《International Journal of Molecular Sciences》：Ubiquitin-Related Proteostatic Programs in Cycling Fibroblast-Lineage Remodeling After Myocardial Ischemic Injury: A Hypothesis Informed by Single-Cell and Spatial Transcriptomics
心肌缺血及再灌注可启动空间上有组织的损伤-修复程序，进而塑造心室重塑。尽管心脏成纤维细胞对瘢痕形成不可或缺，但单细胞和空间转录组学研究揭示了成纤维细胞谱系状态在时间上动态变化且具有区域特异性。本批判性叙事综述整合了来自心肌缺血-再灌注（I/R）的直接证据，以及来自永久性心肌梗死、临床异质性人类梗死、成纤维细胞特异性泛素生物学、细胞周期调控和心脏成纤维细胞图谱的模型标记证据。一项直接的成纤维细胞I/R研究鉴定了一个HSP47–USP10–SMAD4去泛素化轴，而大多数其他成纤维细胞泛素-蛋白酶体系统（UPS）机制来源于永久性梗死、非缺血性心脏应激或体外系统。研究人员提出，与CCNB1相关、富集于G2/M期的循环成纤维细胞谱系状态可能在确定的缺血后微环境中施加更高的蛋白质稳态需求。其概念新颖之处不在于CCNB1转换或UPS活性具有心脏特异性；两者均为增殖细胞的一般特征。相反，该框架探讨的是成纤维细胞谱系、损伤模型来源、解剖微环境、时间窗口、细胞状态及底物特异性UPS节点是否共同决定了缺血后重塑过程中的蛋白质稳态依赖性。基于RNA的泛素相关特征仍是转录代理指标，不能直接定量泛素化底物、泛素链拓扑结构、酶活性或蛋白酶体通量。解析所提出的关系将需要空间共定位、蛋白质水平和泛素残基谱分析、蛋白酶体及核糖体测定、成纤维细胞特异性扰动，并在人类梗死组织中进行验证。
**1. Introduction**
及时再灌注在急性心肌梗死后至关重要，但再氧合会触发线粒体活性氧生成、钙超载和线粒体通透性转换。微血管阻塞、内皮功能障碍和无菌性炎症可进一步扩大组织损伤。这些急性事件影响从炎症向修复的后续转变，从而塑造瘢痕结构和心室重塑。缺血后心肌构成一个多细胞修复生态系统，其中心肌细胞、血管细胞、免疫细胞和基质细胞交换机械、代谢和炎症信号。成纤维细胞谱系细胞感知组织损伤，合成并重塑细胞外基质（ECM），与邻近细胞通讯，并稳定梗死壁。尽管此反应对愈合至关重要，但持续激活会促进过度纤维化、组织僵硬和不良重塑。单细胞转录组学研究已解析出心肌梗死后的活化、炎症、基质产生和循环成纤维细胞程序。空间图谱进一步将小鼠和人类心脏中基质重塑定位至梗死区和边界区微环境。这些发现以细胞状态、时间和解剖位置定义的框架取代了静止与活化的二元模型。受调控的蛋白质转换可能为成纤维细胞状态与组织重塑提供分子桥梁。泛素连接酶和去泛素化酶调控底物稳定性与信号传导，而心脏泛素-蛋白酶体系统（UPS）在基础和应激条件下维持蛋白质质量。心肌缺血-再灌注损伤（MIRI）的直接研究已涉及与再灌注损伤相关的通路中的缺陷性泛素化-蛋白酶体偶联、蛋白酶体功能改变、MARCH2和USP25。由于有丝分裂进程需要及时降解细胞周期蛋白B1（cyclin B1）及其他短寿命调控因子，一个核心未解问题是循环成纤维细胞是否表现出对UPS介导的蛋白质稳态的独特依赖性。
