阿特拉曲林内酯Ⅲ通过调节多囊卵巢综合征中的NOX2/NRF2轴来保护颗粒细胞免受氧化损伤

《Scientific Reports》：Atractylenolide Ⅲ protects granulosa cells from oxidative injury by regulating the NOX2/NRF2 axis in polycystic ovary syndrome

　　

摘要

NADPH氧化酶2（NOX2）是活性氧（ROS）的主要来源，而过量的ROS积累会导致氧化应激。氧化应激是多囊卵巢综合征（PCOS）中卵巢功能异常的重要因素。阿特拉曲林Ⅲ（ATⅢ）是一种具有抗氧化活性的天然化合物。本研究的主要目的是探讨NOX2在PCOS相关卵巢功能异常中的作用，并评估ATⅢ的防护效果。研究从PCOS患者体内提取了原始卵巢颗粒细胞，检测了细胞凋亡标志物蛋白、NOX2以及与抗氧化相关的核因子红细胞2相关因子2（NRF2）基因和蛋白的表达情况。此外，还建立了二氢睾酮（DHT）诱导的KGN细胞模型，用于观察ATⅢ处理后氧化应激的变化情况。通过分子对接和细胞热位移试验（CETSA）检测了ATⅢ与NOX2之间的相互作用。PCOS患者的颗粒细胞表现出更高的细胞凋亡率、更高的NOX2表达水平以及更弱的抗氧化防御能力。在KGN细胞中，DHT处理会导致细胞凋亡增加、ROS水平及NOX2表达上升，同时NRF2活性下降。ATⅢ处理可逆转这些变化。此外，ATⅢ还能促进NRF2向细胞核转移，从而提升下游血红素加氧酶-1（HO-1）和NAD(P)H醌脱氢酶1（NQO1）的表达水平。分子对接和CETSA实验支持了ATⅢ与NOX2之间存在相互作用且存在结构结合的可能。ATⅢ还能逆转由编码NOX2的CYBB基因过表达所引起的NOX2和NRF2信号通路的异常。这些结果表明，ATⅢ可通过调节NOX2/NRF2轴并恢复PCOS患者颗粒细胞中的氧化还原平衡来减轻氧化应激。