性扩增子测序，BLAST分析显示与S. mansoni参考序列（如MK085971.1）100%相似（346个核苷酸完全匹配，E值=6.43×10^-179）。通过测序和BLAST比对得出。

讨论部分指出，该研究首次在喀麦隆应用分子异源监测进行血吸虫病监测。分子方法比传统方法更敏感，能检测早期感染，而传统方法可能低估实际风险。尾蚴产量高（平均每只螺8天释放3,151条），表明传播潜力大。鉴定出多种尾蚴类型，包括人兽共患吸虫，提示需采取“One Health”综合策略。MDA中断（如2018年后普拉喹酮供应问题）可能加剧了传播。研究结论：本研究提出了一种结合寄生虫学和分子异源监测的操作性监测策略，成功识别出活跃传播热点，在这些热点中，尽管经过多年大规模化疗，人群仍面临曼氏血吸虫感染和人兽共患吸虫暴露的高风险。分子异源监测比传统方法更敏感，测序确认了S. mansoni的特异性检测及多种共循环吸虫物种。高尾蚴产量表明持续的传播潜力，支持将环境监测纳入国家消除计划，以精确定位传播焦点并实施靶向螺类控制策略。未来，分子异源监测应被视为现有消除策略的有价值补充，特别是在MDA不足的地区，通过“One Health”方法和社区参与，实现更可持续的干预。