大片段基因实验，TA能帮您

如下长片段基因涉及的实验，您那边有在做吗？

• 大片段酶切凝胶回收（10–50 kb）

• BAC / 超大质粒克隆（50–300 kb） 

• 长读测序（Nanopore/PacBio，>50 kb gDNA）

提取的核酸是否遇到如下问题：

• 核酸最长的片段仅有20kbp

• 核酸得率很低，完全不够下游实验的应用

• 纯度不高，影响下游测序或者酶切

备受打击

为什么会遇到这类问题：

1. 机械剪切断裂：涡旋、高速吸打、高速离心、细吸头、反复冻融都会切碎长链 

2. 常规硅胶离心柱截留 / 断裂超长 DNA（柱膜孔径小，>20 kb 极易堵柱、断链） 

3. 长片段吸附 / 洗脱效率低，易不可逆吸附在塑料管壁 

4. 核酸酶微量降解、高盐 / 有机溶剂易导致长链变性、缺口

基因兔博士给您带来长片段核酸纯化集锦

法宝一：PCR&胶大片段核酸产物纯化——NucleoTrap®大片段纯化试剂盒（20bp-50kpb）

基于悬浮硅珠技术的回收方案，可回收20bp-50kpb之间的片段。

这种技术的不同之处在于：整个过程DNA都在溶液中进行，通过与悬浮的硅珠温和地结合、洗涤，最后再被洗脱。就像用手轻轻托起一条大鱼，而不是用网兜猛拉上来，最大限度地避免了机械损伤。

这不仅仅是理论上的优越。实测数据表明，NucleoTrap®对于长达19.4 kb的DNA片段，仍能保持高达74%的回收率。而对于更长的片段（最高至50 kb），只需在洗脱时稍加优化（如在55°C孵育），就能获得极致效果。

不同片段大小基因的回收效率：

两款产品该如何选择呢？

• 如果你需要从凝胶里切下一个DNA条带（无论大小）进行回收，请选择 NucleoTrap®；

• 如果你的PCR反应完成后，想直接纯化反应液中的目的产物（并去除引物二聚体等小杂质），请选择 NucleoTrap®CR

法宝二：大结构质粒提取——NucleoBond BAC 系列（<300kbp） 

特殊的二氧化硅阴离子交换树脂，允许裂解液、洗涤液和洗脱液重力过柱，无需离心机离心，超快速纯化 cosmids 和大结构(P1, BAC, PACs)质粒，最大质粒回收片段可达 300 kbp，同时保护质粒形态。

NucleoBond BAC 100 试剂盒

采用一代阴离子交换树脂技术；NucleoBond® Folded Filter 折叠滤纸进行裂解液澄清。

NucleoBond® Folded Filter

产品参数

NucleoBond  Xtra BAC试剂盒

采用二代阴离子交换树脂技术，流速更快，得率更高；NucleoBond Xtra BAC Column Filters 和阴离子树脂结合，实现裂解液过滤和过柱一步完成。

产品参数

法宝三：长读长测序核酸抽提——NucleoBond®& Monarch®

NucleoBond®  HMW 核酸抽提试剂盒

NucleoBond® HMW采用阴离子交换色谱技术来进行核酸纯化。完整性高、纯度好的核酸成为常用的 long-read 测序技术（如 SMRT 和 Nanopore）以及 long-range short-read 测序方法（如 Next GEM（10× Genomics））的理想选择。 

片段长，最长可达 200 kbp： 

裂解液重力过柱，无需离心，减少了离心力对核酸的破碎作用，尽量保证核酸原生态，最长片段可达 200 kbp。

纯度高：

采用了阴离子交换色谱技术，对核酸下游应用有抑制作用的组分均被清除，核酸纯度较高。

样本类型广：

相比以往的核酸抽提产品，这款试剂盒可以覆盖大多数样本类型，并且支持更大的上样量，比如 1.5 g 植物组织、300 mg 微生物样本（革兰氏阴性/阳性菌、酵母菌）、300 mg 动物组织、2 ml 血液/体液、107个细胞（酶裂解法）等。

速度快：

包括 30 min 的裂解时间在内，整个提取过程 2 h。

客户测试结果：

图1

图2

DNA 来自植物样本黄褐棉，使用 NucleoBond® HMW DNA 试剂盒进行核酸纯化。如图1所示，在 164251 bp检测到主峰，最长片段可达 200 kbp。图2，核酸得率和纯度表现。

Monarch® 高分子量 DNA 提取试剂盒 

（用于细胞和血液：NEB #T3050，用于组织和其他样本：NEB #T3060）

核心技术：玻璃微珠-振荡裂解，通过转速梯度（500–2000 rpm）主动控制片段大小

 • 快速且简便的工作流程（细胞：30 min，血液：60 min，组织 / 细菌：90 min），让您在同一天完成从样本到测序的全流程；

• 可以从细胞、血液、软器官组织和细菌中获得 Mb 级别的超高分子量 DNA（UHMW DNA）； 

• DNA 片段大小可通过裂解过程中的搅拌速率进行调节，使用灵活，可以根据测序需求进行优化。

Monarch 组织高分子量 DNA 提取试剂盒从组织和细菌中提取高分子量基因组 DNA