布瓦西坦联合咪达唑仑与氯胺酮降低大鼠梭曼诱导的惊厥及神经退行性变

《Neurology International》：Brivaracetam in Combination with Midazolam and Ketamine Reduces Soman-Induced Seizure and Neurodegeneration in Rats

　　

背景与目的：癫痫持续状态（SE）是一种危及生命的病症，需立即处置以有效控制。尽管苯二氮?类为SE一线治疗，但延迟给药后可发展为苯二氮?耐药。在苯二氮?耐药SE临床前模型中，于咪达唑仑基础上联用抗癫痫发作药物（ASM）以降低神经元兴奋性并增强抑制功能，对防范 prolonged seizure 后继发的神经退行性变与癫痫发生至关重要。布瓦西坦（brivaracetam）为近期FDA批准的ASM，用于儿科及成人部分性发作单药或辅助治疗。研究人员评估了布瓦西坦单药或与咪达唑仑、氯胺酮联用对有机磷神经毒剂（OPNA）诱导大鼠难治性SE的疗效。方法：成年雄性大鼠给予致痫剂量梭曼（soman），梭曼暴露后1分钟给予硫酸阿托品与氯化肟解磷定（asoxime chloride），惊厥发作后40分钟给予布瓦西坦单药或布瓦西坦-咪达唑仑-氯胺酮联用。评估指标包括惊厥严重度、自发性反复惊厥（SRS）、神经元丢失及神经炎症。结果：布瓦西坦单药虽获100%存活，但仅在作为氯胺酮与咪达唑仑辅助用药时方防护SRS发生与神经退行性变；三联疗法较单药进一步降低初始惊厥严重度。结论：尽管最优组合尚需研究，该临床前证据进一步表明ASM同步多药治疗可改善OPNA诱导惊厥结局。

研究背景与立项依据

癫痫持续状态（status epilepticus，SE）可由谷氨酸能兴奋、癫痫发生与神经退行性变导致死亡，有机磷神经毒剂（organophosphorus nerve agent，OPNA）通过抑制乙酰胆碱酯酶诱发SE。现行方案为肟类+抗胆碱药+苯二氮?类（如咪达唑仑），但暴露后延迟30分钟以上给药则疗效下降并产生苯二氮?耐药。前期研究显示N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDAR）拮抗药氯胺酮联合苯二氮?可部分防护胆碱能SE，但神经保护不全，亟需第三种抗癫痫发作药物（asm，antiseizure medication）形成辅助多药方案。布瓦西坦（brivaracetam）为高亲和力突触囊泡蛋白2A（SV2A）配体，较左乙拉西坦血脑屏障穿透更快、起效更速，且不调制γ-氨基丁酸A型受体（GABA_AR）与NMDAR，具备与咪达唑仑-氯胺酮机制互补的潜力。本研究在延迟治疗大鼠梭曼模型中检验布瓦西坦单药及三联疗法效用，论文发表于《Neurology International》。

主要技术方法

成年雄性Sprague Dawley大鼠（275–300 g）皮下注射LD₉₀剂量梭曼（118.1 μg/kg），1分钟后肌注阿托品+HI-6，惊厥 onset 后40分钟腹腔给药（咪达唑仑3 mg/kg、布瓦西坦10/30/100 mg/kg、或三联）。皮下植入遥测发射器连续记录EEG与体温；神经病理终点取脑行NeuN与Iba1免疫组化，ImagePro/ImageJ定量神经元密度与小胶质活化，Stereoinvestigator立体学计数海马CA1；EEG功率谱分δ/θ/α/β/γ带，MATLAB算分贝功率积分；行为按改良Racine量表盲评；统计用GLM重复测量、Kaplan–Meier、Kruskal–Wallis等。样本队列即上述分组大鼠，每组6–11只。

研究结果

3.1 生存、行为惊厥、体温与体重

各组终点存活率无显著差异：咪达唑仑单药87.5%，布瓦西坦各剂量100%，二联70%，三联71.4%。三联组与100 mg/kg布瓦西坦组体温恢复优于咪达唑仑；体重下降在各组间无持续组间差异。

3.2 惊厥活动与癫痫发生

三联疗法较咪达唑仑单药缩短惊厥时长，治疗1小时EEG功率积分降低；70–150分钟全谱功率变化减小；250–600分钟δ带升高与γ带降低均被衰减。14天随访中，三联组SRS发生率与发作次数显著低于咪达唑仑单药（Kaplan–Meier示潜伏期延长），提示抑制癫痫发生。

3.3 胆碱能SE所致神经病理

NeuN计数显示三联与布瓦西坦100 mg/kg防护海马CA1神经元丢失；三联额外减轻内侧/外侧丘脑神经元丢失；梨状皮层各区仍次于未暴露对照。Iba1显示三联降低梨状皮层、CA1、内外侧丘脑小胶质密度，CA1胞体/面积比亦降，提示神经炎症减轻；二联仅CA1有类似减弱。

讨论与结论翻译

本研究在梭曼诱导延迟治疗SE大鼠中比较咪达唑仑单药、布瓦西坦单药、二联及咪达唑仑-氯胺酮-布瓦西坦三联。添加布瓦西坦为第三ASM较咪达唑仑单药降低惊厥时长、严重度、癫痫发生、神经退行性变与神经炎症；布瓦西坦单药虽全存活，但未减急性惊厥与SRS，仅三联兼抑两者。三联的海马CA1防护伴炎症减轻，或关联其唯一降低SRS；丘脑部分防护但梨状皮层等未全护，神经保护不完全。OPNA-SE因乙酰胆碱酯酶不可逆抑制而快速苯二氮?耐药，下游退化/炎症/癫痫发生与其他SE模型共享。结果显示同步多药优于单药，布瓦西坦可作咪达唑仑-氯胺酮有效第三ASM。局限为缺咪达唑仑-氯胺酮二联直比，未来需优化多药组合。结论：布瓦西坦作为苯二氮?与氯胺酮辅助ASM对胆碱能SE具潜在获益。