电针通过DNA甲基化–RhoGDIα轴发挥对缺血性中风的神经保护作用

《Journal of Molecular Histology》：Electroacupuncture confers neuroprotection against ischemic stroke via the DNA methylation–RhoGDIα axis

　　

摘要

电针疗法已成为治疗缺血性脑损伤的一种有前景的替代疗法，但其背后的分子机制尚未完全阐明。本研究在缺血性中风的小鼠模型中探讨了电针的神经保护作用及其表观遗传机制。通过阻断小鼠的中脑动脉来诱发脑缺血，手术后再在百会（GV20）和左足三里（ST36）穴位施加电针治疗。研究通过评估神经功能缺损情况、利用TTC染色测定梗死体积、通过Nissl染色评估神经元损伤程度，进而确定RhoGDIα蛋白的表达水平。同时，采用ELISA方法检测整体DNA甲基化程度，通过定量甲基化特异性PCR技术分析RhoGDIα启动子区域的甲基化情况，再利用qPCR检测潜在的DNA甲基转移酶和去甲基化酶的mRNA表达水平。实验结果表明，电针能够减轻由MCAO引发的脑损伤，表现为神经功能评分的提升、梗死体积的缩小以及神经元损失的减少。MCAO发生后RhoGDIα的表达会下降，而电针治疗可使其恢复。通过药物抑制RhoGDIα的功能，可消除电针的神经保护作用，这进一步凸显了该蛋白在电针介导的保护作用中的关键地位。从机制上来看，MCAO会导致RhoGDIα启动子区域过度甲基化，而电针可逆转这一状况，从而恢复RhoGDIα的表达。此外，与DNA甲基化抑制剂5-阿扎胞苷联合使用还能进一步增强电针的神经保护效果。我们的研究结果表明，电针通过启动子去甲基化对RhoGDIα进行表观遗传调控，进而缓解缺血性脑损伤。本研究将RhoGDIα确定为电针诱导神经保护作用的关键介质，并指出DNA甲基化与RhoGDIα之间的调控关系可能是治疗缺血性中风的一个重要靶点。