**1.1 Literature Search Strategy and Evidence Framework**
本文设计为批判性叙事机制综述，而非系统综述或荟萃分析。检索PubMed数据库从建库至2026年7月18日。使用的检索词块包括：(1) (“心肌缺血-再灌注”或“缺血-再灌注”或“心肌梗死”) 与 (“心脏成纤维细胞”或肌成纤维细胞) 与 (泛素或泛素化或去泛素*或蛋白酶体或“E3连接酶”)；(2) (“单细胞RNA测序”或“单细胞转录组*”或“空间转录组*”) 与 (“心肌梗死”或“缺血-再灌注”) 与 (成纤维细胞或肌成纤维细胞)；(3) (CCNB1或“细胞周期蛋白B1”或“G2/M”) 与 (成纤维细胞或“心脏成纤维细胞”) 与 (泛素或蛋白酶体或“APC/C”)；以及(4) (“核糖体生物发生”或“核糖体RNA”或rRNA或“核糖体质量控制”) 与 (心脏或心肌) 与 (缺血或再灌注或成纤维细胞)。在Web of Science和Google Scholar中采用等效关键词组合，并检查关键研究的参考文献列表和正向引用。记录按DOI和标题去重，通过标题和摘要筛选，然后在全文层面评估模型来源及与综述问题的相关性。当研究满足以下至少一项标准时，被纳入证据表：(i) 通过单细胞或空间方法解析了I/R或心肌梗死后的心脏成纤维细胞状态；(ii) 证明了泛素化、去泛素化酶（DUB）、E3泛素连接酶、蛋白酶体降解或泛素样修饰物在心脏成纤维细胞中的机制性作用；或(iii) 建立了对解释所提出模型至关重要的基础细胞周期或蛋白质稳态机制。非心脏纤维化研究、无明确成纤维细胞相关性的纯描述性关联，以及损伤模型来源不明确的研究被排除在直接I/R类别之外。保留基础性综述以供背景参考，但不作为主要机制性证据。由于本综述为叙事性，检索用于结构化证据映射，而非PRISMA样式的定量研究统计。证据被分为四个非等效类别，并在文本和表格中一致标注：(A) 来自可控心脏I/R的直接成纤维细胞证据；(B) 来自永久性梗死的成纤维细胞证据；(C) 来自临床异质性人类梗死的证据；以及(D) 来自非缺血性心脏模型、全心或心肌细胞研究、体外系统或一般细胞生物学的更广泛支持性证据。例如，APC/C依赖性降解细胞周期蛋白B1确立了生物学合理性，但并未证明泛素依赖性CCNB1调控主导心脏成纤维细胞重塑。同样，在永久性结扎后观察到的机制，除非在再灌注模型中得到独立验证，否则不被解释为I/R特异性。
**1.2 Article Type, Scope, Conceptual Novelty, and Knowledge Gaps**
现有综述通常将心肌I/R损伤和心脏纤维化作为独立主题处理，而其他综述则聚焦于心脏UPS、成纤维细胞异质性或心脏纤维化中的泛素依赖性机制。方法学综述也探讨了单细胞和空间转录组学。本文仍为综述，更具体地定位为具有假说生成整合框架的批判性叙事机制综述。它不声称具有系统综述的详尽覆盖或定量研究统计。概念新颖之处不在于提出细胞周期蛋白B1转换或UPS活性对心脏是独特的。CCNB1是常规的G2/M组分，泛素依赖性转换在增殖细胞中普遍需要。相反，该综述探讨应用六个联合必要约束是否能够区分重塑相关的蛋白质稳态依赖性与其泛型细胞周期蛋白质稳态。这些约束是心脏成纤维细胞谱系、损伤模型来源、解剖微环境、时间窗口、状态身份和底物特异性UPS控制。这种情境约束的表述将独立建立的心脏成纤维细胞UPS机制与单细胞和空间证据联系起来，而不假设汇聚于CCNB1。因此，研究人员首先批判性地比较了在可控I/R、永久性梗死和人类梗死中成纤维细胞重塑的时间和空间组织。随后，在提出UPS–CCNB1关系作为可测试、明确非因果框架之前，评估了直接和支持性的成纤维细胞特异性泛素机制、细胞周期控制以及互补的核糖体相关需求。
