确定NCOA5-ZCCHC3/FGF22轴作为肺癌腺癌迁移与侵袭预后标志物的有效性验证

《Cell Death & Disease》：Identification and validation of NCOA5-ZCCHC3/FGF22 axis as a prognostic marker in lung adenocarcinoma migration and invasion

　　

摘要

肺腺癌是肺癌中最常见的亚型，会导致全球范围内大量的死亡病例。核受体共激活因子5（NCOA5）与多种恶性肿瘤有关，但其在肺腺癌中的功能作用及调控机制至今仍不完全清楚。在本研究中，通过免疫组化、RT-PCR和Western blotting技术检测了94对肺腺癌组织及其邻近组织的NCOA5表达情况。此外，还通过shRNA敲低、CRISPR介导的基因敲除以及过表达模型来研究NCOA5对肺腺癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡、细胞周期进展以及类器官形成的影响。同时利用异种移植模型验证了NCOA5在体内的致癌性。IP-MS和共免疫沉淀技术用于识别与NCOA5相互作用的蛋白质，而ChIP-seq和双荧光素酶实验则用于分析下游的转录调控机制。研究发现，NCOA5在肺腺癌组织中显著上调，且与疾病晚期、分化程度低以及总体生存率下降相关，可作为独立的预后因子（P?<?.040）。NCOA5敲低会抑制肺腺癌细胞的增殖和迁移能力，促进细胞进入G0/G1期停滞状态，引发细胞凋亡，减少类器官形成，并抑制异种移植瘤的生长；而NCOA5过表达则会产生相反的效果。在IP-MS检测到的39种潜在相互作用蛋白中，ZCCHC3被确认为NCOA5的直接结合蛋白。去除ZCCHC3后会表现出与NCOA5缺失相似的效应，同时能逆转NCOA5引发的细胞增殖、迁移、侵袭及菌落形成现象，进一步证明了NCOA5与ZCCHC3之间存在功能性相互作用。ChIP-seq分析显示，纤维芽生长因子22（FGF22）是NCOA5的直接转录靶标。在肺腺癌组织中，FGF22的表达明显降低，而较高的FGF22表达水平则与患者更好的生存率相关。NCOA5会抑制FGF22的转录，而抑制NCOA5的表达则会增加FGF22的水平。从功能上来看，敲低FGF22会增强肺腺癌的恶性程度，而恢复FGF22的表达则能在体外和体内消除NCOA5的致癌效应。综上所述，这些研究结果揭示了一个此前未被发现的NCOA5–ZCCHC3/FGF22调控轴，该轴推动了肺腺癌的进展，同时也为理解NCOA5在肺腺癌发病机制中的作用提供了新的见解。