《Biomedicine & Pharmacotherapy》：Steroid-loaded Avidin-Nucleic-Acid-Nano-Assemblies reduce hepatic fibrosis modulating Kupffer cells in primary biliary cholangitis
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原发性胆汁性胆管炎（PBC）是最常见的终身性自身免疫性肝病，源于胆管上皮细胞激活后产生的复杂免疫介导损伤级联反应，导致炎症和纤维化，最终发展为肝硬化和肝衰竭。熊去氧胆酸（UDCA）仍然是唯一的一线治疗药物，尽管对约40%的患者无效。对UDCA反应不足与死亡风险
原发性胆汁性胆管炎（PBC）是最常见的终身性自身免疫性肝病，源于胆管上皮细胞激活后产生的复杂免疫介导损伤级联反应，导致炎症和纤维化，最终发展为肝硬化和肝衰竭。熊去氧胆酸（UDCA）仍然是唯一的一线治疗药物，尽管对约40%的患者无效。对UDCA反应不足与死亡风险增加或需要肝移植相关。基于这些前提，目前需要新型或重新利用的药物。免疫抑制疗法，如皮质类固醇，仍存在争议，主要由于脱靶效应的安全性问题以及疗效增强的证据有限。已知纳米颗粒可在肝脏中积累。其中，亲和素-核酸-纳米组装体（ANANAS）因其多功能性、易于调控、生物可降解性、生物相容性和可规模化生产而成为有前景的药物载体。尽管存在众多PBC模型，但没有任何一个模型能像ARE Del-/-小鼠那样复制人类疾病的关键特征。研究人员以该模型为研究对象，对装载酸可释放地塞米松的ANANAS（ANANAS-Hz-Dex-M）进行非肠道给药，以评估其分布、药代动力学和治疗效果。单次治疗显示出选择性肝趋向性，具有特异性类固醇释放，并与驻留巨噬细胞相互作用。多次给药显著减轻了肝纤维化。在体外，从ARE Del-/-小鼠分离的库普弗细胞内化纳米组装体，并降低了炎症特征。研究人员的研究结果将ANANAS-Hz-Dex-M描述为一种具有引导驻留巨噬细胞可塑性和改善疾病病程潜力的工具。
原发性胆汁性胆管炎（PBC）是一种以胆管上皮细胞免疫介导损伤为特征的慢性自身免疫性肝病，熊去氧胆酸（UDCA）作为一线治疗，对约40%患者无效，且与死亡风险增加和肝移植需求相关。皮质类固醇等免疫抑制剂虽用于PBC-自身免疫性肝炎（AIH）重叠综合征，但脱靶效应和有限疗效限制了其应用。纳米颗粒（NPs）可靶向肝脏，亲和素-核酸-纳米组装体（ANANAS）因其多功能性、可降解性和生物相容性成为理想载体。研究人员利用ARE Del
-/-小鼠模型（由Young H.A.教授提供），该模型通过慢性干扰素-γ（IFN-γ）表达模拟人类PBC的关键特征，包括女性优势、自身免疫性胆管炎和纤维化。研究采用单次和多次腹腔注射给药，通过荧光成像、液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）、组织学染色（HE、天狼星红、免疫组化）、实时定量PCR（qPCR）和免疫荧光等技术，评估了载地塞米松的ANANAS（ANANAS-Hz-Dex-M）的分布、药代动力学和疗效，并在体外分离库普弗细胞（KCs）进行功能验证。
**3.1 ARE-Del
-/-小鼠模型中炎症和纤维化增加**：通过体重、脾重、血清碱性磷酸酶（ALP）和总胆汁酸（TBA）检测，以及肝脏HE、IBA-1和天狼星红染色，显示HO小鼠存在显著胆汁淤积、炎症浸润和纤维化，且胶原面积和熵值变化提示纤维化更有序。基因表达分析证实炎症因子（IFN-γ、IL-1β、TNF-α、CCL2）和纤维化标志物（α-SMA、COL1α1、COL1α2、COL3α1、MMP2、MMP9、TIMP1）上调。
**3.2 单次ANANAS-Hz-Dex-M治疗表现出肝趋向性和选择性药物释放**：通过荧光成像和药代动力学分析，发现F-ANANAS-Hz-Dex-M在WT和HO小鼠中均优先分布于肝脏，且与CD68阳性巨噬细胞共定位。在HO小鼠中，纳米颗粒（NPs）摄取更慢但积累更多，且地塞米松（Dex）在肝脏中持续释放至48小时，而在血浆和肾脏中无释放。
**3.3 多次ANANAS-Hz-Dex-M治疗减轻纤维化并缓解疾病进程**：在HO雄性小鼠中，多次给药后，ANANAS-Hz-Dex-M显著降低肝匀浆抗线粒体抗体（AMA）水平和血清TBA，空ANANAS降低血清ALP。组织学显示，ANANAS-Hz-Dex-M增加巨噬细胞面积和大小，提示吞噬活性，并显著减少肝实质内胶原沉积。基因表达分析显示，ANANAS-Hz-Dex-M下调TNF-α和多种纤维化标志物（COL1α2、COL3α1、α-SMA、MMP2、MMP9、TIMP1），但未显著影响IL-1β、CCL2和TGF-β。免疫荧光显示，ANANAS-Hz-Dex-M减少库普弗细胞（KCs）中NF-κB核转位。
**3.4 ANANAS-Hz-Dex-M调节分离的KCs**：体外分离HO小鼠KCs，ANANAS-Hz-Dex-M显著降低促炎细胞因子（IL-1β、TNF-α、CCL5）和TGF-β的表达，并下调MMP9。空ANANAS也部分降低TNF-α，提示NPs本身通过巨噬细胞吞噬发挥免疫调节作用。
**讨论与结论**：讨论部分强调，PBC治疗需新策略，ANANAS-Hz-Dex-M通过靶向肝脏驻留巨噬细胞，抑制NF-κB活化，减轻炎症和纤维化。空ANANAS的疗效可能与巨噬细胞吞噬诱导免疫耐受有关。研究结论：研究人员的研究结果将ANANAS-Hz-Dex-M描述为一种具有引导驻留巨噬细胞可塑性和改善疾病病程潜力的工具，且未来可联合其他药物靶向PBC发病机制。该论文发表在《Biomedicine》。