**2. Myocardial Ischemic Injury as a Temporally Organized Repair Process**
缺血抑制氧化磷酸化，耗竭ATP，并破坏离子稳态。再灌注随后可诱导线粒体通透性转换、活性氧生成和微血管功能障碍。垂死的心肌细胞释放损伤相关分子模式，激活先天免疫信号，并招募中性粒细胞和单核细胞衍生巨噬细胞。有效修复依赖于过度炎症的消退和基质程序的协调激活。谱系追踪和单细胞研究表明，梗死后成纤维细胞增殖、迁移并获取肌成纤维细胞特征。这些细胞主要来源于驻留的心脏谱系，而非骨髓衍生群体。修复性成纤维细胞表达基质相关程序，包括POSTN-和CTHRC1相关特征。ECM沉积稳定受损壁，而持续的纤维化活性促进组织僵硬、不良重塑和心力衰竭。因此，成纤维细胞增殖的生物学后果高度依赖于时机和背景。早期修复性成纤维细胞的扩增可促进瘢痕形成，而持续或空间上不恰当的循环和基质产生可能导致瘢痕扩展和心室功能障碍。因此，治疗策略应依据时间窗口、细胞状态和解剖位置来定义，而非对成纤维细胞增殖进行无差别抑制。
**3. Fibroblast-State Heterogeneity: From Cell Types to Remodeling Programs**
心脏成纤维细胞通常通过Pdgfra、Tcf21、Dcn、Lum、Col1a1和Col1a2进行注释，而活化的肌成纤维细胞样状态常表达Postn、Fn1、Acta2和Cthrc1。尽管这些标记物对注释有用，但并未定义不可变的细胞类型。整合图谱和高分辨率心脏转录组学研究反而揭示了动态、部分重叠的细胞程序。总体而言，单细胞研究支持四个结论。首先，心脏损伤协同重塑了基质、血管和免疫区室。其次，梗死心脏包含炎症和基质产生成纤维细胞状态，以及保守的增殖程序。第三，循环状态表达Mki67、Top2a、Cdk1、Ube2c、Birc5和Ccnb1等基因；然而，除非在相同细胞中证明了活化标记物，否则不应假设这些细胞周期模块识别了分化的肌成纤维细胞。第四，空间背景将梗死边界区的程序与表型相似的远程心肌程序区分开来。因此，研究人员按重塑程序而非固定亚型目录来组织成纤维细胞。炎症程序与免疫细胞协调，基质产生程序构建并组织瘢痕，循环程序扩展基质区室的一部分。循环和肌成纤维细胞程序可能重叠，但在共表达、谱系和功能证据证明其汇聚之前，应保持分析上的区分。选择性蛋白质转换是一个生物学上合理的调控层，因为细胞周期进入、有丝分裂和退出需要短寿命蛋白的定时降解。代表性的状态解析研究总结于表1。
**4. Ubiquitination and Proteostasis in Post-Ischemic Cardiac Remodeling**
泛素化是一种可逆的翻译后修饰，其中E1酶激活泛素，E2酶催化其转移，E3连接酶赋予底物特异性；去泛素化酶（DUB）移除或重塑泛素链。根据链结构和细胞背景，泛素可引导蛋白酶体降解或调控运输、自噬、炎症信号和细胞周期进程。心脏UPS在基础和应激条件下维持蛋白质质量。I/R增加了氧化、错误折叠和损伤蛋白的负荷。实验性增强蛋白酶体功能可减轻I/R损伤，而泛素化与蛋白酶体降解之间的偶联破坏则加剧心肌损伤。MARCH2和USP25已在全心或心肌细胞背景下与NLRP3相关的I/R通路联系起来。重要的是，直接的成纤维细胞证据来自短暂LAD闭塞/再灌注和缺氧/复氧实验，其中HSP47招募USP10，促进SMAD4去泛素化，并加剧成纤维细胞活化和纤维化。这项HSP47–USP10–SMAD4研究确立了底物特异性DUB机制可在可控I/R后在成纤维细胞中运作，但并未将该机制与CCNB1相关的循环状态联系起来。下文总结的其他心脏成纤维细胞UPS机制主要来源于永久性梗死、非缺血性应激或体外系统。它们为底物和通路选择提供信息，但不应被视为I/R特异性CCNB1机制的证据。
**5. Cardiac Fibroblast-Specific Ubiquitin Mechanisms and Candidate Regulators**
UPS包含几个调控层级：E3连接酶赋予底物选择性，DUB逆转或重塑泛素信号，蛋白酶体移除许多多泛素化蛋白。心脏UPS功能、心脏E3连接酶以及泛素通路在心脏纤维化中日益扩大的作用已有综述。在此，初步研究按损伤模型和成纤维细胞证据的直接性重新分类，以便机制性支持不与I/R特异性混淆。在当前检索确定的研究中，仅有HSP47–USP10–SMAD4轴在可控心脏I/R模型中提供了直接的成纤维细胞证据。永久性MI研究支持WWP2–SMAD2、OTUD4–PFKFB3、FBXL8–Snail1、ASPP1–OTUB1–p53、HSPA12A–USP10–p53、USP7–KLF7–GATA3、UCHL1–GRP78、SPOP–RACK1和UCK2/UCKL1–TRIM21–Smurf2机制。血管紧张素II刺激的成纤维细胞支持USP2–β-catenin–cyclin D1和UCHL1–NF-κB调控，而hiPSC衍生心脏成纤维细胞支持BAG3–HSP70–CHIP–TGFBR2降解轴。FAT10介导的蛋白酶体SMAD3降解涉及泛素样修饰物，而非典型泛素化。一项在PDGF-BB刺激的心脏成纤维细胞中的早期UCHL1研究涉及抑制自噬（而非蛋白酶体）p21降解，因此被保留为边界证据。这些研究建立了成纤维细胞相关的底物机制，但在物种、损伤模型、谱系特异性和终点方面仍存在异质性。这些初步研究均未直接证明在空间解析的心脏成纤维细胞状态中泛素依赖性调控CCNB1。其价值有两方面。它们鉴定了实验支持的成纤维细胞UPS节点和底物，并定义了竞争性的促纤维化或保护性机制。应测试这些机制与CCNB1相关循环程序的重叠，而非假定其属于该程序。候选物优先排序应整合模型匹配的空间定位、蛋白质水平证据、底物参与和成纤维细胞特异性扰动。
**Evidence from Cardiac Fibroblasts and Model-Specific Boundaries**
表2总结了心脏成纤维细胞中泛素依赖性或泛素样机制的主要证据。该表区分了可控I/R、永久性梗死、非缺血性刺激和体外系统。E3连接酶和DUB仍具有吸引力，因为它们赋予底物选择性和可逆性；然而，仅mRNA丰度不能建立酶活性、底物参与、泛素链拓扑结构或蛋白酶体通量。
**6. Interpretive Boundaries of Transcriptomic Evidence**
转录组富集不应等同于生化活性。RNA测序不测量泛素化底物、泛素链拓扑结构、E3连接酶或DUB活性，或蛋白酶体通量。因此，富集UPS相关转录本的簇不应在没有支持性蛋白质水平或生化证据的情况下被描述为表现出增加的泛素化。定量蛋白质组学和泛素残基谱分析为此类验证提供了合适的方法。在本综述中，术语“泛素相关转录程序”表示参与泛素缀合、去泛素化、蛋白酶体降解或泛素依赖性信号传导的基因的协调表达。这种刻意约束的术语可以提名用于实验测试的通路，但不能识别修饰的底物、链类型、酶活性或降解速率。相同的解释约束适用于CCNB1。细胞周期蛋白B1是常规的G2/M调控因子，其有丝分裂破坏依赖于APC/C；这种化学性质既非心脏特异性也非成纤维细胞特异性。仅当CCNB1相关循环程序在心脏成纤维细胞谱系细胞中、在明确的损伤模型、解剖微环境和时间窗口内被证明，同时有直接证据表明相关的UPS酶、底物和生物学后果，所提出的模型才变得具有重塑特异性。因此，在心脏转录组学数据中，CCNB1相关的成纤维细胞状态应被解释为候选循环程序，而非细胞周期蛋白B1蛋白阳性、CCNB1驱动的纤维化或直接泛素依赖性调控的证据。
**rRNA and Ribosome Biogenesis as a Complementary Biosynthetic-Demand Axis**
核糖体RNA形成核糖体的结构和催化核心，核糖体生物发生是翻译能力的主要决定因素。因此，增殖和基质产生的成纤维细胞可能经历更高的生物合成需求，尽管仅转录组学数据不能确定rRNA合成增加。在心脏I/R中，γ2-AMPK依赖性抑制前rRNA转录和核糖体生物发生减少了内质网应激和损伤。在原代心脏成纤维细胞中，RNA聚合酶I抑制剂CX-5461主要通过p53激活（而非减少核糖体生物发生）抑制了活化、增殖和肌成纤维细胞分化。然而，核仁应激的心脏后果仍然是背景依赖性的。核糖体生物学也与泛素依赖性蛋白质稳态直接交叉。Poly(A)-捕获RNA测序不直接定量成熟rRNA，许多基于液滴的单细胞工作流程同样聚焦于多腺苷酸化转录本。当核糖体停滞或碰撞时，E3连接酶ZNF598识别碰撞的核糖体并泛素化核糖体蛋白，从而启动核糖体相关质量控制信号。未来的研究应因此在空间定义的成纤维细胞群体中定量47S前rRNA、18S/28S rRNA、核仁活性、新生翻译、核糖体碰撞和质量控制蛋白。
**7. Proteostatic Requirements of Cycling Fibroblast-Lineage States**
循环成纤维细胞谱系细胞在分裂的同时，需响应细胞因子、机械应变、基质硬度、氧化应激和大量的ECM生物合成负担。这些汇聚的需求要求严格调控的蛋白质稳态。四个机制支持这一前提。首先，APC/C依赖性转换协调细胞周期蛋白和有丝分裂调控因子，而SCF和其他泛素-蛋白酶体机制提供额外的细胞周期控制。其次，基质产生增加了蛋白质折叠和质量控制的需求。第三，成纤维细胞活化涉及显著的细胞骨架重塑。第四，NF-κB和炎症小体信号由泛素化和去泛素化调控。这些机制确立了生物学合理性，但并未证明单个循环成纤维细胞状态同时表达了分化的肌成纤维细胞程序。因此，所提出的关系并非泛素化对CCNB1的简单线性效应，也非作为心脏特异性细胞周期机制提出。可测试的命题更为狭窄：在确定的缺血后成纤维细胞谱系、区域和时间窗口内，底物特异性UPS节点可能改变CCNB1–CDK1相关状态的进入、维持或消退，从而影响瘢痕结构。直接和支持性成纤维细胞研究确定了几个候选UPS轴和边界机制（表2），但尚无一个被映射到CCNB1相关状态。这一差距将新颖的整合性问题与已确立的泛型细胞周期蛋白质稳态区分开来。
**Interpretive Value and Limitations of CCNB1**
当在更广泛的G2/M模块中解释时，CCNB1最具信息价值，该模块包括MKI67、TOP2A、CDK1、UBE2C、BIRC5、AURKA和AURKB。这些基因的共表达在单细胞图谱中识别出循环成纤维细胞程序。单独的CCNB1既不能定义稳定的细胞类型，也不能建立因果机制。细胞周期蛋白B1丰度通过协调的合成、定位和APC/C依赖性降解迅速变化，增加的CCNB1 mRNA可能仅反映细胞周期阶段。因此，研究人员使用术语CCNB1相关循环成纤维细胞谱系状态来表示转录组程序，并保留CCNB1蛋白阳性用于通过蛋白质水平或空间蛋白质分析验证的细胞。
**8. Spatial Organization of Cycling Fibroblast-Lineage Remodeling**
解剖位置从根本上决定了成纤维细胞状态的生物学意义。人类空间多组学已描绘出不同的梗死区、边界区、远程区和血管相关心肌微环境，而小鼠空间研究已鉴定出梗死后转录上不同的边界区的出现。空间转录组学因此将解剖背景恢复至从解离单细胞数据推断的细胞状态。空间图谱可以确定CCNB1相关成纤维细胞特征是否集中于边界区或其他活跃基质重塑区域。它还可以评估其与巨噬细胞丰富、血管或胶原密集微环境的接近程度，并确定UPS相关转录是否与循环程序重叠。人类梗死图谱提供了疾病特异性空间证据，而健康成人心脏图谱为细胞状态注释提供了参考。然而，空间数据具有重要局限性。基于点（spot）的平台可能结合邻近细胞类型，解卷积依赖于所选参考；分辨率也因基于点、基于测序和基于成像的平台而异。表观共定位因此应通过多重免疫荧光、RNA原位杂交、空间蛋白质组学或显微切割后跟蛋白质组学和泛素特异性分析来验证。图1总结了区域重塑景观，而图2提出了一个建议的分析工作流程，显示整合的转录组学分析如何在细胞状态和通路水平提名候选程序。
**9. Intercellular and Extracellular Regulation of Fibroblast States**
成纤维细胞状态由邻近细胞和ECM的信号塑造。心肌细胞和免疫细胞提供应激、细胞因子和生长因子线索。巨噬细胞群体在心脏修复过程中动态变化，空间研究揭示了损伤消退过程中不断演变的心脏免疫微环境。基质结构影响成纤维细胞命运，而TGF-β/Smad信号在梗死心脏中发挥的成纤维细胞特异性效应可能与其他心脏细胞类型中的效应相反。总体而言，这些输入协调成纤维细胞增殖、基质产生和局部炎症。单细胞配体-受体分析可以提名TGF-β、IL-6家族、趋化因子、胶原-整合素、纤连蛋白和骨桥蛋白信号轴。这种推断对于优先排序有价值，但不能证明信号通量。在此框架内，局部损伤微环境充当细胞周期进入和蛋白质稳态需求的上游来源。
**Integrated Mechanistic Hypothesis**
如图3总结，来自可控I/R的直接证据支持成纤维细胞HSP47–USP10–SMAD4信号传导。额外的心脏成纤维细胞UPS机制来源于永久性MI模型、非缺血性模型和体外系统。FAT10介导的蛋白酶体降解被归类为涉及泛素样修饰物的证据，而UCHL1相关的自噬性p21降解被保留为UPS-自噬界面的边界证据。单独地，单细胞和空间研究解析了循环和区域组织的成纤维细胞程序。整合假说是，选定的UPS节点可能支持、约束或终止由损伤模型、区域和时间定义的成纤维细胞状态中的CCNB1–CDK1相关循环模块。目前尚无研究证明这两个证据流的汇聚；因此，图3以提议而非已确立的关系连接它们。
**10. Translational Implications: Precision over Broad Inhibition**
该框架的近期价值在于机制发现和组织分层。如果在人类心肌中得到验证，CCNB1相关成纤维细胞特征可识别活跃基质扩张的区域。然而，仅转录组关联并不证明考虑CCNB1或UPS作为直接治疗靶点的合理性。治疗时机至关重要。早期成纤维细胞增殖可支持瘢痕稳定，而持续循环或纤维化活化可能导致瘢痕扩展和心室功能障碍。因此，任何干预都需要是细胞状态特异性的、空间靶向的，并局限于适当的时间窗口。一个实际的下一个步骤是将空间成纤维细胞状态与梗死年龄、胶原结构、免疫组成、心室重塑和临床结局联系起来。候选泛素调控因子应随后通过泛素组学和成纤维细胞特异性扰动进行评估，而非仅从转录丰度推断。
**11. Validation Roadmap from Association to Mechanism**
图4中的验证序列直接针对图3中提出的关系。首先，多重免疫荧光或RNA原位杂交应确定在定义的损伤区域中，CCNB1或其他增殖标记物是否与PDGFRA、POSTN、COL1A1、ACTA2或CTHRC1共定位。随后应通过蛋白质水平测量确定RNA定义的状态是否对应于真正的增殖性成纤维细胞群体。后续研究应使用泛素残基谱分析、定量蛋白质组学和蛋白酶体测定来识别改变的底物和通路，理想情况下在分选或空间富集的成纤维细胞中进行。核糖体相关测量应包括前rRNA丰度、核仁活性、新生翻译和核糖体质量控制的读数【79,80,82,83】。候选E3连接酶、DUB、APC/C组分、蛋白酶体调控因子、核糖体质量控制因子和细胞周期介导物随后应在成纤维细胞中特异性扰动。最后，应使用人类梗死标本评估保守性、空间定位和临床相关性。
**12. Evidence Matrix**
支持该假说的悬而未决的问题和证据领域总结于框1和表3。
**13. Limitations**
几个局限性限制了解释。首先，这是一篇批判性叙事综述；结构化检索提高了可重复性，但未提供系统综述的详尽覆盖或定量研究统计。其次，永久性冠状动脉结扎、短暂I/R和临床心肌梗死损伤动力学、残余灌注、炎症暴露和瘢痕演变方面不同。因此，研究人员在文本和表格中始终区分直接成纤维细胞I/R证据、永久性MI证据、异质性人类证据和更广泛的机制性支持。第三，转录组特征不测量蛋白质修饰、酶活性、蛋白酶体通量、rRNA合成或翻译。第四，循环特征可能反映短暂的细胞周期阶段，而非稳定的成纤维细胞或肌成纤维细胞身份。第五，空间平台在分辨率上不同，可能结合邻近细胞类型。在当前检索确定的文献中，HSP47–USP10–SMAD4轴是在可控心脏I/R模型中直接建立的最清晰的成纤维细胞特异性机制。在永久性MI模型和非缺血性模型中已报道了心脏成纤维细胞中额外的UPS相关机制。进一步的机制性支持来源于体外进行的成纤维细胞研究。FAT10介导的蛋白酶体降解被归类为涉及泛素样修饰物的证据，而UCHL1相关的自噬性p21降解被保留为UPS-自噬界面的边界证据（表2）。大多数关于蛋白酶体功能和核糖体生物发生的I/R证据来源于心肌细胞或全心分析。尚无研究直接将定义的UPS底物机制与空间解析的CCNB1相关成纤维细胞状态联系起来。物种、缺血持续时间、再灌注间隔、谱系定义、合并症、治疗和组织可用性的差异进一步限制了向人类疾病的转化。
**14. Conclusions**
本批判性叙事综述支持三个基于证据层级划分的结论。首先，单细胞和空间研究确立了成纤维细胞谱系细胞进入炎症、基质产生和循环程序，但大多数此类图谱来源于永久性梗死或临床异质性人类梗死。其次，一项直接的可控I/R研究建立了成纤维细胞HSP47–USP10–SMAD4信号传导，而其余心脏成纤维细胞证据来源于永久性MI模型、非缺血性模型和体外系统。FAT10介导的降解被处理为涉及泛素样修饰物的证据，而自噬性p21降解被保留为UPS-自噬界面的边界证据（表2）。第三，尚无研究证明这些机制在再灌注后调控CCNB1相关的成纤维细胞状态。因此，中心结论被有意限定。CCNB1转换和UPS活性是增殖细胞的一般特征，而非心脏特异性新发现。所提出的贡献是一个情境约束的框架，该框架探讨成纤维细胞谱系、损伤模型来源、解剖微环境、时间窗口、状态身份和底物特异性UPS控制是否共同决定了缺血后重塑过程中的蛋白质稳态依赖性。测试该框架需要模型匹配的空间共定位、蛋白质和rRNA验证、泛素特异性蛋白质组学、谱系或命运图谱、成纤维细胞特异性扰动，以及在人类组织中的确认。
